| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 前言 | 第6-19页 |
| 1． 几丁质／几丁寡糖的结构与研究意义 | 第6-7页 |
| 2． 几丁质酶研究进展 | 第7-12页 |
| 3． 大肠杆菌表达系统 | 第12-15页 |
| 4． 毕赤酵母表达系统 | 第15-19页 |
| 第一部分 白假丝酵母几丁质酶cDNA在大肠杆菌中表达的研究 | 第19-33页 |
| 1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-25页 |
| 2．1 几丁质酶cDNA的克隆及克隆载体pMD-Chi/E的构建 | 第20-21页 |
| 2．2 原核表达质粒pET23b-Chi的构建 | 第21-23页 |
| 2．3 几丁质酶cDNA在大肠杆菌中的诱导表达 | 第23-24页 |
| 2．4 目的蛋白的分离提取及活性分析 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-30页 |
| 4 讨论 | 第30-33页 |
| 第二部分 白假丝酵母几丁质酶cDNA在毕赤酵母中表达的研究 | 第33-45页 |
| 1 实验材料 | 第33页 |
| 2 实验方法 | 第33-37页 |
| 2．1 几丁质酶cDNA的克隆及表达载体的构建 | 第33-35页 |
| 2．2 表达宿主的构建 | 第35-37页 |
| 2．3 毕赤酵母胞内表达几丁质酶蛋白的研究 | 第37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-41页 |
| 4 讨论 | 第41-45页 |
| 第三部分 实验技术与方法汇总 | 第45-57页 |
| 1． SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第45-46页 |
| 2． 菌体培养与保存 | 第46-47页 |
| 3． 质粒提取 | 第47-49页 |
| 4． 质粒的酶切及连接 | 第49页 |
| 5． 核酸的电泳 | 第49-50页 |
| 6． DNA片断的回收 | 第50页 |
| 7． 细菌重组质粒菌落的鉴定 | 第50-51页 |
| 8． 白假丝酵母菌总RNA的提取 | 第51-52页 |
| 9． 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第52-53页 |
| 10． 毕赤酵母基因组DNA的提取 | 第53-54页 |
| 11． 酵母菌的电击转化 | 第54页 |
| 12． 镍离子亲和层析快速提取蛋白 | 第54-55页 |
| 13． 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质浓度 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 英文摘要 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
