| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第9-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-27页 |
| ·基因印迹研究进展 | 第13-17页 |
| ·基因印迹的概念及其发现 | 第13页 |
| ·印迹基因的基本特征 | 第13-16页 |
| ·基因印迹的分子机制 | 第16-17页 |
| ·猪体细胞克隆研究进展 | 第17-22页 |
| ·体细胞核移植研究进展 | 第17-18页 |
| ·猪体细胞克隆的主要环节及影响因素 | 第18-21页 |
| ·猪体细胞克隆技术的应用价值 | 第21-22页 |
| ·基因印迹与克隆动物发育 | 第22-24页 |
| ·基因印迹与DNA甲基化 | 第22-23页 |
| ·基因印迹与克隆动物发育异常 | 第23-24页 |
| ·本试验拟研究印迹基因的研究现状 | 第24-26页 |
| ·H19基因 | 第24页 |
| ·IGF2基因 | 第24-25页 |
| ·IGF2R基因 | 第25页 |
| ·IGF2和H19基因印迹机制 | 第25-26页 |
| ·本研究的目标和内容 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-41页 |
| ·试验材料 | 第27-30页 |
| ·试验动物 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·试验试剂 | 第28页 |
| ·部分试剂的配制 | 第28-30页 |
| ·试验方法 | 第30-41页 |
| ·克隆猪的获得 | 第30-31页 |
| ·组织样本的采集和保存 | 第31页 |
| ·基因组DNA提取 | 第31-32页 |
| ·基因组DNA浓度和质量的检测 | 第32-34页 |
| ·硫酸氢钠修饰基因组DNA | 第34-35页 |
| ·巢氏PCR引物 | 第35-36页 |
| ·PCR扩增 | 第36页 |
| ·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第36-37页 |
| ·目的片段纯化与回收及克隆测序 | 第37-40页 |
| ·常用软件 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-55页 |
| ·各样品基因组DNA的提取 | 第41页 |
| ·基因组DNA的紫外分光光度计检测结果与分析 | 第41页 |
| ·巢氏PCR扩增结果与分析 | 第41-43页 |
| ·目的片段克隆结果及分析 | 第43页 |
| ·猪各组织中IGF2/H19和IGF2R基因的甲基化状态及分析 | 第43-53页 |
| ·IGF2/H19基因DMR1的甲基化状态及分析 | 第43-46页 |
| ·猪不同组织中IGF2/H19基因DMR2的甲基化分析 | 第46-49页 |
| ·猪不同组织中IGF2/H19基因DMR3的甲基化分析 | 第49-51页 |
| ·猪不同组织中IGF2R基因DMR甲基化分析 | 第51-53页 |
| ·供体细胞IGF2/H19和IGF2R基因的甲基化状态及分析 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-59页 |
| ·印迹基因甲基化的研究方法 | 第55-56页 |
| ·甲基化敏感的限制性内切酶法 | 第55页 |
| ·甲基化特异性PCR(MSP) | 第55页 |
| ·亚硫酸氢盐测序法(bisulfite sequencing) | 第55-56页 |
| ·印迹基因在克隆猪各组织中的甲基化 | 第56-58页 |
| ·印迹基因在同批传代胎儿成纤维中的甲基化 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
