摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-15页 |
第1章 引言 | 第15-30页 |
·苏云金芽胞杆菌 | 第15-24页 |
·杀虫毒素 | 第16-22页 |
·杀虫蛋白与其它物质间的增效 | 第22-23页 |
·杀虫晶体蛋白的应用 | 第23-24页 |
·昆虫抗性的产生,抗性机制与抗性治理策略 | 第24-25页 |
·昆虫中肠围食膜的研究进展 | 第25-29页 |
·围食膜蛋白的种类及其特性 | 第26页 |
·围食膜的形成机理及破坏机制 | 第26-29页 |
·本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
第2章 Bt 菌株GS8 和Bt11 生物学特性研究 | 第30-41页 |
·材料与方法 | 第30-33页 |
·材料 | 第30-32页 |
·方法 | 第32-33页 |
·结果与分析 | 第33-39页 |
·菌株培养性状及形态观察 | 第33-34页 |
·培养特征和生理生化反应 | 第34-35页 |
·菌株GS8 和Bt11 的生长特性 | 第35-36页 |
·菌株的生物活性测定 | 第36页 |
·杀虫晶体蛋白SDS-PAGE 分析 | 第36-37页 |
·质粒分析 | 第37页 |
·PCR-RFLP 鉴定结果 | 第37-39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
第3章 cry9Ea 基因的克隆表达及相关分析 | 第41-56页 |
·材料与方法 | 第41-47页 |
·材料 | 第41-43页 |
·研究方法 | 第43-47页 |
·结果与分析 | 第47-54页 |
·cry9Ea 基因的PCR 扩增 | 第47页 |
·cry9Ea 基因的克隆 | 第47-48页 |
·cry9Ea 基因的序列测定与分析 | 第48页 |
·Cry9Ea6 氨基酸序列及蛋白质特性分析 | 第48-51页 |
·Cry9Ea6 蛋白的表达 | 第51-52页 |
·Cry9Ea6 蛋白的可溶性分析及定量分析 | 第52-53页 |
·Cry9Ea6 蛋白生物活性测定 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-55页 |
·小结 | 第55-56页 |
第4章 cry1I 基因的克隆表达及相关分析 | 第56-72页 |
·材料与方法 | 第56-58页 |
·材料 | 第56页 |
·研究方法 | 第56-58页 |
·结果与分析 | 第58-70页 |
·cry1Ia 和 cry1Ib 基因的 PCR 扩增 | 第58-59页 |
·cry1Ia 和 cry1Ib 基因的克隆 | 第59-60页 |
·cry1Ia 和 cry1Ib 基因的序列测定与分析 | 第60页 |
·Cry1Ia 和 Cry1Ib 氨基酸序列及蛋白质特性分析 | 第60-65页 |
·Cry1Ia14 和 Cry1Ib3 蛋白的表达 | 第65-66页 |
·Cry1Ia14 和 Cry1Ib3 蛋白的可溶性分析及定量 | 第66-67页 |
·Cry1Ia14 和 Cry1Ib3 蛋白生物活性测定 | 第67-70页 |
·讨论 | 第70-71页 |
·小结 | 第71-72页 |
第5章 工程菌的构建 | 第72-87页 |
·材料与方法 | 第72-78页 |
·菌株与载体 | 第72页 |
·培养基 | 第72页 |
·抗生素 | 第72页 |
·试剂 | 第72-73页 |
·研究方法 | 第73-78页 |
·结果与分析 | 第78-84页 |
·穿梭表达载体的构建 | 第78-79页 |
·工程菌 HD9EA、HD1IA 和 HD1IB 的构建和验证 | 第79-80页 |
·工程菌 HD9EA、HD1IA 和 HD1IB 的 SDS-PAGE 检测 | 第80页 |
·晶体形态检测 | 第80-81页 |
·工程菌 HD9EA、HD1IA 和 HD1IB 的生长特性 | 第81页 |
·工程菌的遗传稳定性 | 第81-82页 |
·晶体蛋白的提取及定量 | 第82-83页 |
·工程菌的生物活性测定 | 第83-84页 |
·讨论 | 第84-86页 |
·小结 | 第86-87页 |
第6章 Cry 蛋白抗体的制备 | 第87-97页 |
·材料和方法 | 第87-89页 |
·材料 | 第87-88页 |
·研究方法 | 第88-89页 |
·结果 | 第89-95页 |
·cry1Ia14 基因的克隆 | 第89-90页 |
·重组质粒 p301IA 的构建与目的蛋白的表达 | 第90-93页 |
·Cry1Ia14 蛋白的纯化 | 第93-94页 |
·Cry9Ea6 晶体蛋白的提取和纯化 | 第94页 |
·Cry1Ia14 和 Cry9Ea6 蛋白的多克隆抗体制备及检测 | 第94-95页 |
·讨论 | 第95-96页 |
·小结 | 第96-97页 |
第7章 Bt 毒蛋白杀虫机理的初步研究 | 第97-112页 |
·材料与方法 | 第97-102页 |
·供试昆虫及菌株 | 第97页 |
·主要试剂 | 第97页 |
·部分存储液、缓冲液配方蛋白质电泳试剂及缓冲液 | 第97-98页 |
·主要仪器设备 | 第98-99页 |
·Bt Cry9Ea6 晶体蛋白和 Cry1Ia14 融合蛋白的提取 | 第99页 |
·蛋白浓度的测定 | 第99页 |
·甜菜夜蛾、粉纹夜蛾中肠围食膜的提取 | 第99页 |
·Trypsin 消化Cry 蛋白 | 第99页 |
·Trypsin 消化后的蛋白生物活性测定 | 第99页 |
·Trypsin 消化后的蛋白处理甜菜夜蛾围食膜和粉纹夜蛾围食膜 | 第99页 |
·毒素蛋白对甜菜夜蛾和粉纹夜蛾中肠围食膜的影响 | 第99-100页 |
·SDS-PAGE 凝胶硝酸银染色 | 第100页 |
·石蜡切片的制作 | 第100-101页 |
·甜菜夜蛾和粉纹夜蛾中肠BBMV 的提取 | 第101页 |
·甜菜夜蛾和粉纹夜蛾中肠BBMV 的SDS-PAGE 电泳检测 | 第101页 |
·甜菜夜蛾和粉纹夜蛾中肠BBMV 的Western 印迹 | 第101-102页 |
·结果与分析 | 第102-110页 |
·Trypsin 消化Cry 蛋白 | 第102-103页 |
·Trypsin 消化Cry 蛋白后生物活性测定结果 | 第103-104页 |
·Cry 蛋白处理甜菜夜蛾围食膜和粉纹夜蛾围食膜 | 第104-105页 |
·Cry 蛋白对甜菜夜蛾、粉纹夜蛾中肠的影响 | 第105-108页 |
·中肠BBMV 的制备及特性研究 | 第108-110页 |
·讨论 | 第110-111页 |
·小结 | 第111-112页 |
全文结论 | 第112-113页 |
参考文献 | 第113-126页 |
附录 | 第126-132页 |
在读期间发表的学术论文 | 第132-133页 |
作者简历 | 第133-134页 |
致谢 | 第134-135页 |