| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 第一部分 前言 | 第7-27页 |
| 一． 抗虫基因研究进展 | 第8-22页 |
| 二． 融合基因研究进展 | 第22-26页 |
| 三． 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第27-52页 |
| 一． 实验材料 | 第27-30页 |
| 二． 方法 | 第30-52页 |
| 1． 质粒DNA的小量提取 | 第30-31页 |
| 2． 质粒DNA的大量制备 | 第31-32页 |
| 3． CpTI基因的PCR扩增 | 第32-33页 |
| 4． PCR产物的加磷与补平 | 第33页 |
| 5． DNA限制性酶切反应 | 第33-34页 |
| 6． 目的片段的电泳回收 | 第34页 |
| 7． 载体与DNA的连接反应 | 第34-35页 |
| 8． 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35页 |
| 9． 质粒DNA转化大肠杆菌 | 第35-36页 |
| 10． 转化子的快速筛选 | 第36页 |
| 11． 农杆菌LBA4404的转化 | 第36页 |
| 12． 烟草的转化 | 第36-37页 |
| 13． 植物DNA的提取 | 第37-38页 |
| 14． 转基因烟草的PCR检测 | 第38页 |
| 15． 植物基因组DNA的Southern Blot | 第38-40页 |
| 16． 烟草蛋白的提取及Western Blot分析 | 第40-45页 |
| 17． 转基因烟草的生物测试 | 第45页 |
| 18． 豇豆胰蛋白酶抑制剂的抑制活性分析 | 第45-48页 |
| 19． 转基因烟草的ELISA分析 | 第48-50页 |
| 20． 酵母的转化及诱导表达 | 第50-51页 |
| 21． 融合蛋白的肠激酶酶解分析 | 第51-52页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第52-79页 |
| 一． 融合杀虫基因的分子设计 | 第52-53页 |
| 二． 融合杀虫基因的构建 | 第53-61页 |
| 1． CpTI基因向pUC19上的克隆 | 第53-57页 |
| 2． Xho Ⅰ接头与CpTI基因的连接 | 第57-58页 |
| 3． CpTI基因的序列分析 | 第58页 |
| 4． CpTI基因与GFM cry1A基因的连接 | 第58-61页 |
| 三． 融合杀虫基因酵母表达载体的构建 | 第61-64页 |
| 1． Ω序列的去除及与Nco Ⅰ接头的连接 | 第61-63页 |
| 2． 融合杀虫基因CryCI向酵母表达载体pPIC9K的克隆 | 第63-64页 |
| 四． 酵母转化及筛选 | 第64-66页 |
| 五． 融合杀虫基因在酵母中的表达 | 第66-68页 |
| 1． 融合杀虫蛋白的诱导表达 | 第66-67页 |
| 2． 融合杀虫蛋白的肠激酶酶解分析 | 第67页 |
| 3． 融合杀虫蛋白的杀虫活性分析 | 第67-68页 |
| 六． 融合杀虫基因高效植物表达载体的构建 | 第68-70页 |
| 七． 融合杀虫基因在转基因烟草中的表达 | 第70-79页 |
| 1． 植物表达载体向农杆菌中的转化 | 第70页 |
| 2． 烟草的转化 | 第70-71页 |
| 3． 转基因烟草的PCR检测 | 第71-72页 |
| 4． 转基因烟草的Southern Blot分析 | 第72-74页 |
| 5． 转基因烟草的Western Blot分析 | 第74页 |
| 6． 融合杀虫蛋白的ELISA测定 | 第74页 |
| 7． 转基因烟草的杀虫活性测定 | 第74-76页 |
| 8． 转基因烟草的CpTI抑制活性检测 | 第76-78页 |
| 9． 转基因烟草对抗性棉铃虫的杀虫活性检测 | 第78-79页 |
| 第四部分 讨论 | 第79-82页 |
| 第五部分 结论 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-99页 |
| 英文摘要 | 第99-101页 |
| 缩略词表 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
