| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-33页 |
| ·1,3-丙二醇的性质及应用领域 | 第13-14页 |
| ·1,3-丙二醇的生产及市场情况 | 第14页 |
| ·1,3-丙二醇的生产方法 | 第14-15页 |
| ·微生物发酵法生产1,3-丙二醇的研究进展 | 第15-24页 |
| ·生产菌种 | 第15页 |
| ·1,3-丙二醇生物合成途径 | 第15-17页 |
| ·1,3-丙二醇生物合成途径中的关键酶 | 第17-21页 |
| ·基因工程研究 | 第21-24页 |
| ·底物和产物对细胞生长抑制作用的研究 | 第24-26页 |
| ·底物和产物对细胞生长的抑制作用及其与代谢的关系 | 第24-25页 |
| ·包埋法在提高重组菌耐受性方面的应用 | 第25-26页 |
| ·展望 | 第26页 |
| ·立题意义和本论文的研究内容 | 第26-27页 |
| ·立题意义 | 第26页 |
| ·研究内容 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-33页 |
| 第二章 产1,3-丙二醇重组菌 E. coli JM109(pUCtac-dhaB-yqhD)的构建 | 第33-49页 |
| ·材料与方法 | 第34-40页 |
| ·菌株和质粒 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·工具酶和试剂 | 第34-36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·分子克隆技术 | 第36-38页 |
| ·重组菌全细胞蛋白SDS-PAGE 分析 | 第38-39页 |
| ·酶活力测定方法 | 第39-40页 |
| ·E. coli JM109(pUCtac-dhaB-yqhD)质粒稳定性分析 | 第40页 |
| ·重组菌发酵实验 | 第40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-46页 |
| ·含甘油脱水酶基因dhaB 的重组质粒pUCtac-dhaB 的构建 | 第40-41页 |
| ·甘油脱水酶基因dhaB 的核苷酸序列分析 | 第41页 |
| ·含1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的基因yqhD 的重组质粒pEtac-yqhD 的构建 | 第41-42页 |
| ·1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶基因yqhD 的核苷酸序列分析 | 第42页 |
| ·重组质粒pUCtac-dhaB-yqhD 的构建 | 第42-44页 |
| ·重组菌全细胞蛋白 SDS-PAGE 电泳分析 | 第44-45页 |
| ·酶活力分析 | 第45页 |
| ·E. coli JM109(pUCtac-dhaB-yqhD)质粒稳定性分析 | 第45页 |
| ·重组菌发酵验证实验 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第三章 产1,3-丙二醇重组菌 E. coli JM109(pHsh-dhaB-yqhD)的构建 | 第49-57页 |
| ·材料与方法 | 第49-50页 |
| ·菌株和质粒 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·工具酶和试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·培养方法 | 第49页 |
| ·分子克隆技术 | 第49-50页 |
| ·重组菌全细胞蛋白SDS-PAGE 分析 | 第50页 |
| ·酶活力测定方法 | 第50页 |
| ·E. coli JM109(pHsh-dhaB-yqhD)质粒稳定性分析 | 第50页 |
| ·重组菌发酵实验 | 第50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-55页 |
| ·含1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶基因yqhD 的重组质粒pHsh-yqhD 的构建 | 第50-51页 |
| ·重组质粒pHsh-dhaB-yqhD 的构建 | 第51-53页 |
| ·酶活力分析 | 第53页 |
| ·重组菌全细胞蛋白SDS-PAGE 电泳分析 | 第53页 |
| ·E. coli JM109(pHsh-dhaB-yqhD)质粒稳定性分析 | 第53-54页 |
| ·重组菌初步发酵实验 | 第54页 |
| ·维生素812 对E. coli JM109(pHsh-dhaB-yqhD)发酵结果的影响 | 第54-55页 |
| ·本章小结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-57页 |
| 第四章 甘油脱水酶激活因子的编码基因dhaG 和dhaF 的克隆及与pHsh-dhaB-yqhD 的串联表达 | 第57-66页 |
| ·材料与方法 | 第57-59页 |
| ·菌株和质粒 | 第57页 |
| ·培养基 | 第57页 |
| ·工具酶和试剂 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·培养方法 | 第57页 |
| ·分子克隆技术 | 第57-59页 |
| ·重组质粒pHsh-yqhD-dhaG-dhaF-dhaB 的构建 | 第59页 |
| ·酶活力测定方法 | 第59页 |
| ·重组菌全细胞蛋白SDS-PAGE 电泳分析 | 第59页 |
| ·E. coli JM109(pHsh-dhaB-dhaG-dhaF -yqhD)质粒稳定性分析 | 第59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-64页 |
| ·重组质粒pHsh-yqhD-dhaG 的构建 | 第59-60页 |
| ·重组质粒pHsh-yqhD-dhaG-dhaF 的构建 | 第60-62页 |
| ·重组质粒pHsh-yqhD-dhaG-dhaF-dhaB 的构建 | 第62-63页 |
| ·甘油脱水酶激活因子编码基因dhaG 与dhaF 的核苷酸序列分析 | 第63页 |
| ·酶活力分析 | 第63页 |
| ·重组菌全细胞蛋白SDS-PAGE 电泳分析 | 第63-64页 |
| ·E. coli JM109(pHsh -dhaB -dhaG-dhaF-yqhD)质粒稳定性分析 | 第64页 |
| ·本章小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-66页 |
| 第五章 重组菌 E. coli JM109(pHsh-dhaB-yqhD-dhaG-dhaF)发酵培养基优化 | 第66-79页 |
| ·材料与方法 | 第66-68页 |
| ·菌株 | 第66-67页 |
| ·培养基和培养条件 | 第67页 |
| ·Box-Behnken 中心组成实验设计优化培养基组成 | 第67-68页 |
| ·结果与讨论 | 第68-77页 |
| ·初始甘油浓度对重组菌发酵的影响 | 第68页 |
| ·酵母膏浓度对重组菌发酵的影响 | 第68-69页 |
| ·磷酸二氢钾浓度对重组菌发酵的影响 | 第69页 |
| ·维生素B_(12) 浓度对重组菌发酵的影响 | 第69-70页 |
| ·Box-Behnken 实验设计优化重组菌的发酵培养基 | 第70-76页 |
| ·5 L 发酵罐上重组菌的发酵特性 | 第76-77页 |
| ·本章小结 | 第77页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 第六章 重组菌 E. coli JM109(pHsh-dhaB-yqhD-dhaG-dhaF)的固定化研究 | 第79-88页 |
| ·材料与方法 | 第79-81页 |
| ·菌株 | 第79页 |
| ·培养基 | 第79页 |
| ·主要试剂 | 第79-80页 |
| ·主要仪器 | 第80页 |
| ·发酵方法 | 第80页 |
| ·检测方法 | 第80-81页 |
| ·结果与讨论 | 第81-86页 |
| ·固定化细胞诱导时间的确定 | 第81页 |
| ·正交优化试验结果与分析 | 第81-82页 |
| ·营养因子对重组菌固定化发酵生产1,3-丙二醇的影响 | 第82-85页 |
| ·重组菌固定化细胞的稳定性 | 第85-86页 |
| ·本章小结 | 第86页 |
| 参考文献 | 第86-88页 |
| 主要结论 | 第88-90页 |
| 创新点 | 第90-91页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 主要符号对照表 | 第93页 |
