星星草耐盐分子机理研究及相关基因的克隆
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 绪论 | 第9-23页 |
| ·引言 | 第9页 |
| ·植物的耐盐机理 | 第9-12页 |
| ·盐害对植物的影响 | 第9-10页 |
| ·植物的抗盐性 | 第10-12页 |
| ·盐胁迫调控的信号传导与基因表达 | 第12-14页 |
| ·SOS信号途径 | 第12页 |
| ·脱落酸 | 第12页 |
| ·耐盐基因的转录调控元件 | 第12-14页 |
| ·基因组学方法在植物耐盐机理研究中的应用 | 第14-16页 |
| ·表达序列标签(EST)技术 | 第14页 |
| ·EST分析的思路与应用 | 第14-15页 |
| ·植物的表达序列标签 | 第15-16页 |
| ·cDNA芯片技术 | 第16-20页 |
| ·cDNA芯片在植物抗逆研究中的应用价值 | 第17页 |
| ·理论和技术基础 | 第17-18页 |
| ·植物抗逆表达谱研究的侧重点 | 第18-19页 |
| ·表达谱在植物耐盐研究中的应用价值 | 第19-20页 |
| ·星星草简介 | 第20-23页 |
| ·生物学特征 | 第20-21页 |
| ·将星星草作为研究对象的可行性 | 第21页 |
| ·本项研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-38页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·菌种与载体 | 第23页 |
| ·酶及化学试剂 | 第23页 |
| ·引物 | 第23-24页 |
| ·培养基配方 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·分析软件 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-37页 |
| ·星星草总RNA提取 | 第25-26页 |
| ·磁性球珠分离mRNA | 第26页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第26-27页 |
| ·cDNA第二链合成 | 第27页 |
| ·cDNA末端处理与分步收集 | 第27-29页 |
| ·cDNA连接与包装 | 第29-30页 |
| ·插入片段的PCR检测 | 第30页 |
| ·噬菌体的体外切除 | 第30-31页 |
| ·菌体培养 | 第31-32页 |
| ·质粒的提取 | 第32页 |
| ·测序PCR反应与模板制备 | 第32-33页 |
| ·cDNA序列的测定与编辑 | 第33页 |
| ·含目的基因芯片的制备 | 第33-34页 |
| ·杂交 | 第34-36页 |
| ·芯片杂交数据的获得与初步分析 | 第36页 |
| ·EST序列分析及星星草表达谱的建立 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-65页 |
| ·总RNA的提取和mRNA的分离 | 第38-39页 |
| ·总RNA的提取 | 第38页 |
| ·mRNA的分离 | 第38-39页 |
| ·cDNA文库的构建及质量检测 | 第39-41页 |
| ·cDNA的合成及纯化 | 第39页 |
| ·cDNA的克隆与体外包装 | 第39-40页 |
| ·文库滴度及重组率测定 | 第40页 |
| ·文库插入片段的PCR检测 | 第40-41页 |
| ·文库扩增后的滴度测定 | 第41页 |
| ·cDNA文库克隆的测序和EST分析 | 第41-51页 |
| ·质粒提取与测序 | 第41页 |
| ·序列的编辑与同源性比对 | 第41-42页 |
| ·同源序列的物种来源 | 第42-43页 |
| ·序列的功能分类 | 第43-49页 |
| ·文库中含有一定量的全长基因 | 第49-51页 |
| ·cDNA芯片的杂交及数据分析 | 第51-55页 |
| ·数据的均一化和差异基因的筛选 | 第51-52页 |
| ·差异基因的鉴定 | 第52-55页 |
| ·结论与讨论 | 第55-63页 |
| ·NaHCO_3胁迫下星星草基因表达谱的建立 | 第55-56页 |
| ·星星草可能的耐盐机理 | 第56-58页 |
| ·cDNA芯片获得的基因表达谱 | 第58-63页 |
| ·展望 | 第63页 |
| ·本章小结 | 第63-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 附录 | 第75-82页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
