| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·L-精氨酸及其应用 | 第7-8页 |
| ·L-精氨酸的生理意义 | 第7-8页 |
| ·L-精氨酸的应用 | 第8页 |
| ·L-精氨酸在微生物体内的合成 | 第8-9页 |
| ·L-精氨酸生产菌株的国内外研究进展 | 第9-11页 |
| ·氨基酸转运蛋白的研究进展 | 第11-13页 |
| ·棒杆菌氨基酸转运蛋白的研究进展 | 第12-13页 |
| ·精氨酸转运蛋白的研究进展 | 第13页 |
| ·立题意义与研究内容 | 第13-15页 |
| ·立题意义 | 第13-14页 |
| ·研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第15-16页 |
| ·PCR 引物及基因扩增 | 第16页 |
| ·培养基与培养方法 | 第16-17页 |
| ·培养基 | 第16-17页 |
| ·培养方法 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·生化试剂 | 第17页 |
| ·工具酶及其它 | 第17-18页 |
| ·SDS-PAGE 电泳及Western Blot 试剂配方 | 第18页 |
| ·SDS-PAGE 电泳凝胶的配制 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-29页 |
| ·发酵参数分析 | 第18-19页 |
| ·E.coli 基因组DNA 的提取 | 第19页 |
| ·钝齿棒杆菌基因组DNA 的提取 | 第19页 |
| ·分子克隆相关常规操作 | 第19页 |
| ·基因克隆及序列分析 | 第19页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第19-21页 |
| ·SDS-PAGE 电泳及Western Blot 鉴定方法 | 第21页 |
| ·基于E.coli BL21 L-精氨酸缺陷型菌株的平板显色法的构建 | 第21-24页 |
| ·棒杆菌感受态细胞的制备及电转方法 | 第24页 |
| ·钝齿棒杆菌lysE 基因敲除 | 第24-26页 |
| ·重组钝齿棒杆菌的构建 | 第26页 |
| ·平板显色法检测胞外L-精氨酸分泌情况 | 第26页 |
| ·钝齿棒杆菌胞内外氨基酸含量测定 | 第26-27页 |
| ·钝齿棒杆菌摇瓶发酵产L-精氨酸 | 第27-29页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第29-45页 |
| ·精氨酸转运蛋白ArgO/LysE 在大肠杆菌中克隆表达研究 | 第29-32页 |
| ·大肠杆菌argO（EcargO）及钝齿棒杆菌lysE（CclysE）的克隆及序列分析 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌中EcargO、CclysE 表达研究 | 第30-32页 |
| ·构建平板显色法定性检测L-精氨酸分泌 | 第32-35页 |
| ·E.coli BL21 L-精氨酸缺陷型菌株的构建 | 第33-34页 |
| ·利用L-精氨酸缺陷型菌株定性检测L-精氨酸分泌的平板显色法的建立 | 第34-35页 |
| ·钝齿棒杆菌中转运蛋白LysE 的功能研究 | 第35-40页 |
| ·精氨酸转运蛋白lysE 基因缺失菌株的构建 | 第35-37页 |
| ·重组钝齿棒杆菌的构建 | 第37-38页 |
| ·平板显色法初步检测几种钝齿棒杆菌L-精氨酸分泌情况 | 第38-39页 |
| ·基本培养基中lysE 基因功能的验证 | 第39-40页 |
| ·钝齿棒杆菌基因缺失菌、缺失加强菌、原始菌及原始加强菌的发酵实验 | 第40-45页 |
| ·钝齿棒杆菌基因缺失菌、缺失加强菌、原始菌及原始加强菌发酵性能实验 | 第40-43页 |
| ·钝齿棒杆菌基因缺失菌、缺失加强菌、原始菌及原始加强菌氨基酸含量分析 | 第43-45页 |
| 主要结论与展望 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文及专利 | 第53页 |
