| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-29页 |
| ·关于香石竹 | 第14页 |
| ·植物基因工程研究进展 | 第14-16页 |
| ·植物体内乙烯生物合成及其基因工程研究进展 | 第16-19页 |
| ·植物中乙烯生物合成途径 | 第16-17页 |
| ·植物中乙烯生物合成的调节 | 第17-18页 |
| ·植物中乙烯生物合成的基因工程研究进展 | 第18-19页 |
| ·植物转基因沉默与RNAi技术研究进展 | 第19-23页 |
| ·转录水平上的基因沉默 | 第20-21页 |
| ·转录后水平的基因沉默 | 第21页 |
| ·RNAi技术 | 第21-23页 |
| ·花卉基因工程研究进展 | 第23-26页 |
| ·花色的基因工程 | 第23-24页 |
| ·花卉保鲜基因工程 | 第24页 |
| ·花型与花发育基因工程 | 第24-25页 |
| ·花卉香味基因工程 | 第25页 |
| ·花卉的抗性基因工程 | 第25页 |
| ·花卉基因工程的问题与展望 | 第25-26页 |
| ·香石竹的遗传转化研究进展 | 第26-27页 |
| ·香石竹的组织培养体系的建立 | 第26页 |
| ·香石竹的遗传转化 | 第26-27页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 2 材料和方法 | 第29-42页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29-30页 |
| ·供试菌株及供试质粒 | 第30页 |
| ·抗生素 | 第30页 |
| ·限制性内切酶及主要试剂 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-42页 |
| ·小量抽提大肠杆菌及农杆菌质粒DNA | 第30-31页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第31-32页 |
| ·DNA凝胶电泳和回收 | 第32-33页 |
| ·连接反应 | 第33页 |
| ·香石竹ACO基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·香石竹ACO基因的植物表达载体构建 | 第34-36页 |
| ·四种重组质粒冻融法导入农杆菌 | 第36页 |
| ·植物培养条件及培养方法 | 第36页 |
| ·植株再生体系的建立 | 第36-37页 |
| ·转化体筛选及植株再生 | 第37-38页 |
| ·数据统计与分析 | 第38页 |
| ·转化植株鉴定方法 | 第38-41页 |
| ·转基因植株的下地栽培 | 第41页 |
| ·转基因植株的生理生化分析 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-61页 |
| ·香石竹ACC氧化酶基因的克隆 | 第42-43页 |
| ·香石竹ACO基因的PCR扩增 | 第42页 |
| ·PCR产物的克隆、酶切分析 | 第42页 |
| ·序列测定 | 第42-43页 |
| ·正义、反义ACO基因植物表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·含ACO基因的中间载体的构建和鉴定 | 第43页 |
| ·植物表达载体构建和鉴定 | 第43-44页 |
| ·根癌农杆菌的转化与鉴定 | 第44页 |
| ·重复ACC氧化酶基因植物表达载体的构建 | 第44-46页 |
| ·含ACO基因的中间载体构建 | 第44页 |
| ·正义重复ACO基因的植物表达载体构建和鉴定 | 第44-45页 |
| ·反义重复ACO基因的植物表达载体构建和鉴定 | 第45页 |
| ·根癌农杆菌的转化与鉴定 | 第45页 |
| ·四种植物表达载体物理图谱 | 第45-46页 |
| ·香石竹5个品种高效再生体系的建立 | 第46-50页 |
| ·外植体的选择 | 第46页 |
| ·叶龄对不定芽分化的影响 | 第46-47页 |
| ·不同培养基对幼叶不定芽分化的影响 | 第47-48页 |
| ·AgNO_3对不定芽分化的影响 | 第48-49页 |
| ·根的诱导 | 第49页 |
| ·试管苗的移栽 | 第49-50页 |
| ·转化体筛选及植株再生 | 第50-55页 |
| ·选择压力的确定 | 第50-51页 |
| ·预培养时间对抗性芽分化的影响 | 第51-52页 |
| ·农杆菌菌液浓度对抗性芽分化的影响 | 第52页 |
| ·侵染时间对抗性芽分化的影响 | 第52-53页 |
| ·共培养时间对抗性芽分化的影响 | 第53页 |
| ·乙酰丁香酮(AS)对抗性芽分化的影响 | 第53-54页 |
| ·程序化的转化条件 | 第54页 |
| ·不同品种在选择分化培养基上的分化率比较 | 第54-55页 |
| ·转化植株的检测 | 第55-58页 |
| ·不同DNA提取方法比较 | 第55页 |
| ·抗性鉴定 | 第55页 |
| ·生根鉴定 | 第55-56页 |
| ·PCR鉴定 | 第56页 |
| ·斑点杂交鉴定 | 第56页 |
| ·Southem杂交鉴定 | 第56-58页 |
| ·转化植株的生理生化分析 | 第58-61页 |
| ·瓶插寿命比较 | 第58-59页 |
| ·花朵乙烯释放量测定 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-67页 |
| ·香石竹ACO基因核DNA的克隆 | 第61页 |
| ·香石竹转化外植体的选择 | 第61页 |
| ·AgNO_3对分化率的影响 | 第61-62页 |
| ·转化条件的影响 | 第62-63页 |
| ·预培养的影响 | 第62页 |
| ·农杆菌与外植体的共培养 | 第62-63页 |
| ·乙酰丁香酮对转化率的影响 | 第63页 |
| ·玻璃化现象及畸形芽问题 | 第63-64页 |
| ·假转化体问题 | 第64页 |
| ·转基因的检测及稳定性 | 第64-65页 |
| ·与前人报道转基因延长香石竹瓶插寿命相比较 | 第65页 |
| ·转化不同T-DNA结构对乙烯释放量和瓶插寿命的影响 | 第65-66页 |
| ·实验的展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 图版与说明 | 第79-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 附录 | 第86-87页 |