| 提要 | 第1-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-31页 |
| 第一节 肝移植的发展现状及所面临的问题 | 第12-17页 |
| 一、供肝短缺 | 第12-13页 |
| 二、排斥反应的发生 | 第13-15页 |
| 三、长期应用免疫抑制剂的毒副作用 | 第15-17页 |
| 第二节 基因转移技术在诱导移植肝免疫耐受中的应用策略 | 第17-23页 |
| 一、基因转移的方法 | 第17-18页 |
| 二、基因转移的载体 | 第18-20页 |
| 三、靶基因的选择 | 第20-23页 |
| 第三节 骨髓来源干细胞（BMDSC）在诱导肝移植免疫耐受中的应用策略 | 第23-26页 |
| 一、供体来源的BMDSC与移植肝耐受 | 第23-24页 |
| 二、受体来源BMDSC与移植肝耐受 | 第24-26页 |
| 三、作为基因治疗的靶细胞参与移植肝耐受 | 第26页 |
| 第四节 骨髓MSCs在诱导肝移植免疫耐受中的应用前景 | 第26-29页 |
| 一、骨髓MSCs一般特征 | 第26页 |
| 二、MSCs的免疫调节特性 | 第26-27页 |
| 三、MSCs的肝细胞分化潜能 | 第27-28页 |
| 四、MSCs参与肝损伤修复过程中存在的问题 | 第28-29页 |
| 第五节 本研究设计思路 | 第29-31页 |
| 第二章 重组腺病毒Ad-CTLA419在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达 | 第31-65页 |
| 第一节 重组腺病毒Ad-CTLA419的构建 | 第31-47页 |
| 一、材料 | 第31-32页 |
| 二、方法 | 第32-41页 |
| 1. 目的基因的获取 | 第32-34页 |
| 2.C TLA4 基因结构改造 | 第34页 |
| 3. 融合基因CTLA419的构建 | 第34-35页 |
| 4. 重组腺病毒Ad-CTLA419的构建 | 第35-41页 |
| 三、结果 | 第41-44页 |
| 1. 目的基因的获取 | 第41-42页 |
| 2.C TLA4 基因结构改造 | 第42页 |
| 3. 融合基因CTLA419的构建 | 第42-43页 |
| 4. 重组腺病毒Ad-CTLA419的构建 | 第43-44页 |
| 四、讨论 | 第44-47页 |
| 第二节 Ad-CTLA419在大鼠骨髓MSCs中的表达及鉴定 | 第47-64页 |
| 一、材料 | 第47-48页 |
| 二、方法 | 第48-54页 |
| 1. 大鼠骨髓间MSCs的分离培养及鉴定 | 第48-49页 |
| 2. 重组腺病毒Ad-CTLA419体外感染骨髓MSCs | 第49-50页 |
| 3.CTLA4Ig 在骨髓 MSCs 中的表达及功能鉴定 | 第50-54页 |
| 三、结果 | 第54-61页 |
| 1. 大鼠MSCs分离培养及鉴定 | 第54-55页 |
| 2. 重组腺病毒Ad-CTLA419转染大鼠MSCs | 第55-57页 |
| 3.CTLA4Ig 在大鼠 MSCs 中的表达 | 第57-59页 |
| 4. CTLA4Ig 基因修饰 MSCs(CTLA4Ig/MSCs)免疫特性 | 第59-61页 |
| 四、讨论 | 第61-64页 |
| 第三节 小结 | 第64-65页 |
| 第三章 CTLA419修饰的骨髓MSCs向肝细胞诱导分化及其功能鉴定 | 第65-77页 |
| 一、材料 | 第65-66页 |
| 二、方法 | 第66-70页 |
| 1. 转基因CTLA419骨髓MSCs向肝细胞诱导分化 | 第66-67页 |
| 2. 诱导分化细胞CTLA419的表达鉴定 | 第67-68页 |
| 3. 肝细胞功能鉴定 | 第68-69页 |
| 4. 免疫抑制功能鉴定 | 第69-70页 |
| 5. 数据处理及统计分析 | 第70页 |
| 三、结果 | 第70-74页 |
| 1.C TLA419/MSCs体外定向肝细胞诱导分化鉴定 | 第70-72页 |
| 2. 诱导分化细胞CTLA419的表达鉴定 | 第72-74页 |
| 3 诱导分化细胞免疫抑制功能（MLR） | 第74页 |
| 四、讨论 | 第74-76页 |
| 五、小结 | 第76-77页 |
| 第四章 输注CTLA419修饰的骨髓MSCs诱导大鼠移植肝免疫耐受 | 第77-111页 |
| 第一节 建立大鼠原位肝移植(OLT)急性排斥反应模型 | 第77-87页 |
| 一、材料 | 第77-78页 |
| 二、方法 | 第78-81页 |
| 1. 供体手术 | 第78-79页 |
| 2. 供肝修整 | 第79-80页 |
| 3. 受体手术 | 第80-81页 |
| 4. 术后护理 | 第81页 |
| 5. 标本采集与检测 | 第81页 |
| 6. 数据处理及统计学分析 | 第81页 |
| 三、结果 | 第81-84页 |
| 1. 手术过程 | 第81-82页 |
| 2. 大鼠肝移植急性排斥反应建模情况 | 第82页 |
| 3. 术后受体大鼠一般情况及生存时间 | 第82-83页 |
| 4. 肝功能检查 | 第83-84页 |
| 5. 肝脏病理学检查 | 第84页 |
| 四、讨论 | 第84-87页 |
| 第二节 CTLA419修饰的骨髓MSCs诱导大鼠移植肝供者特异性免疫耐受 | 第87-110页 |
| 一、材料 | 第87-88页 |
| 二、方法 | 第88-95页 |
| 1. 实验分组 | 第88-89页 |
| 2.大鼠 OLT 联合门静脉输注转基因 MSCs | 第89页 |
| 3. 血液标本采集与检测 | 第89-91页 |
| 4. 移植肝组织标本采集与检测 | 第91-94页 |
| 5. 皮肤移植 | 第94-95页 |
| 6. 混合淋巴细胞培养 | 第95页 |
| 7. 数据处理及统计分析 | 第95页 |
| 三、结果 | 第95-104页 |
| 1. 手术过程 | 第95-96页 |
| 2. 生存时间的观察 | 第96页 |
| 3. 移植肝功能血液生化检测 | 第96-97页 |
| 4. 移植肝组织病理学检测 | 第97-100页 |
| 5. 移植肝组织免疫组化检测 | 第100页 |
| 6. 报告基因GFP的表达 | 第100-101页 |
| 7.CTLA4Ig 的表达 | 第101-102页 |
| 8. 原位杂交检测Sry阳性细胞 | 第102页 |
| 9. 皮肤移植 | 第102-104页 |
| 10. 混合淋巴细胞培养 | 第104页 |
| 四、讨论 | 第104-110页 |
| 第三节 小结 | 第110-111页 |
| 第五章 结论 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-124页 |
| 攻读博士期间发表的论文及申请专利 | 第124-125页 |
| 中文摘要 | 第125-130页 |
| 英文摘要 | 第130-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
