摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
·研究目的和意义 | 第12页 |
·病毒受体的研究进展 | 第12-16页 |
·病毒受体及其生物学特性 | 第12-13页 |
·病毒受体的研究方法 | 第13-15页 |
·重要动物病毒受体的研究进展 | 第15-16页 |
·病毒受体研究展望 | 第16页 |
·噬菌体展示技术及其在动物病毒学中的应用 | 第16-20页 |
·噬菌体展示技术的原理 | 第16-17页 |
·噬菌体展示系统的分类及各自特点 | 第17-18页 |
·噬菌体展示技术在动物病毒学中的应用 | 第18-20页 |
·痘病毒的侵入宿主细胞的机制研究进展 | 第20-24页 |
·痘病毒侵入宿主细胞过程概述 | 第20-21页 |
·痘病毒与宿主细胞的结合 | 第21-22页 |
·胞吞作用和病毒的内化 | 第22-23页 |
·膜融合及穿膜作用 | 第23-24页 |
第二章 山羊痘病毒的培养、纯化及鉴定 | 第24-33页 |
·试验材料 | 第24-26页 |
·毒株,细胞及主要试剂 | 第24页 |
·试剂的配制 | 第24-26页 |
·主要仪器设备 | 第26页 |
·试验方法 | 第26-29页 |
·细胞的冻存与复苏 | 第26-27页 |
·病毒蚀斑实验 | 第27页 |
·GTPV 的培养 | 第27页 |
·差速离心 | 第27页 |
·蔗糖密度梯度离心 | 第27-28页 |
·ELISA 检测 | 第28页 |
·电镜检测 | 第28-29页 |
·试验结果 | 第29-31页 |
·病毒蚀斑实验 | 第29页 |
·CPE 的观察 | 第29-30页 |
·吸光度检测结果及蛋白浓度曲线 | 第30页 |
·ELISA 检测结果 | 第30-31页 |
·电镜观察结果 | 第31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
第三章 山羊睾丸细胞 cDNA 噬菌体展示文库的构建 | 第33-42页 |
·试验材料 | 第33-34页 |
·实验动物 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33页 |
·试剂的配制 | 第33-34页 |
·主要仪器设备 | 第34页 |
·试验方法 | 第34-38页 |
·山羊睾丸细胞的原代培养 | 第34页 |
·总 RNA 的提取及质量鉴定 | 第34页 |
·mRNA 的分离 | 第34-35页 |
·cDNA 的合成 | 第35-36页 |
·cDNA 末端修饰 | 第36-37页 |
·cDNA 片段分级分离 | 第37页 |
·cDNA 与噬菌体载体连接 | 第37页 |
·包装产物滴度测定 | 第37-38页 |
·宿主菌的转化 | 第38页 |
·文库重组率测定及插入片段大小鉴定 | 第38页 |
·试验结果 | 第38-40页 |
·山羊睾丸细胞的原代培养 | 第38-39页 |
·总 RNA 的提取及 mRNA 的分离 | 第39页 |
·噬菌体展示文库的鉴定 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
第四章 山羊痘病毒受体的初步筛选 | 第42-50页 |
·试验材料 | 第42-43页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·试剂的配制 | 第42-43页 |
·主要仪器设备 | 第43页 |
·试验方法 | 第43-45页 |
·宿主菌的准备 | 第43页 |
·纯化病毒包被酶标板 | 第43-44页 |
·文库的结合 | 第44页 |
·文库的洗脱与扩增 | 第44页 |
·PCR 鉴定与测序 | 第44-45页 |
·序列分析 | 第45页 |
·试验结果 | 第45-48页 |
·文库筛选结果 | 第45页 |
·PCR 鉴定结果 | 第45-46页 |
·序列分析结果 | 第46-47页 |
·蛋白质结构预测 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
第五章 山羊痘病毒受体结合蛋白初步研究 | 第50-60页 |
·试验材料 | 第50-51页 |
·实验动物 | 第50页 |
·病毒、菌株及载体 | 第50页 |
·主要试剂 | 第50页 |
·主要仪器设备 | 第50-51页 |
·试验方法 | 第51-53页 |
·L1 与 L5 蛋白的生物信息学分析 | 第51页 |
·引物的设计与合成 | 第51页 |
·目的片段的扩增 | 第51页 |
·重组表达载体的构建与鉴定 | 第51-52页 |
·重组质粒的诱导表达与鉴定 | 第52页 |
·重组蛋白的大量表达与纯化 | 第52页 |
·重组蛋白抗血清的制备 | 第52-53页 |
·重组蛋白封闭试验 | 第53页 |
·血清抑制试验 | 第53页 |
·试验结果 | 第53-58页 |
·L1 与 L5 的生物信息学分析结果 | 第53-56页 |
·目的基因的扩增及序列分析 | 第56页 |
·表达载体的构建与鉴定 | 第56页 |
·表达产物的 SDS-PAGE 与 Western blot 分析 | 第56-57页 |
·重组蛋白的纯化 | 第57页 |
·重组蛋白抗血清的制备 | 第57-58页 |
·蛋白封闭试验 | 第58页 |
·血清抑制试验 | 第58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
第六章 全文结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简历 | 第68页 |