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小麦叶绿体抗氧化酶基因的克隆与遗传转化的研究

英文缩略表第1-7页
中文摘要第7-8页
1. 引言第8-14页
 1.1 活性氧的产生途径第8-9页
 1.2 活性氧的作用及其氧化损伤第9-10页
 1.3 活性氧的酶促清除系统第10-12页
 1.4 有关抗氧化酶系统的植物基因工程第12-14页
 1.5 本研究的目的和意义第14页
2. 材料与方法第14-28页
 2.1 实验材料第14-15页
  2.1.1 植物材料第14页
  2.1.2 菌株与质粒第14页
  2.1.3 酶与生化试剂第14-15页
  2.1.4 PCR引物第15页
 2.2 实验方法第15-28页
  2.2.1 总RNA的提取第15-16页
  2.2.2 反转录第16-17页
  2.2.3 小麦叶绿体Cu/Zn-SOD基因的分离第17-21页
   2.2.3.1 目的基因3’端片段的扩增第17-18页
   2.2.3.2 连接反应第18页
   2.2.3.3 感受态细胞的制备第18页
   2.2.3.4 转化第18-19页
   2.2.3.5 碱法小量提取质粒DNA第19-20页
   2.2.3.6 酶切鉴定第20页
   2.2.3.7 序列测定第20页
   2.2.3.8 叶绿体Cu/Zn-SOD基因全长的分离第20-21页
  2.2.4 正、反义SOD基因表达载体的构建第21页
  2.2.5 根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备、转化第21-22页
   2.2.5.1 感受态细胞的制备第21-22页
   2.2.5.2 冻融法转化农杆菌第22页
  2.2.6 农杆菌介导转化烟草第22-23页
  2.2.7 转基因烟草的分子鉴定第23-25页
   2.2.7.1 烟草基因组DNA的提取第23-24页
   2.2.7.2 转基因植株的PCR鉴定第24页
   2.2.7.3 PCR-Southern分析第24-25页
  2.2.8 小麦类囊体结合型APX基因片段的克隆第25-26页
  2.2.9 APX基因5’端的克隆第26-27页
  2.2.10 APX基因3’端的克隆第27-28页
3. 结果与分析第28-40页
 3.1 叶绿体Cu/Zn-SOD基因3’端的克隆第28-29页
 3.2 叶绿体Cu/Zn-SOD基因全长的的克隆第29-32页
 3.3 正、反义SOD基因表达载体的构建第32-34页
 3.4 转基因植株的分子检测第34-35页
 3.5 小麦类囊体结合型APX基因片段的克隆第35-36页
 3.6 APX基因5’端的克隆第36-37页
 3.7 APX基因3’端的克隆第37-40页
4. 讨论第40-43页
参考文献第43-48页
英文摘要第48-49页
附图第49-50页

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