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转化植物甾醇为雄甾烯酮菌株的筛选鉴定及发酵工艺的研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第一章 绪论第9-21页
   ·甾体化合物的结构、分类与应用第9-10页
   ·甾体药物的发展第10-12页
     ·甾体药物的研究发展史第10页
     ·甾体药物的化学合成第10-11页
     ·甾体药物微生物转化第11-12页
   ·微生物甾体侧链降解第12-15页
     ·微生物对甾体侧链降解的途径第13页
     ·微生物对甾体母核的降解途径第13-14页
     ·控制微生物选择性降解甾体侧链第14-15页
   ·甾体边链降解微生物转化反应共性难题第15-16页
     ·底物的溶解性第15页
     ·投料方式的选择第15-16页
     ·细胞壁膜的阻碍作用第16页
   ·本课题的立题依据第16-20页
     ·雄甾烯酮ADD 与AD 的作用和意义第16-17页
     ·国内外甾体药物工业的现状第17-18页
     ·国内外技术水平分析第18页
     ·国内外市场现状和发展趋势第18-19页
     ·丰富的植物甾醇的来源植物第19-20页
   ·本论文的研究内容第20-21页
第二章 微生物转化植物甾醇为ADD 与AD 分析测定方法的研究第21-32页
   ·前言第21页
   ·材料与方法第21-23页
     ·实验试剂第21页
     ·实验仪器第21-22页
     ·BS、ADD、AD 的定性分析—薄层层析法(TLC)第22页
     ·BS 的定量分析—可见分光光光度法(VS)第22页
     ·ADD 与AD 的定量第22页
     ·ADD 与AD 的鉴定—液质联用法(HPLC-MS)第22-23页
   ·结果与讨论第23-31页
     ·薄层层析法对BS、ADD、AD 的定性检测第23-24页
     ·可见分光光光度法定量BS第24-25页
     ·紫外吸收光谱法定量 ADD、AD第25-27页
     ·高效液相色谱法定量ADD、AD第27-29页
     ·ADD、AD 的液质联用图谱第29-30页
     ·转化效果的评价方法第30-31页
   ·本章主要结论第31-32页
第三章 转化植物甾醇为ADD、AD 菌株的筛选与鉴定第32-41页
   ·前言第32-33页
   ·材料与方法第33-35页
     ·菌株与试剂第33页
     ·主要仪器第33页
     ·培养基第33-34页
     ·目的菌株的筛选第34页
     ·发酵样品的分析第34页
     ·目的菌株的鉴定第34-35页
   ·结果与讨论第35-39页
     ·菌株筛选结果第35-36页
     ·菌株ST06-95 转化产物的HPLC 验证第36页
     ·HPLC-MS 鉴定菌株ST06-95 转化植物甾醇的产物第36-37页
     ·菌株ST06-95 形态特征与培养特征第37页
     ·菌株ST06-95 生理生化特征第37-39页
     ·菌株ST06-95 的遗传学特征第39页
   ·本章主要结论第39-41页
第四章 菌株 Bacillus sp ST06-95 转化植物甾醇为 ADD、AD 发酵条件的优化第41-50页
   ·前言第41页
   ·材料与方法第41-42页
     ·菌株与试剂第41页
     ·主要仪器第41页
     ·培养基第41-42页
     ·种子培养第42页
     ·摇瓶发酵第42页
     ·发酵样品的处理与分析第42页
   ·结果与讨论第42-49页
     ·转化条件的优化第42-45页
     ·投料溶解与添加方式对转化的影响第45-48页
     ·正交设计法优化发酵培养基确定最佳发酵培养基第48-49页
   ·本章主要结论第49-50页
第五章 菌株 Bacillus sp ST06-95 转化植物甾醇为 ADD、AD 的工艺放大研究第50-56页
   ·前言第50页
   ·材料与方法第50-51页
     ·菌株与试剂第50页
     ·主要仪器第50-51页
     ·培养基第51页
     ·培养方法第51页
     ·发酵样品的处理与分析第51页
   ·结果与讨论第51-55页
     ·转化时间的确定第51-52页
     ·通气量与搅拌速率的确定第52页
     ·卵磷脂添加量对转化情况的影响第52-53页
     ·不同底物浓度下的对转化情况第53-54页
     ·细胞固定化法对产物生成的影响第54页
     ·全细胞转化对产物生成的影响第54-55页
     ·底物流加对产物生成的影响第55页
   ·本章结论第55-56页
第六章 结论与展望第56-58页
   ·主要结论第56-57页
   ·展望第57-58页
参考文献第58-61页
附录:攻读硕士学位期间发表的论文第61-62页
致谢第62页

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