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Lyz-GFP双元基因在陇东苜蓿不同受体系统中的转化和表达的研究

英文缩略词表第1-4页
摘要第4-6页
Abstract第6-8页
引言第8-14页
第一章 文献综述第14页
1.转基因技术在生物育种中的研究进展第14-24页
   ·转基因技术发展现状第14-16页
     ·转基因技术在植物中的发展现状第14-15页
     ·转基因技术在动物中的发展现状第15-16页
   ·转基因技术在植物育种中的应用第16-18页
     ·抗虫性第16-17页
     ·抗病性第17页
     ·抗逆性第17-18页
     ·抗除草剂第18页
   ·植物转基因常用转化方法第18-20页
     ·基因枪法第18-19页
     ·农杆菌介导法第19-20页
     ·花粉管通道法第20页
   ·植物转基因技术中存在的问题及解决办法第20-24页
     ·转化系统对转基因技术的限制第21-22页
     ·基因沉默第22-23页
     ·转基因生物产品的安全性问题第23-24页
2.紫花苜蓿遗传转化研究进展第24-26页
   ·紫花苜蓿转化受体系统的建立第24-25页
     ·原生质体受体系统第24页
     ·愈伤诱导分化再生受体系统第24-25页
     ·胚状体分化受体系统第25页
   ·紫花苜蓿常用转化方法第25-26页
3.溶菌酶-绿色荧光蛋白(Lyz-GFP)研究进展第26-29页
   ·溶菌酶研究进展第26-27页
     ·溶菌酶及其性质第26页
     ·溶菌酶分类第26页
     ·影响溶菌酶活性的因素第26-27页
     ·溶菌酶的应用第27页
   ·绿色荧光蛋白研究进展第27-29页
     ·绿色荧光蛋白及其性质第27页
     ·绿色荧光蛋白的特点第27-28页
     ·绿色荧光蛋白的应用第28-29页
4.原位转化法研究进展第29-30页
5.研究目的与意义第30-31页
第二章 农杆菌介导的 Lyz-GFP 双元基因通过组织培养在陇东苜蓿中的转化.第31页
1.材料及方法第31-33页
   ·试验材料第31-32页
     ·材料第31页
     ·抗生素及植物激素第31页
     ·各类培养基及成分第31-32页
   ·试验方法第32-33页
     ·外植体获得第32页
     ·农杆菌介导的 Lyz-GFP 双元基因的活化第32页
     ·农杆菌介导的组织培养转化体系的建立第32-33页
2 结果与分析第33-36页
   ·菌液浓度对转化效率的影响第33页
   ·陇东苜蓿对卡纳霉素敏感性的测定第33-34页
   ·陇东苜蓿愈伤组织抑菌效果的测定第34-35页
   ·造成转化苗玻璃化现象的因素分析第35-36页
     ·6 -BA 和 NAA 浓度对陇东苜蓿再生苗玻璃化的影响第35页
     ·蔗糖浓度对陇东苜蓿再生苗玻璃化的影响第35-36页
     ·琼脂浓度对陇东苜蓿再生苗玻璃化的影响第36页
     ·光照强度对陇东苜蓿再生苗玻璃化的影响第36页
3 讨论第36-38页
   ·农杆菌介导基因转化体系中适宜条件的确立第37页
   ·再生过程中玻璃化现象的研究第37-38页
4.结论第38-39页
第三章 农杆菌介导漩涡振荡侵染法对陇东苜蓿茎尖生长点转化的研究第39页
1 材料和方法第39-42页
   ·材料第39-40页
     ·试验材料第39页
     ·抗生素及植物激素第39页
     ·各类培养基及成分第39-40页
   ·试验方法第40-42页
     ·外植体选择第40页
     ·农杆菌介导的 Lyz-GFP 双元基因的活化第40页
     ·农杆菌介导漩涡振荡侵染法遗传体系的建立第40-41页
     ·陇东苜蓿转化苗生长及其诱导生根第41页
     ·陇东苜蓿转化苗的移栽第41-42页
   ·数据统计第42页
2 结果与分析第42-46页
   ·卡那霉素对陇东苜蓿植株生长的影响第42-43页
   ·转化植株头孢霉素抑菌浓度的确定第43页
   ·漩涡振荡时间对植株转化和再生的影响第43-44页
   ·不同培养阶段卡那霉素浓度对转化植株再生的影响第44-45页
   ·不同激素浓度对陇东苜蓿生根的影响第45页
   ·不同体积配比基质对陇东苜蓿试管苗移栽的影响第45-46页
3 讨论第46-47页
   ·农杆菌介导的茎尖生长点遗传转化新技术体系的建立和优越性第46-47页
   ·农杆菌介导的旋窝振荡法转化中适宜条件的确立第47页
4 结论第47-48页
第四章 陇东苜蓿转化植株荧光检测及其 PCR 检测第48页
1 材料和方法第48-52页
   ·材料第48-49页
     ·试验材料第48页
     ·菌种活化培养基配制第48页
     ·生化试剂配制第48页
     ·农杆菌质粒 DNA 提取试剂第48页
     ·植物基因组 DNA 提取试剂第48页
     ·检测仪器及试剂第48-49页
   ·试验方法第49-52页
     ·陇东苜蓿转化植株叶片荧光检测第49页
     ·菌种活化第49页
     ·LBA4404 质粒 DNA 提起第49-50页
     ·陇东苜蓿转化植株叶片 DNA 的提取第50页
     ·PCR 扩增第50-52页
2 结果与分析第52-53页
   ·陇东苜蓿转化植株荧光检测及其分析第52页
   ·PCR 检测及其分析第52-53页
3 讨论第53-54页
   ·绿色荧光蛋白表达对转基因植株检测的影响第53页
   ·PCR 检测方法的应用及存在问题第53-54页
4 结论第54-55页
参考文献第55-64页
附图第64-65页
致谢第65-66页
作者简介第66-67页
导师简介第67-68页

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