一、 中文摘要 | 第1-6页 |
二、 英文摘要 | 第6-10页 |
三、 论文 | 第10-40页 |
1 前言 | 第10-11页 |
2 材料 | 第11-21页 |
2.1 人肝癌细胞HepG2的培养 | 第11-12页 |
2.2 质粒的扩增和纯化 | 第12页 |
2.3 细胞转染和单克隆克隆细胞的建立 | 第12-13页 |
2.4 细胞计数 | 第13页 |
2.5 乳酸脱氢酶的测定 | 第13页 |
2.6 细胞活性的检测(MTT) | 第13-14页 |
2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第14页 |
2.8 流式细胞仪检测细胞ARL-1的蛋白水平 | 第14页 |
2.9 免疫组化染色 | 第14-16页 |
2.10 DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第16页 |
2.11 细胞总RNA的提取 | 第16-17页 |
2.12 反转录 | 第17页 |
2.13 PCR测定mRNA水平 | 第17-18页 |
2.14 PCR产物的半定量分析 | 第18页 |
2.15 芯片的制备 | 第18页 |
2.16 探针的制备 | 第18页 |
2.17 杂交 | 第18-19页 |
2.18 洗片 | 第19-20页 |
2.19 检测及分析 | 第20-21页 |
3 结果 | 第21-32页 |
3.1 高表达醛糖还原酶相似基因-1(ARL-1)的细胞株的鉴定 | 第21-24页 |
3.1.1 RT-PCR证实 | 第21-22页 |
3.1.2 流式细胞仪分析 | 第22页 |
3.1.3 免疫组化结果 | 第22-24页 |
3.2 ARL-1基因对肝癌细胞生长的影响 | 第24页 |
3.3 ARL-1基因对抗肿瘤药物的影响 | 第24-32页 |
3.3.1 乳酸脱氢酶的测定 | 第24-25页 |
3.3.2 细胞活性的检测 | 第25-27页 |
3.3.3 琼脂糖凝胶电泳分析 | 第27页 |
3.3.4流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第27-28页 |
3.3.5 总RNA的抽提结果 | 第28页 |
3.3.6 基因芯片杂交结果 | 第28-30页 |
3.3.7 差异表达基因的初步分析 | 第30-31页 |
3.3.8 RT-PCR验证基因芯片的结果 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-37页 |
5 结论 | 第37-38页 |
6 参考文献 | 第38-40页 |
四、 综述 | 第40-57页 |
五、 致谢 | 第57-58页 |
六、 附录(在读期间发表的文章) | 第58页 |