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春化相关基因Vrn2的克隆及分析

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-7页
一、 前言第7-21页
 1 开花素学说第7-8页
 2 植物开花的分子生物学研究策略第8-9页
 3 植物开花的分子调控研究第9-13页
  3.1 影响植物开花的环境因子第9-12页
   3.1.1 光周期现象第10-11页
   3.1.2 春化作用第11-12页
  3.2 植物开花过程中的基因调控第12-13页
   3.2.1 开花促进途径第12页
   3.2.2 开花抑制途径第12-13页
 4 植物春化作用第13-21页
  4.1 植物春化作用的基本特征第13-14页
  4.2 植物春化过程的生理生化特性第14-17页
   4.2.1 春化作用进程与呼吸基质第14-15页
   4.2.2 春化作用进程相关酶的变化第15-16页
   4.2.3 春化作用与核酸代谢第16页
   4.2.4 春化作用与蛋白质代谢第16-17页
  4.3 植物春化作用与低温适应第17-19页
   4.3.1 春化作用与低温适应是植物的两个不同反应第17页
   4.3.2 春化作用与低温适应具有不同的遗传基础第17-18页
   4.3.3 春化作用与低温适应具有不同的基因表达方式第18-19页
  4.4 高等植物春化基因的克隆第19-21页
   4.4.1 从代谢角度分离春化相关基因第19-20页
   4.4.2 利用突变体分离与研究春化相关基因第20-21页
 5 本项目研究的目的意义第21页
二、 材料与方法第21-32页
 1 材料第21页
  1.1 实验材料第21页
  1.2 菌种第21页
  1.3 试剂第21页
 2 方法第21-32页
  2.1 材料的培养第21-22页
  2.2 基因组DNA的提取第22-24页
   2.2.1 拟南芥植株基因组DNA的提取第22-23页
   2.2.2 唐菖蒲幼叶DNA的提取第23-24页
  2.3 引物设计第24页
  2.4 PCR扩增第24页
  2.5 PCR产物的凝胶电泳观察第24页
  2.6 PCR扩增产物的回收第24-25页
  2.7 目的片段的克隆及重组子酶切鉴定第25-29页
   2.7.1 目的片段的克隆第25-26页
    2.7.1.1 连接反应第25页
    2.7.1.2 感受态制备第25页
    2.7.1.3 转化第25-26页
    2.7.1.4 质粒DNA的微量提取第26页
   2.7.2 重组子的酶切鉴定第26-27页
   2.7.3 阳性重组质粒的稍大量提取第27-29页
  2.8 DNA序列分析第29页
  2.9 探针的标记第29-30页
   2.9.1 重组质粒的酶切第29页
   2.9.2 酶切产物的回收第29页
   2.9.3 目的片段的标记第29-30页
  2.10 拟南芥基因组DNA的酶切与印迹杂交第30-32页
   2.10.1 拟南芥基因组DNA的提取第30页
   2.10.2 拟南芥基因组DNA的酶切第30页
   2.10.3 酶切后基因组DNA的纯化第30-31页
   2.10.4 DNA的印迹转移第31页
   2.10.5 Southern杂交第31-32页
  2.11 唐菖蒲基因组DNA的酶切与印迹杂交第32页
   2.11.1 唐菖蒲基因组DNA的提取第32页
   2.11.2 基因组DNA的酶切第32页
   2.11.3 酶切后的基因组DNA的纯化第32页
   2.11.4 DNA的印迹转移第32页
   2.11.5 Southern杂交第32页
三、 结果与分析第32-41页
 3.1 目的片段的PCR扩增第32-33页
 3.2 Vrn2 DNA的结构分析第33-39页
 3.3 重组子的酶切鉴定第39页
 3.4 探针片段的回收第39页
 3.5 拟南芥基因组DNA的Southern杂交第39-40页
 3.6 唐菖蒲基因组DNA的Southern杂交第40-41页
四、 讨论第41-42页
 1 Vrn2的结构分析第41-42页
 2 Vrn2是转录调控因子第42页
五、 结论第42-43页
参考文献第43-49页
致谢第49页

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