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新疆杨转抗虫基因研究

上篇 文献综述第1-17页
 第一章 杨树基因工程研究的现状与展望第9-12页
  1 杨树转化系统的选择策略第9页
  2 影响杨树基因转化效率的因素第9-11页
  3 杨树基因工程展望第11-12页
 第二章 抗虫基因研究进展第12-14页
  1 Bt毒蛋白基因第12页
  2 蛋白酶抑制剂第12-13页
  3 凝集素基因第13页
  4 昆虫毒素基因第13页
  5 胆固醇氧化酶基因第13页
  6 营养杀虫蛋白基因第13-14页
 第三章 新型选择标记基因和报告基因第14-17页
  1 无选择标记基因植物转化系统第14页
  2 选择标记基因第14-15页
  3 报告基因第15-17页
下篇 研究报告第17-61页
 第一章 新疆杨组织培养植株再生及遗传转化受体体系的建立第17-26页
  1 材料与方法第17-18页
   ·植物材料第17页
   ·培养基第17页
   ·数据调查第17-18页
   ·新疆杨抗生素敏感性试验第18页
  2 结果与分析第18-24页
   ·生长素对叶盘分化不定芽的影响第18页
   ·细胞分裂素BA对叶盘分化不定芽的影响第18-19页
   ·细胞分裂素ZT、KT对叶盘分化不定芽的影响第19-20页
   ·新型细胞分裂素TDZ对叶盘分化不定芽的影响第20-21页
   ·新疆杨叶盘分化抗生素敏感性测定第21-23页
   ·新疆杨小植株生根抗生素敏感性测定第23页
   ·壮苗与生根第23页
   ·小结第23-24页
  3 讨论第24-26页
   ·多种分裂素配合使用与单独使用效果比较第24页
   ·Km筛选浓度的相对可比性第24页
   ·本底测试与转化操作间的时间差第24-26页
 第二章 新疆杨农杆菌转化系统的优化和Km~r植株的获得第26-40页
  1 实验材料第26-27页
   ·植物受体材料第26页
   ·试剂第26页
   ·质粒和菌株第26页
   ·培养基第26-27页
  2 新疆杨根癌农杆菌Ti质粒介导的基因转化第27-29页
   ·预培养第27页
   ·正、负对照的设置第27页
   ·农杆菌的活化和侵染菌液制备第27页
   ·外植体的侵染和共培养第27-28页
   ·影响根癌农杆菌转化新疆杨效果的因素第28页
   ·分步筛选培养和Km~r植株的获得第28-29页
  3 结果与分析第29-36页
   ·预培养时间对产生Km~r芽的影响第29-30页
   ·侵染时间对产生Km~r芽的影响第30-31页
   ·共培养时间对产生Km~r芽的影响第31-32页
   ·添加乙酰丁香酮对产生Km~r芽的影响第32-33页
   ·共培养培养基中添加AS浓度对产生Km~r芽的影响第33-34页
   ·侵染菌液的制备方法对产生Km~r芽的影响第34-35页
   ·外植体状态对产生Km~r芽的影响第35页
   ·分步筛选的效果第35-36页
   ·小结第36页
  4 讨论第36-40页
   ·植物材料的生理状态第36页
   ·优化转化系统的相对性和可行性第36-37页
   ·影响转化效率的主要因素第37页
   ·评价转化效率的指标第37-38页
   ·选择转化体的不同策略第38-39页
   ·得到非嵌和转基因植株的可能性第39-40页
 第三章 新疆杨转基因植株的分子检测和饲虫实验第40-52页
  1 实验材料第40页
   ·植物受体材料第40页
   ·酶及试剂盒第40页
   ·质粒和菌株第40页
   ·同位素第40页
   ·引物第40页
   ·昆虫幼虫第40页
  2 实验方法第40-45页
   ·新疆杨Km~r植株的分子检测第40-44页
   ·新疆杨PCR阳性植株的饲虫实验第44页
   ·新疆杨转基因植株的移栽第44-45页
  3 结果与分析第45-50页
   ·Km~r植株的PCR检测第45-46页
   ·Km~r植株的PCR-Southern分析第46页
   ·PCR阳性植株的Southern斑点杂交检测第46-47页
   ·PCR阳性植株的Southern-blotting杂交检测第47-48页
   ·PCR阳性植株饲虫实验第48-50页
   ·新疆杨转基因植株的移栽第50页
   ·小结第50页
  4 讨论第50-52页
   ·两种纯化DNA方法的优缺比较第50页
   ·PCR两对引物扩增效果的比较第50-51页
   ·虫试材料的选择第51页
   ·转CpTI基因植株的抗虫效果第51-52页
 第四章 菌株LBA4404(pFZY1)与LBA4404(pFWZ10)的活力差异第52-56页
  1 实验材料第52页
   ·植物受体材料第52页
   ·质粒和菌株第52页
  2 实验方法第52-53页
   ·不同体积比混合两种菌株侵染新疆杨第52页
   ·菌株生长曲线的测定第52页
   ·菌株竞争性实验第52-53页
  3 结果与分析第53-55页
   ·不同体积比混合两种菌株进行侵染结果第53页
   ·菌株LBA4404(pFZY1)和LBA4404(pFWZ10)生长曲线第53-54页
   ·菌株竞争性培养第54-55页
  4 讨论第55-56页
 第五章 主要结论和进一步研究展望第56-57页
 图版Ⅰ 新疆杨叶盘组培再生体系的建立第57-58页
 图版Ⅱ 转CpTI基因新疆杨Km~r芽的分化及分步筛选第58-59页
 图版Ⅲ 转CpTI基因新疆杨植株的获得和移栽第59-60页
 图版Ⅳ 饲喂转基因植株叶片对幼虫生长发育的影响第60-61页
参考文献第61-66页

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