中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
前言 | 第11-14页 |
第一章 肝片吸虫保护性抗原基因FH3表达载体的构建及根瘤农杆菌的转化 | 第14-20页 |
1 材料和方法 | 第14-17页 |
·试验材料 | 第14页 |
·菌株和质粒 | 第14页 |
·酶与试剂盒 | 第14页 |
·培养基及试剂 | 第14页 |
·引物及测序 | 第14页 |
·方法 | 第14-17页 |
·载体pBI121-FH3的构建 | 第14-16页 |
·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第16页 |
·转化子的检测 | 第16-17页 |
2 结果 | 第17-18页 |
·表达载体的构建 | 第17-18页 |
·根瘤农杆菌的转化 | 第18页 |
3 讨论 | 第18-20页 |
·中间表达载体 | 第18页 |
·植物基因转化载体系统的选择 | 第18-20页 |
第二章 根瘤农杆菌介导的苜蓿转化及转基因苜蓿的再生 | 第20-30页 |
1 材料和方法 | 第20-24页 |
·实验材料 | 第20-22页 |
·根瘤农杆菌EHA105-FH3菌株 | 第20页 |
·植物材料 | 第20页 |
·培养基 | 第20-22页 |
·试剂 | 第22页 |
·方法 | 第22-24页 |
·苜蓿无菌实生苗的培养 | 第22页 |
·根瘤农杆菌EHA105-FH3菌株活化 | 第22-23页 |
·叶盘法转化苜蓿 | 第23页 |
·诱导不定芽 | 第23-24页 |
·诱导生根 | 第24页 |
·再生植株的筛选和移栽 | 第24页 |
2 结果 | 第24-27页 |
·苜蓿无菌实生苗的培养 | 第24页 |
·叶盘法转化苜蓿 | 第24-25页 |
·诱导不定芽 | 第25-26页 |
·诱导生根 | 第26-27页 |
3 讨论 | 第27-30页 |
·苜蓿无菌实生苗的培养 | 第27页 |
·根瘤农杆菌的培养 | 第27-28页 |
·叶盘法转化苜蓿 | 第28-30页 |
·不同外植体转化效率的比较 | 第29页 |
·不同苗龄外植体对愈伤组织诱导率的影响 | 第29-30页 |
第三章 转基因苜蓿的分子生物学鉴定 | 第30-41页 |
1 材料和方法 | 第30-37页 |
·实验材料 | 第30-31页 |
·植物材料 | 第30页 |
·酶与试剂盒 | 第30页 |
·试剂 | 第30-31页 |
·方法 | 第31-37页 |
·Southern blotting | 第32-34页 |
·Western blotting检测FH3抗原 | 第34-37页 |
2 结果 | 第37-38页 |
·Southern blotting | 第37页 |
·Western blotting | 第37-38页 |
3 讨论 | 第38-41页 |
·Southern blotting | 第39-40页 |
·DNA提取方法的选定 | 第39页 |
·限制性内切酶的选择 | 第39页 |
·酶切反应体系 | 第39-40页 |
·Western blotting | 第40页 |
·关于嵌合体 | 第40-41页 |
结论 | 第41-42页 |
综述 可食疫苗研究进展 | 第42-78页 |
导语 | 第42-43页 |
1 可食疫苗起源 | 第43-45页 |
2 可食疫苗作用机理 | 第45-46页 |
3 可食疫苗的优点 | 第46-48页 |
4 可食疫苗研制方法 | 第48-66页 |
·可食疫苗抗原的选择 | 第49页 |
·可食疫苗目标植物的选择 | 第49-52页 |
·可食疫苗表达系统研究 | 第52-57页 |
·农杆菌介导的植物表达系统 | 第52-54页 |
·重组植物病毒的植物表达系统 | 第54-55页 |
·提高表达效率的载体构建策略 | 第55-56页 |
·植物表达载体存在的问题和解决方法 | 第56-57页 |
·表达载体的构建 | 第57-60页 |
·转化和检测 | 第60-64页 |
·免疫试验 | 第64-66页 |
5 研究中的转基因植物可食疫苗 | 第66-74页 |
·乙肝疫苗 | 第67-68页 |
·腹泻疫苗 | 第68-73页 |
·大肠杆菌肠毒素 | 第69-71页 |
·霍乱毒素 | 第71-72页 |
·轮状病毒表面抗原蛋白 | 第72页 |
·诺沃克病毒衣壳蛋白 | 第72-73页 |
·结核病疫苗 | 第73页 |
·狂犬病毒疫苗 | 第73-74页 |
·巨细胞病毒疫苗 | 第74页 |
6 目前可食疫苗研究的问题和前景 | 第74-78页 |
参考文献 | 第78-91页 |
致谢 | 第91页 |