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肝片吸虫保护性抗原基因FH3转基因苜蓿可食疫苗初步研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
前言第11-14页
第一章 肝片吸虫保护性抗原基因FH3表达载体的构建及根瘤农杆菌的转化第14-20页
 1 材料和方法第14-17页
   ·试验材料第14页
     ·菌株和质粒第14页
     ·酶与试剂盒第14页
     ·培养基及试剂第14页
     ·引物及测序第14页
   ·方法第14-17页
     ·载体pBI121-FH3的构建第14-16页
     ·农杆菌感受态细胞的制备和转化第16页
     ·转化子的检测第16-17页
 2 结果第17-18页
   ·表达载体的构建第17-18页
   ·根瘤农杆菌的转化第18页
 3 讨论第18-20页
   ·中间表达载体第18页
   ·植物基因转化载体系统的选择第18-20页
第二章 根瘤农杆菌介导的苜蓿转化及转基因苜蓿的再生第20-30页
 1 材料和方法第20-24页
   ·实验材料第20-22页
     ·根瘤农杆菌EHA105-FH3菌株第20页
     ·植物材料第20页
     ·培养基第20-22页
     ·试剂第22页
   ·方法第22-24页
     ·苜蓿无菌实生苗的培养第22页
     ·根瘤农杆菌EHA105-FH3菌株活化第22-23页
     ·叶盘法转化苜蓿第23页
     ·诱导不定芽第23-24页
     ·诱导生根第24页
     ·再生植株的筛选和移栽第24页
 2 结果第24-27页
   ·苜蓿无菌实生苗的培养第24页
   ·叶盘法转化苜蓿第24-25页
   ·诱导不定芽第25-26页
   ·诱导生根第26-27页
 3 讨论第27-30页
   ·苜蓿无菌实生苗的培养第27页
   ·根瘤农杆菌的培养第27-28页
   ·叶盘法转化苜蓿第28-30页
     ·不同外植体转化效率的比较第29页
     ·不同苗龄外植体对愈伤组织诱导率的影响第29-30页
第三章 转基因苜蓿的分子生物学鉴定第30-41页
 1 材料和方法第30-37页
   ·实验材料第30-31页
     ·植物材料第30页
     ·酶与试剂盒第30页
     ·试剂第30-31页
   ·方法第31-37页
     ·Southern blotting第32-34页
     ·Western blotting检测FH3抗原第34-37页
 2 结果第37-38页
   ·Southern blotting第37页
   ·Western blotting第37-38页
 3 讨论第38-41页
   ·Southern blotting第39-40页
     ·DNA提取方法的选定第39页
     ·限制性内切酶的选择第39页
     ·酶切反应体系第39-40页
   ·Western blotting第40页
   ·关于嵌合体第40-41页
结论第41-42页
综述 可食疫苗研究进展第42-78页
 导语第42-43页
 1 可食疫苗起源第43-45页
 2 可食疫苗作用机理第45-46页
 3 可食疫苗的优点第46-48页
 4 可食疫苗研制方法第48-66页
   ·可食疫苗抗原的选择第49页
   ·可食疫苗目标植物的选择第49-52页
   ·可食疫苗表达系统研究第52-57页
     ·农杆菌介导的植物表达系统第52-54页
     ·重组植物病毒的植物表达系统第54-55页
     ·提高表达效率的载体构建策略第55-56页
     ·植物表达载体存在的问题和解决方法第56-57页
   ·表达载体的构建第57-60页
   ·转化和检测第60-64页
   ·免疫试验第64-66页
 5 研究中的转基因植物可食疫苗第66-74页
   ·乙肝疫苗第67-68页
   ·腹泻疫苗第68-73页
     ·大肠杆菌肠毒素第69-71页
     ·霍乱毒素第71-72页
     ·轮状病毒表面抗原蛋白第72页
     ·诺沃克病毒衣壳蛋白第72-73页
   ·结核病疫苗第73页
   ·狂犬病毒疫苗第73-74页
   ·巨细胞病毒疫苗第74页
 6 目前可食疫苗研究的问题和前景第74-78页
参考文献第78-91页
致谢第91页

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