| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 第一篇 采用定向分子进化方法构建改形抗CD28重链单域抗体 | 第12-48页 |
| 第一章 前言 | 第13-16页 |
| ·定向分子进化方法 | 第13页 |
| ·CD28分子与抗CD28抗体 | 第13-14页 |
| ·选题思想 | 第14页 |
| ·实验设计 | 第14-16页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第16-34页 |
| ·E.coli菌株，质粒，噬菌体及细胞株 | 第16-18页 |
| ·试剂与溶液 | 第18-19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-34页 |
| ·改形抗CD28VH单域抗体的设计策略 | 第20页 |
| ·丝状噬菌体抗体库的构建，筛选，活性测定和测序鉴定 | 第20-25页 |
| ·改形抗CD28VH序列的计算机空间结构模拟 | 第25页 |
| ·克隆载体pUMS的构建 | 第25-27页 |
| ·克隆载体pUH1的构建 | 第27-28页 |
| ·克隆载体pUH4的构建 | 第28-29页 |
| ·表达载体pTCS的构建，re-CD28VH1与HSA的融合表达 | 第29-30页 |
| ·表达载体pTCH1的构建，re-CD28VH1与Hinge的融合表达 | 第30-31页 |
| ·表达载体pTCH4的构建，re-CD28VH4与Hinge的融合表达 | 第31-32页 |
| ·融合表达包涵体的复性 | 第32页 |
| ·复性融合表达蛋白的ELISA免疫学活性的测定 | 第32-34页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第34-48页 |
| ·改形抗CD28VH序列的设计 | 第34页 |
| ·丝状噬菌体抗体的筛选，活性测定和测序鉴定 | 第34-36页 |
| ·改形抗CD28VH序列的计算机空间结构模拟 | 第36-38页 |
| ·克隆载体pUMS的构建 | 第38-39页 |
| ·克隆载体pUH1的构建 | 第39-40页 |
| ·克隆载体pUH4的构建 | 第40-41页 |
| ·表达载体pTCS的构建，re-CD28VH1与HSA的融合表达及复性 | 第41-42页 |
| ·表达载体pTCH1的构建，re-CD28VH1与Hinge的融合表达及复性 | 第42-43页 |
| ·表达载体pTCH4的构建，re-CD28VH4与Hinge的融合表达及复性 | 第43-45页 |
| ·复性融合表达蛋白的ELISA免疫学活性的测定 | 第45-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第二篇 抗人卵巢癌单链抗体×改形抗人CD3单链抗体×改形抗人CD28VH单域抗体三特异抗体的构建与表达 | 第48-75页 |
| 第四章 前言 | 第49-53页 |
| ·三特异抗体的构建思路 | 第49-50页 |
| ·实验设计 | 第50-53页 |
| 第五章 实验材料 | 第53-63页 |
| ·E.∞li菌株，质粒，噬菌体及细胞株 | 第53-54页 |
| ·试剂与溶液 | 第54-55页 |
| ·主要仪器设备 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-63页 |
| ·克隆载体pUMH1的构建 | 第55-58页 |
| ·克隆载体pUMH2的构建 | 第58-59页 |
| ·环状三特异抗体的构建与表达 | 第59-61页 |
| ·非环状三特异抗体的构建与表达 | 第61-62页 |
| ·环状三特异抗体，非环状三特异抗体的ELISA活性测定 | 第62-63页 |
| 第六章 实验结果与讨论 | 第63-75页 |
| ·三特异抗体构建连接肽的选用及特性 | 第63-66页 |
| ·克隆载体pUMH1的构建 | 第66-67页 |
| ·克隆载体pUMH2的构建 | 第67-68页 |
| ·环状三特异抗体的构建与表达 | 第68-72页 |
| ·非环状三特异抗体的构建与表达 | 第72-73页 |
| ·环状三特异抗体，非环状三特异抗体的ELISA免疫学活性 | 第73-74页 |
| ·小结 | 第74-75页 |
| 第三篇 文献综述 | 第75-115页 |
| 第七章 定向分子进化方法 | 第76-92页 |
| ·定向分子进化的研究进展 | 第77-82页 |
| ·定向分子进化的有关技术 | 第82-92页 |
| 第八章 抗体的人源化 | 第92-97页 |
| ·人源化抗体 | 第92-94页 |
| ·从噬菌体抗体库中获得人源抗体 | 第94-95页 |
| ·从转基因小鼠中获得人源抗体 | 第95-96页 |
| ·展望 | 第96-97页 |
| 第九章 CD28分子与抗CD28抗体在肿瘤免疫治疗中的应用 | 第97-106页 |
| ·CD28及其配体的结构与表达 | 第97-99页 |
| ·CD28共刺激信号的传导 | 第99-102页 |
| ·CD28及其配体的研究进展 | 第102-104页 |
| ·抗CD28抗体在肿瘤免疫治疗中的应用 | 第104-106页 |
| 第十章 双特异抗体，三特异抗体及其在肿瘤治疗中的应用 | 第106-115页 |
| ·机体抗肿瘤免疫的机制 | 第106-108页 |
| ·肿瘤细胞逃避宿主免疫监视的方式 | 第108-109页 |
| ·双特异抗体，三特异抗体介导肿瘤免疫治疗的机制 | 第109-112页 |
| ·双特异抗体在肿瘤免疫治疗中的应用及三特异抗体的研究前景 | 第112-115页 |
| 参考文献 | 第115-125页 |
| 附录1. 研究引用的模式图 | 第125-127页 |
| 附录2. 质粒物理图谱 | 第127-130页 |
| 附录3. 缩写及注释 | 第130-132页 |
| 攻读博士学位期间发表论文 | 第132-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
