| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-13页 |
| 实验材料和仪器 | 第13-14页 |
| 主要试剂的配制或成分 | 第14-15页 |
| 实验方法 | 第15-22页 |
| 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第15-16页 |
| 质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第16页 |
| 少量提取质粒（碱裂解法） | 第16-17页 |
| 琼脂糖凝胶电泳 | 第17页 |
| 限制性内切酶酶切反应 | 第17-18页 |
| DNA目的片段的回收 | 第18-19页 |
| 连接反应（粘性末端连接） | 第19页 |
| 凋亡素-增强型绿荧光蛋白载体构建 | 第19页 |
| 细胞培养 | 第19页 |
| 细胞传代（贴壁细胞） | 第19-20页 |
| 细胞冻存 | 第20页 |
| 细胞复苏 | 第20页 |
| 细胞计数 | 第20页 |
| 细胞贴壁率 | 第20页 |
| 细胞倍增时间测定 | 第20-21页 |
| 质粒转染实验细胞 | 第21页 |
| Annexin V-PE细胞染色 | 第21页 |
| 碘化吡啶染色 | 第21页 |
| HE染色 | 第21-22页 |
| 统计学方法 | 第22页 |
| 结果 | 第22-25页 |
| pEGFP-C2、pcDNA3-VP3质粒经双酶切后所得片段 | 第22页 |
| 构建载体的连接产物转化GC形成转化菌落 | 第22页 |
| pEGFP-VP3的酶切电泳鉴定结果 | 第22-23页 |
| pEGFP-VP3测序结果 | 第23页 |
| HepG2贴壁率 | 第23页 |
| HepG2的倍增时间 | 第23页 |
| HepG2光学显微镜下结构 | 第23页 |
| HepG2HE染色结果 | 第23页 |
| pEGFP-C2、pEGFP-VP3转染HepG2结果 | 第23-25页 |
| 转染率 | 第24页 |
| EGFP和EGFP-VP3在细胞中的分布和细胞形态改变 | 第24页 |
| EGFP和EGFP-VP3在细胞中的动态变化 | 第24页 |
| 细胞凋亡 | 第24-25页 |
| PI染色结果 | 第25页 |
| 讨论 | 第25-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-41页 |
| 附图 | 第41-64页 |
| 图1 pEGFP-VP3构建图 | 第41-42页 |
| 图2 质粒酶切电泳图 | 第42-43页 |
| 图3 连接后转染菌落的形成 | 第43页 |
| 图4 构建质粒的初步鉴定 | 第43-44页 |
| 图5 pEGFP-VP3质粒的酶切鉴定 | 第44-46页 |
| （1） 酶切鉴定示意图 | 第44-45页 |
| （2） 酶切鉴定电泳图 | 第45-46页 |
| 图6 构建的pEGFP-VP3质粒的部分序列（含插入序列）的测序图 | 第46-47页 |
| 图7 pEGFP-VP3测定序列和凋亡素基因序列的一致性 | 第47-48页 |
| 图8 凋亡素序列的蛋白质序列 | 第48-49页 |
| 图9 HepG2肝癌细胞光镜图片 | 第49页 |
| 图10 HepG2肝癌细胞HE染色 | 第49-50页 |
| 图11 EGFP和EGFP-VP3在细胞中的分布 | 第50-51页 |
| 图12 EGFP在肝癌细胞HepG2中的动态变化 | 第51-53页 |
| 图13 EGFP-VP3在肝癌细胞HepG2中的动态变化 | 第53-56页 |
| 表1 HepG2和pEGFP-C2、pEGFP-VP3转染后的HepG2 AnnexinV-PE检测的细胞凋亡情况 | 第56页 |
| 图14 HepG2和pEGFP-C2、pEGFP-VP3转染后的HepG2 AnnexinV-PE检测的细胞凋亡直方图 | 第56-57页 |
| 图15 EGFP在肝癌细胞HepG2中的AnnexinV-PE凋亡测定结果 | 第57-60页 |
| 图16 EGFP-VP3在肝癌细胞HepG2中的AnnexinV-PE凋亡测定结 | 第60-63页 |
| 表2 HepG2和pEGFP-C2、pEGFP-VP3转染的HepG2 PI染色情况 | 第63页 |
| 图17 HepG2禾npEGFP-C2、pEGFP-VP3转染的HepG2PI染色直方图 | 第63-64页 |
| 缩略词表 | 第64-65页 |
| 综述： 凋亡素与肿瘤 | 第65-76页 |
| 在学期间发表的论文 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
