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牛肌肉生成抑制素基因遗传变异及基因免疫的初步研究

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 文献综述第15-31页
   ·引言第15页
   ·肌肉生成抑制素研究进展第15-23页
     ·肌肉生成抑制素的发现和肌肉生成抑制素缺失动物的表型第15-17页
     ·肌肉生成抑制素的生物合成和活性调控第17-19页
     ·肌肉生成抑制素的信号通路第19页
     ·细胞和组织对肌肉生成抑制素信号的应答第19-21页
     ·牛肌肉生成抑制素研究现状及其在肉牛育种中的意义第21-22页
     ·小结第22-23页
   ·基因免疫的研究进展第23-30页
     ·基因免疫的发现与发展第23页
     ·基因疫苗的组成第23页
     ·基因疫苗的免疫方法第23-25页
     ·基因疫苗引起机体免疫反应的机理第25-26页
     ·基因疫苗的特点第26页
     ·影响基因疫苗免疫效果的因素第26-28页
     ·基因疫苗存在的问题及政策法规第28-29页
     ·基因疫苗在疾病预防以外的应用第29页
     ·小结第29-30页
   ·研究目的和意义第30-31页
第二章 牛肌肉生成抑制素基因遗传变异与胴体性状的关系第31-46页
   ·材料与方法第31-39页
     ·DNA 样品第31页
     ·试验牛群饲养管理和屠宰第31-33页
     ·主要仪器设备第33页
     ·主要试剂及配制方法第33-36页
     ·主要分子生物学数据库及软件第36页
     ·DNA 的提取及检测第36-37页
     ·单核苷酸多态性位点的筛查和检测第37-38页
     ·单核苷酸多态性与性状的关联分析第38-39页
   ·结果第39-43页
     ·DNA 的提取和检测第39页
     ·肌肉生成抑制素基因5’侧翼区单核苷酸多态性筛选结果第39-40页
     ·肌肉生成抑制素g433 C>A 位点的多态性与胴体性状的关系第40-42页
     ·肌肉生成抑制素g2974 C>T 位点的多态性与胴体性状的关系第42-43页
   ·讨论第43-45页
     ·SNP 的筛查和选择第43-44页
     ·肌肉生成抑制素基因与肌肉发育相关性状的关联分析第44页
     ·肌肉生成抑制素基因与脂肪沉积性状的关联分析第44-45页
   ·小结第45-46页
第三章 肌肉生成抑制素蛋白结构和理化特性分析第46-53页
   ·材料与方法第46-47页
     ·主要分子生物学数据库及软件第46页
     ·不同物种肌肉生成抑制素蛋白一级结构的比较第46页
     ·肌肉生成抑制素蛋白二级结构和理化性质分析方法第46页
     ·肌肉生成抑制素蛋白抗原性分析方法第46-47页
   ·结果第47-51页
     ·不同物种肌肉生成抑制素的同源性比较第47-49页
     ·肌肉生成抑制素蛋白二级结构分析第49-50页
     ·肌肉生成抑制素蛋白的理化性质分析第50-51页
     ·肌肉生成抑制素蛋白的抗原性分析第51页
   ·讨论第51-52页
     ·不同物种肌肉生成抑制素的同源性第51页
     ·利用生物信息学方法分析蛋白抗原性第51-52页
   ·小结第52-53页
第四章 肌肉生成抑制素基因疫苗的构建第53-61页
   ·材料与方法第53-58页
     ·DNA 样品、质粒和细菌第53-54页
     ·主要仪器设备第54页
     ·主要试剂和配制方法第54页
     ·主要分子生物学数据库以及软件第54页
     ·引物设计第54页
     ·质粒小量提取和DNA 凝胶回收第54-55页
     ·重组质粒的构建第55-58页
     ·重组质粒的酶切和测序鉴定第58页
   ·结果第58-60页
     ·乙肝表面抗原S 基因的扩增第58-59页
     ·肌肉生成抑制素基因的扩增第59页
     ·抑制素基因的扩增第59页
     ·重组质粒的鉴定第59-60页
   ·讨论第60页
   ·小结第60-61页
第五章 肌肉生成抑制素基因疫苗在 Hela 细胞中的表达第61-77页
   ·材料与方法第61-70页
     ·细胞株第61页
     ·主要仪器设备第61页
     ·主要试剂和配制方法第61-64页
     ·无内毒素重组质粒的提取第64-65页
     ·Hela 细胞的培养和传代第65页
     ·Hela 细胞的冻存和复苏第65-67页
     ·重组质粒脂质体法转染Hela 细胞第67页
     ·重组质粒转录产物检测第67页
     ·重组蛋白的检测第67-70页
   ·结果第70-74页
     ·Hela 细胞的复苏和传代培养第70-72页
     ·重组质粒转染Hela 细胞第72-73页
     ·重组质粒转染Hela 细胞后转录产物的检测第73-74页
     ·重组质粒转染Hela 细胞后重组蛋白的检测第74页
   ·讨论第74-76页
     ·细胞株的选择第74-75页
     ·细胞培养第75-76页
     ·细菌内毒素对转染的影响第76页
     ·重组蛋白的活性第76页
   ·小结第76-77页
第六章 肌肉生成抑制素基因免疫对小鼠的影响第77-96页
   ·材料与方法第77-81页
     ·实验动物第77页
     ·主要仪器设备第77页
     ·主要试剂和配制方法第77-78页
     ·无内毒素重组质粒的大量提取第78页
     ·实验动物分组及免疫接种方案第78页
     ·小鼠血清中特异性抗体的检测第78-79页
     ·小鼠体重称量第79页
     ·小鼠产仔数的检测第79页
     ·小鼠的屠宰和腓肠肌重的数据收集第79页
     ·小鼠腓肠肌肌纤维检测第79-80页
     ·数据处理第80-81页
   ·结果第81-91页
     ·小鼠血清中抗体的检测第81页
     ·基因免疫后不同时间组间体重差异的比较第81-84页
     ·肌肉生成抑制素基因免疫对小鼠产仔数和平均初生重的影响第84-85页
     ·基因免疫后组间仔鼠体重差异的比较第85-89页
     ·肌肉生成抑制素基因免疫对仔鼠腓肠肌的影响第89-91页
   ·讨论第91-95页
     ·关于免疫方法第91页
     ·肌肉生成抑制素基因免疫对小鼠生长发育的影响第91-92页
     ·肌肉生成抑制素对小鼠繁殖性能的影响第92-93页
     ·肌肉生成抑制素基因免疫对子代小鼠平均初生重的影响第93页
     ·肌肉生成抑制素基因免疫对子代小鼠生长发育的影响第93-94页
     ·关于母源性抗体第94-95页
   ·小结第95-96页
第七章 全文结论第96-98页
   ·结论第96页
   ·本研究的创新点第96-97页
   ·下一步要进行的工作第97-98页
参考文献第98-107页
致谢第107-108页
作者简历第108页

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