上篇 文献综述 | 第1-17页 |
第一章 杨树基因工程研究的现状与展望 | 第9-12页 |
1 杨树转化系统的选择策略 | 第9页 |
2 影响杨树基因转化效率的因素 | 第9-11页 |
3 杨树基因工程展望 | 第11-12页 |
第二章 抗虫基因研究进展 | 第12-14页 |
1 Bt毒蛋白基因 | 第12页 |
2 蛋白酶抑制剂 | 第12-13页 |
3 凝集素基因 | 第13页 |
4 昆虫毒素基因 | 第13页 |
5 胆固醇氧化酶基因 | 第13页 |
6 营养杀虫蛋白基因 | 第13-14页 |
第三章 新型选择标记基因和报告基因 | 第14-17页 |
1 无选择标记基因植物转化系统 | 第14页 |
2 选择标记基因 | 第14-15页 |
3 报告基因 | 第15-17页 |
下篇 研究报告 | 第17-61页 |
第一章 新疆杨组织培养植株再生及遗传转化受体体系的建立 | 第17-26页 |
1 材料与方法 | 第17-18页 |
·植物材料 | 第17页 |
·培养基 | 第17页 |
·数据调查 | 第17-18页 |
·新疆杨抗生素敏感性试验 | 第18页 |
2 结果与分析 | 第18-24页 |
·生长素对叶盘分化不定芽的影响 | 第18页 |
·细胞分裂素BA对叶盘分化不定芽的影响 | 第18-19页 |
·细胞分裂素ZT、KT对叶盘分化不定芽的影响 | 第19-20页 |
·新型细胞分裂素TDZ对叶盘分化不定芽的影响 | 第20-21页 |
·新疆杨叶盘分化抗生素敏感性测定 | 第21-23页 |
·新疆杨小植株生根抗生素敏感性测定 | 第23页 |
·壮苗与生根 | 第23页 |
·小结 | 第23-24页 |
3 讨论 | 第24-26页 |
·多种分裂素配合使用与单独使用效果比较 | 第24页 |
·Km筛选浓度的相对可比性 | 第24页 |
·本底测试与转化操作间的时间差 | 第24-26页 |
第二章 新疆杨农杆菌转化系统的优化和Km~r植株的获得 | 第26-40页 |
1 实验材料 | 第26-27页 |
·植物受体材料 | 第26页 |
·试剂 | 第26页 |
·质粒和菌株 | 第26页 |
·培养基 | 第26-27页 |
2 新疆杨根癌农杆菌Ti质粒介导的基因转化 | 第27-29页 |
·预培养 | 第27页 |
·正、负对照的设置 | 第27页 |
·农杆菌的活化和侵染菌液制备 | 第27页 |
·外植体的侵染和共培养 | 第27-28页 |
·影响根癌农杆菌转化新疆杨效果的因素 | 第28页 |
·分步筛选培养和Km~r植株的获得 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-36页 |
·预培养时间对产生Km~r芽的影响 | 第29-30页 |
·侵染时间对产生Km~r芽的影响 | 第30-31页 |
·共培养时间对产生Km~r芽的影响 | 第31-32页 |
·添加乙酰丁香酮对产生Km~r芽的影响 | 第32-33页 |
·共培养培养基中添加AS浓度对产生Km~r芽的影响 | 第33-34页 |
·侵染菌液的制备方法对产生Km~r芽的影响 | 第34-35页 |
·外植体状态对产生Km~r芽的影响 | 第35页 |
·分步筛选的效果 | 第35-36页 |
·小结 | 第36页 |
4 讨论 | 第36-40页 |
·植物材料的生理状态 | 第36页 |
·优化转化系统的相对性和可行性 | 第36-37页 |
·影响转化效率的主要因素 | 第37页 |
·评价转化效率的指标 | 第37-38页 |
·选择转化体的不同策略 | 第38-39页 |
·得到非嵌和转基因植株的可能性 | 第39-40页 |
第三章 新疆杨转基因植株的分子检测和饲虫实验 | 第40-52页 |
1 实验材料 | 第40页 |
·植物受体材料 | 第40页 |
·酶及试剂盒 | 第40页 |
·质粒和菌株 | 第40页 |
·同位素 | 第40页 |
·引物 | 第40页 |
·昆虫幼虫 | 第40页 |
2 实验方法 | 第40-45页 |
·新疆杨Km~r植株的分子检测 | 第40-44页 |
·新疆杨PCR阳性植株的饲虫实验 | 第44页 |
·新疆杨转基因植株的移栽 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-50页 |
·Km~r植株的PCR检测 | 第45-46页 |
·Km~r植株的PCR-Southern分析 | 第46页 |
·PCR阳性植株的Southern斑点杂交检测 | 第46-47页 |
·PCR阳性植株的Southern-blotting杂交检测 | 第47-48页 |
·PCR阳性植株饲虫实验 | 第48-50页 |
·新疆杨转基因植株的移栽 | 第50页 |
·小结 | 第50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
·两种纯化DNA方法的优缺比较 | 第50页 |
·PCR两对引物扩增效果的比较 | 第50-51页 |
·虫试材料的选择 | 第51页 |
·转CpTI基因植株的抗虫效果 | 第51-52页 |
第四章 菌株LBA4404(pFZY1)与LBA4404(pFWZ10)的活力差异 | 第52-56页 |
1 实验材料 | 第52页 |
·植物受体材料 | 第52页 |
·质粒和菌株 | 第52页 |
2 实验方法 | 第52-53页 |
·不同体积比混合两种菌株侵染新疆杨 | 第52页 |
·菌株生长曲线的测定 | 第52页 |
·菌株竞争性实验 | 第52-53页 |
3 结果与分析 | 第53-55页 |
·不同体积比混合两种菌株进行侵染结果 | 第53页 |
·菌株LBA4404(pFZY1)和LBA4404(pFWZ10)生长曲线 | 第53-54页 |
·菌株竞争性培养 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-56页 |
第五章 主要结论和进一步研究展望 | 第56-57页 |
图版Ⅰ 新疆杨叶盘组培再生体系的建立 | 第57-58页 |
图版Ⅱ 转CpTI基因新疆杨Km~r芽的分化及分步筛选 | 第58-59页 |
图版Ⅲ 转CpTI基因新疆杨植株的获得和移栽 | 第59-60页 |
图版Ⅳ 饲喂转基因植株叶片对幼虫生长发育的影响 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |