| 上篇 文献综述 | 第1-32页 |
| 一 花色基因工程研究进展 | 第11-14页 |
| 1 前言 | 第11页 |
| 2 花色形成的影响因素及研究方法 | 第11-14页 |
| ·花色形成的影响因素 | 第11页 |
| ·花色基因工程的研究方法 | 第11-14页 |
| 二 花器官特异表达启动子研究进展 | 第14-16页 |
| 1 启动子克隆常用的方法 | 第14页 |
| 2 花器官特异表达启动子 | 第14-16页 |
| ·UBC6基因启动子 | 第14页 |
| ·与苯丙酮(phenylpropanoid)代谢有关的3个基因的启动子 | 第14-15页 |
| ·NOS(Nopaline Synthase)基因启动子 | 第15页 |
| ·OsChial；175基因启动子 | 第15-16页 |
| ·DOMADS1基因启动子 | 第16页 |
| ·FPS2基因启动子 | 第16页 |
| 三 观赏植物的细胞转化研究进展 | 第16-19页 |
| 1 观赏植物的细胞转化研究 | 第16-18页 |
| ·间接转化法 | 第16-18页 |
| ·直接转化法 | 第18页 |
| 2 观赏植物转基因及转基因植株获得情况 | 第18-19页 |
| 四 康乃馨遗传再生系统研究进展 | 第19-21页 |
| 1 康乃馨的形态、分类特征及生理特性 | 第19页 |
| 2 研究进展 | 第19-21页 |
| ·康乃馨的无土栽培研究 | 第19-20页 |
| ·香石竹组培过程中的玻璃化现象 | 第20页 |
| ·青霉素在香石竹组培过程中的作用 | 第20-21页 |
| 五、 靛蓝基因及蓝色花基因工程研究进展 | 第21-31页 |
| 1 蓝色花基因工程研究进展 | 第21-22页 |
| 2 靛蓝基因研究进展 | 第22-23页 |
| ·真氧产碱杆菌 | 第22-23页 |
| ·靛蓝基因 | 第23页 |
| ·bec基因 | 第23页 |
| 3 翠雀花与翠雀素 | 第23-26页 |
| ·翠雀花 | 第23-24页 |
| ·翠雀素 | 第24-26页 |
| 4 CHS基因与信号转导 | 第26-31页 |
| 六 存在的问题及展望 | 第31-32页 |
| 1 转基因花卉研究存在的问题 | 第31页 |
| ·对三大类色素的着色机理以及调节因子对花色的影响了解还很少 | 第31页 |
| ·外源基因表达的稳定性及其是否能够稳定遗传也是目前亟待解决的问题 | 第31页 |
| ·转基因植株可能带来的风险 | 第31页 |
| 2 前景展望 | 第31-32页 |
| 下篇 表达载体的构建及香石竹CHS启动子克隆 | 第32-67页 |
| 一 实验材料和实验方法 | 第32-36页 |
| 1 实验材料 | 第32-33页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·酶与试剂 | 第32页 |
| ·菌种和质粒 | 第32页 |
| ·拟南芥基因组DNA PCR扩增引物序列 | 第32-33页 |
| ·香石竹查尔酮合成酶基因PCR引物 | 第33页 |
| ·香石竹查尔酮合成酶启动子克隆引物 | 第33页 |
| 2 实验方法 | 第33-36页 |
| ·基因组DNA提取方法(改良的CTAB法) | 第33页 |
| ·PCR反应体系 | 第33页 |
| ·PCR反应程序 | 第33页 |
| ·PCR目标片段的回收方法 | 第33-34页 |
| ·回收片段与pGEM-T载体的连接 | 第34页 |
| ·CaCl_2法制各大肠杆菌感受态细胞 | 第34页 |
| ·大肠杆菌转化及蓝白斑筛选方法 | 第34页 |
| ·质粒DNA提取方法 | 第34-35页 |
| ·DNA酶切体系 | 第35页 |
| ·目标片段和载体的连接体系 | 第35页 |
| ·农杆菌感受态制备方法 | 第35页 |
| ·农杆菌液氮冻融法转化方法 | 第35页 |
| ·烟草叶片的叶盘转化方法 | 第35-36页 |
| ·查尔酮合成酶启动子克隆反应程序 | 第36页 |
| 二 实验过程 | 第36-40页 |
| 1 拟南芥CHS启动子克隆部分 | 第36-37页 |
| ·拟南芥基因组DNA的提取 | 第37页 |
| ·跑胶鉴定DNA提取结果 | 第37页 |
| ·PCR扩增两个启动子片段 | 第37页 |
| ·将两个启动子片段PCR产物分别连接到pGEM-T载体上 | 第37页 |
| ·以提取的质粒作为模板，进行PCR检测 | 第37页 |
| ·将两个启动子片段的PCR阳性质粒进行测序 | 第37页 |
| 2 载体构建部分 | 第37-39页 |
| ·小片段载体构建步骤 | 第37-38页 |
| ·大片段载体构建步骤 | 第38-39页 |
| 3 烟草转化部分 | 第39页 |
| 4 香石竹再生体系的建立及CHS启动子克隆试验 | 第39-40页 |
| ·香石竹再生体系试验 | 第39页 |
| ·香石竹CHS启动子克隆试验 | 第39-40页 |
| 三 实验结果与分析 | 第40-64页 |
| 1 拟南芥CHS启动子克隆部分 | 第40-47页 |
| ·小片段启动子实验结果 | 第40-45页 |
| ·大片段启动子实验结果 | 第45-47页 |
| 2 载体构建部分 | 第47-50页 |
| ·小片段载体构建质粒图及酶切分析结果 | 第47-49页 |
| ·大片段载体构建过程质粒图 | 第49-50页 |
| 3 烟草转化实验结果 | 第50-51页 |
| ·转化后的烟草提取的DNA及PCR检测结果 | 第50页 |
| ·转化得到的烟草幼苗及部分植株开花情况 | 第50-51页 |
| 4 香石竹再生体系的建立及CHS启动子克隆试验 | 第51-64页 |
| ·香石竹再生体系的建立试验 | 第51页 |
| ·香石竹CHS启动子克隆试验 | 第51-64页 |
| 四 结论与讨论 | 第64-67页 |
| 1 结论 | 第64-65页 |
| ·拟南芥CHS启动子克隆 | 第64-65页 |
| ·烟草转化 | 第65页 |
| ·香石竹CHS启动子克隆 | 第65页 |
| 2 讨论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
