| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1 昆虫的生物钟 | 第12-17页 |
| ·昆虫生物钟的种类 | 第12页 |
| ·昆虫的生物钟基因 | 第12-14页 |
| ·果蝇的昼夜节律及分子机制 | 第14-17页 |
| ·果蝇昼夜生物钟输入途径 | 第15页 |
| ·果蝇分子钟的反馈环路 | 第15-17页 |
| ·果蝇昼夜生物钟的输出 | 第17页 |
| 2 隐花色素研究进展 | 第17-25页 |
| ·cry基因的结构和进化历史 | 第18-19页 |
| ·CRY蛋白的结构特点 | 第19-21页 |
| ·不同生物CRY的细胞定位与功能 | 第21-25页 |
| ·果蝇CRY | 第21页 |
| ·哺乳动物CRY | 第21-22页 |
| ·拟南芥CRY | 第22-23页 |
| ·CRY1与CRY2的功能差异 | 第23-25页 |
| 3 光照与温度对昆虫生物节律的影响 | 第25-28页 |
| ·CRY蛋白在光照机制中的作用 | 第26页 |
| ·CRY与PER:TIM复合体在温度诱导中的相互作用 | 第26页 |
| ·光照和温度对生物钟的协同作用 | 第26-27页 |
| ·家蚕在研究温度诱导机制中的应用前景 | 第27-28页 |
| 第二章 Bm-cry1和Bm-cry2基因的电子克隆 | 第28-39页 |
| 1 材料与方法 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·序列信息 | 第28页 |
| ·软件工具 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-33页 |
| ·Bm-cry1基因的电子克隆 | 第29-30页 |
| ·Bm-cry2基因的电子克隆 | 第30-33页 |
| 3 讨论 | 第33-39页 |
| ·电子克隆Bm-cry基因序列的可靠性 | 第33-34页 |
| ·CRY1和CRY2的保守性 | 第34-39页 |
| 第三章 Bm-cry1和Bm-cry2的实验克隆和序列分析 | 第39-63页 |
| 1 材料与方法 | 第39-45页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·生物材料 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40-45页 |
| ·引物设计 | 第40-42页 |
| ·家蚕头部总RNA提取 | 第42页 |
| ·cDNA合成 | 第42-43页 |
| ·PCR反应体系及条件设置 | 第43页 |
| ·3'RACE和5'RACE PCR反应 | 第43页 |
| ·目的基因cDNA回收 | 第43页 |
| ·连接反应 | 第43-44页 |
| ·感受态细胞制备 | 第44页 |
| ·连接产物转化 | 第44页 |
| ·重组质粒筛选 | 第44页 |
| ·质粒DNA制备 | 第44-45页 |
| ·生物信息学资源及分析软件 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-61页 |
| ·RT-PCR反应及酶切鉴定 | 第45-47页 |
| ·Bm-cry1的PCR反应及酶切鉴定 | 第45页 |
| ·Bm-cry2的PCR反应及酶切鉴定 | 第45-47页 |
| ·电子克隆序列(大造)与实验克隆序列(C108)比对 | 第47-49页 |
| ·Bm-cry1的比对结果 | 第47页 |
| ·Bm-cry2的比对结果 | 第47-49页 |
| ·Bm-cry2的RACE PCR结果 | 第49-51页 |
| ·蛋白序列分析 | 第51-54页 |
| ·分子量等电点分析 | 第51页 |
| ·信号肽分析 | 第51页 |
| ·跨膜区预测 | 第51-53页 |
| ·二级结构预测 | 第53页 |
| ·蛋白功能域(保守区)分析 | 第53-54页 |
| ·蛋白功能位点分析 | 第54页 |
| ·蛋白质同源性和分子进化分析 | 第54-61页 |
| ·蛋白同源性分析 | 第54-59页 |
| ·分子进化分析 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| ·序列克隆 | 第61页 |
| ·序列分析 | 第61页 |
| ·分子进化 | 第61-63页 |
| 第四章 Bm-cry2基因的时空表达 | 第63-76页 |
| 1 材料和方法 | 第63-67页 |
| ·生物材料 | 第63-65页 |
| ·实验药品 | 第65页 |
| ·试验设备 | 第65-66页 |
| ·研究方法 | 第66-67页 |
| ·引物设计 | 第66页 |
| ·总RNA提取 | 第66页 |
| ·Reverse Transcription-PCR反应 | 第66-67页 |
| ·PCR反应条件 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-73页 |
| ·不同循环数对家蚕Actin3、cry2基因扩增效率的影响 | 第67页 |
| ·家蚕卵不同孵化条件对Bm-cry2基因表达的影响 | 第67-70页 |
| ·Bm-cry2的卵孵化期逐日表达结果 | 第67-68页 |
| ·Bm-cry2的卵孵化敏感时期表达结果 | 第68-70页 |
| ·家蚕不同孵化条件对次代卵Bm-cry2基因表达的影响 | 第70-73页 |
| ·浸酸活化对次代滞育卵Bm-cry2基因表达的影响 | 第70页 |
| ·孵化温度对次代卵Bm-cry2基因表达的影响 | 第70-71页 |
| ·孵化光照对次代卵Bm-cry2基因表达的影响 | 第71-73页 |
| ·光照和温度协同作用对次代卵Bm-cry2基因表达的影响 | 第73页 |
| ·家蚕Bm-cry2基因在家蚕幼虫不同组织的表达差异 | 第73页 |
| 3 讨论 | 第73-76页 |
| ·滞育诱导发生孵化条件对家蚕卵Bm-cry2表达的影响 | 第73-74页 |
| ·家蚕不同滞育诱导发生孵化条件对次代卵Bm-cry2基因表达的影响 | 第74-75页 |
| ·Bm-cry2在家蚕幼虫不同组织的表达差异 | 第75-76页 |
| 第五章 综合结论 | 第76-78页 |
| 1 Bm-cry1和Bm-cry2基因克隆和序列分析 | 第76页 |
| 2 滞育诱导环境对Bm-cry2基因表达的影响 | 第76-77页 |
| 3 Bm-cry2基因在家蚕幼虫不同组织中的表达差异 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 研究生期间发表文章 | 第86-87页 |
| 论文资助项目 | 第87-88页 |
| 附录 | 第88-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
