| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词与符号说明 | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| ·口蹄疫及其分子病原学 | 第13-14页 |
| ·抗口蹄疫策略概况 | 第14-17页 |
| ·疫苗免疫 | 第14-16页 |
| ·新型抗 FMDV 技术 | 第16-17页 |
| ·RNA 干扰在抗口蹄疫中的研究进展 | 第17-19页 |
| ·体内 siRNA 的来源 | 第17-18页 |
| ·RNAi 抗 FMDV 研究现状 | 第18-19页 |
| ·小结 | 第19页 |
| ·本研究的目的和技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 针对 FMDV 基因组 3D 区 RNAi 靶位的设计 | 第20-24页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-21页 |
| ·序列分析 | 第20页 |
| ·siRNA 设计 | 第20-21页 |
| ·实验结果 | 第21-22页 |
| ·下载的 O 型 FMDV 序列 | 第21-22页 |
| ·siRNA 设计结果 | 第22页 |
| ·讨论 | 第22-24页 |
| 第三章 重组载体的构建、鉴定及大量制备 | 第24-29页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·载体、模板及菌株 | 第24页 |
| ·工具酶和主要生化试剂 | 第24页 |
| ·设备和器材 | 第24页 |
| ·培养基及转化平板的制备 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·退火 | 第25页 |
| ·连接体系 | 第25页 |
| ·连接条件 | 第25-26页 |
| ·转化 | 第26页 |
| ·质粒提取、双酶切鉴定及测序 | 第26页 |
| ·重组质粒的大量制备 | 第26-27页 |
| ·实验结果 | 第27页 |
| ·双酶切电泳图 | 第27页 |
| ·测序结果 | 第27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| 第四章 细胞转染及筛选阳性克隆 | 第29-37页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·细胞和载体 | 第29页 |
| ·生化试剂 | 第29页 |
| ·实验设备和器材 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-32页 |
| ·嘌呤霉素最佳作用浓度的摸索 | 第29-30页 |
| ·转染及筛选实验 | 第30页 |
| ·转染细胞的 PCR 鉴定 | 第30-31页 |
| ·细胞活性测定 | 第31-32页 |
| ·实验结果 | 第32-35页 |
| ·嘌呤霉素最佳工作浓度的确定 | 第32-33页 |
| ·转染及筛选结果 | 第33-34页 |
| ·PCR 鉴定结果 | 第34-35页 |
| ·细胞活性实验结果 | 第35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第五章 转染阳性 BHK21 细胞抗 FMDV 效果的检测 | 第37-46页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·细胞和病毒 | 第37页 |
| ·生化试剂 | 第37页 |
| ·实验设备和器材 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-40页 |
| ·间接免疫荧光实验 | 第37-38页 |
| ·子代病毒滴度检测 | 第38页 |
| ·实时定量 PCR 实验 | 第38-40页 |
| ·乳鼠保护实验 | 第40页 |
| ·实验结果 | 第40-44页 |
| ·间接免疫荧光实验 | 第40-41页 |
| ·子代病毒滴度检测 | 第41-42页 |
| ·实时定量 PCR | 第42-43页 |
| ·乳鼠保护实验 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第六章 全文结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简历 | 第56页 |