| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract in English | 第6-13页 |
| 第一部分 体内电穿孔条件的筛选和对SPF级KM雄鼠睾丸损伤及其生殖功能的实验研究 | 第13-30页 |
| 1．1 前言 | 第13-14页 |
| 1．2 材料与方法 | 第14-19页 |
| 1．2．1 实验动物 | 第14页 |
| 1．2．2 实验仪器和手术器械 | 第14页 |
| 1．2．3 试剂 | 第14页 |
| 1．2．4 方法 | 第14-19页 |
| 1．2．4．1 动物分组 | 第14-16页 |
| 1．2．4．2 体内电穿孔 | 第16页 |
| 1．2．4．3 体内电穿孔后附睾精子计数和活力评估 | 第16-17页 |
| 1．2．4．4 体内电穿孔后睾丸形态观察和组织切片制作 | 第17-19页 |
| 1．2．4．5 体内电穿孔后对雄鼠生殖性能影响的观察 | 第19页 |
| 1．2．5 统计学分析 | 第19页 |
| 1．3 结果 | 第19-25页 |
| 1．3．1 体内电穿孔后睾丸重量的变化 | 第19-20页 |
| 1．3．2 体内电穿孔后睾丸形态的肉眼观察结果 | 第20-21页 |
| 1．3．3 体内电穿孔后附睾精子活力评估和精子计数结果 | 第21-22页 |
| 1．3．3．1 体内高压电穿孔后附睾精子活力评估和精子计数 | 第21页 |
| 1．3．3．2 体内低压电穿孔后附睾精子活力评估和精子计数 | 第21-22页 |
| 1．3．4 体内电穿孔后睾丸组织切片的显微结构观察结果 | 第22-25页 |
| 1．3．4．1 体内高压电穿孔后睾丸组织切片显微结构观察 | 第22-24页 |
| 1．3．4．2 体内低压电穿孔后睾丸组织切片显微结构观察 | 第24-25页 |
| 1．3．5 体内电穿孔后SPF级KM雄鼠生殖性能评价结果 | 第25页 |
| 1．4 讨论 | 第25-27页 |
| 1．5 参考文献 | 第27-30页 |
| 第二部分 睾丸内注射和体内电穿孔建立转基因小鼠 | 第30-60页 |
| 2．1 前言 | 第30-31页 |
| 2．2 材料与方法 | 第31-50页 |
| 2．2．1 实验动物的选择、分组和实验处理 | 第31-32页 |
| 2．2．2 主要试剂和工具酶 | 第32-33页 |
| 2．2．3 主要的仪器设备 | 第33页 |
| 2．2．4 质粒的来源 | 第33页 |
| 2．2．5 实验方法 | 第33-50页 |
| 2．2．5．1 质粒的转化、培养、抽提纯化和鉴定 | 第33-36页 |
| 2．2．5．2 pCE-29 DNA的PCR鉴定 | 第36-38页 |
| 2．2．5．3 pCE-29 DNA转染Hek293细胞的瞬时表达鉴定 | 第38-39页 |
| 2．2．5．4 转染液的配制 | 第39-40页 |
| 2．2．5．5 睾丸内注射和体内电穿孔 | 第40-41页 |
| 2．2．5．6 雌鼠的同期排卵和交配处理 | 第41页 |
| 2．2．5．7 仔鼠中EGFP基因的检测 | 第41-50页 |
| 2．2．5．7．1 鼠尾基因组DNA中EGFP基因的PCR检测 | 第41-43页 |
| 2．2．5．7．2 鼠尾基因组DNA中EGFP基因的Southern检测 | 第43-50页 |
| 2．2．6 统计学分析 | 第50页 |
| 2．3 结果 | 第50-54页 |
| 2．3．1 pCE-29 DNA转染Hek293细胞的瞬时表达结果 | 第50-51页 |
| 2．3．2 pCE-29 DNA PCR产物的鉴定结果 | 第51-52页 |
| 2．3．3 鼠尾基因组DNA PCR检测结果 | 第52-53页 |
| 2．3．4 鼠尾基因组DNA酶切电泳结果 | 第53页 |
| 2．3．5 鼠尾基因组DNA的Southern印迹检测结果 | 第53-54页 |
| 2．4 讨论 | 第54-56页 |
| 2．5 参考文献 | 第56-60页 |
| 全文小结 | 第60-61页 |
| 综述 | 第61-77页 |
| 英文缩写词对照表 | 第77-78页 |
| 攻读学位期间成果 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 第一军医大学学位论文原创性声明 | 第80页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第80页 |
