| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 1 前言 | 第13-43页 |
| ·根瘤菌和豆科植物共生关系的形成 | 第14-24页 |
| ·根瘤菌中参与共生关系的基因 | 第15-23页 |
| ·根瘤菌的结瘤基因 | 第15-18页 |
| ·根瘤菌的固氮基因 | 第18-21页 |
| ·共生基因的表达调控 | 第21-23页 |
| ·结瘤因子 | 第23-24页 |
| ·豆科植物中参与共生关系的基因 | 第24页 |
| ·根瘤菌的质粒 | 第24-37页 |
| ·共生质粒及其功能 | 第25-26页 |
| ·非共生质粒及其功能 | 第26-28页 |
| ·根瘤菌质粒的多样性和稳定性 | 第28-31页 |
| ·根瘤菌质粒的不相容性 | 第31-32页 |
| ·根瘤菌质粒的消除方法 | 第32-33页 |
| ·根瘤菌质粒的转移 | 第33-37页 |
| ·根瘤菌多样性的研究 | 第37-42页 |
| ·表型多样性研究 | 第38-40页 |
| ·多位点酶电泳(Multilocus enzyme electrophoresis,MLEE) | 第38页 |
| ·全细胞可溶性蛋白电泳 | 第38-39页 |
| ·全细胞脂肪酸分析 | 第39页 |
| ·脂多糖分析(LPS) | 第39页 |
| ·数值分类法 | 第39-40页 |
| ·遗传多样性研究 | 第40-42页 |
| ·16S rRNA基因PCR-RFLP及其序列分析 | 第40页 |
| ·16S-23S rRNA IGS PCR-RFLP | 第40-41页 |
| ·扩增片段长度多态性(AFLP) | 第41页 |
| ·随机引物扩增DNA片断多态性(RAPD) | 第41页 |
| ·基因组短重复序列的多态性分析 | 第41-42页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第42-43页 |
| 2.材料和方法 | 第43-58页 |
| ·材料 | 第43-52页 |
| ·供试的菌株和质粒 | 第43-47页 |
| ·供试植株品种 | 第47页 |
| ·供试引物 | 第47-48页 |
| ·培养基与培养条件 | 第48-50页 |
| ·培养基 | 第48-50页 |
| ·培养条件 | 第50页 |
| ·抗生素与使用浓度 | 第50页 |
| ·缓冲液与试剂 | 第50-52页 |
| ·方法 | 第52-58页 |
| ·根瘤菌的分离和纯化 | 第52-53页 |
| ·菌株回接与有效性试验 | 第53页 |
| ·根瘤菌质粒的快速检测 | 第53页 |
| ·带有Tn5-mob-sacB的根瘤菌转座突变株的筛选 | 第53页 |
| ·质粒上带有Tn5-mob-sacB标记菌株的筛选与标记质粒的消除 | 第53页 |
| ·共生质粒的接合转移 | 第53-54页 |
| ·根瘤菌质粒稳定性的检测 | 第54页 |
| ·植物盆栽结瘤实验 | 第54页 |
| ·竞争结瘤实验 | 第54页 |
| ·根瘤固氮酶活测定 | 第54-55页 |
| ·总DNA的提取 | 第55页 |
| ·质粒DNA制备(常规碱变性法) | 第55页 |
| ·16S rRNA基因PCR-RELP | 第55-56页 |
| ·16S rRNA基因全序列分析 | 第56页 |
| ·16S-23S rRNA IGS PCR-RELP | 第56-57页 |
| ·随机引物扩增DNA片段多态性分析(RAPD) | 第57页 |
| ·统计方法 | 第57-58页 |
| 3.结果和讨论 | 第58-101页 |
| ·豌豆根瘤菌共生质粒与华癸中生根瘤菌2020的相互作用 | 第58-70页 |
| ·华癸中生根瘤菌2020质粒的消除 | 第58-62页 |
| ·华癸中生根瘤菌2020质粒稳定性的测定 | 第58-59页 |
| ·三亲本杂交抗性标记的选择 | 第59页 |
| ·质粒上带有Tn5-mob-SacB标记菌株的筛选 | 第59页 |
| ·转座突变株标记质粒的消除与缺失突变株的筛选 | 第59-60页 |
| ·2020及其突变株的共生固氮特性 | 第60-61页 |
| ·小结与讨论 | 第61-62页 |
| ·豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI向M.huakuii 2020及其质粒缺失突变株的转移 | 第62-70页 |
| ·转移接合子的鉴定 | 第63-64页 |
| ·转移接合子的稳定性 | 第64页 |
| ·pJB5JI转移接合子共生效应的测定 | 第64-69页 |
| ·Km抗性基因的扩增 | 第69页 |
| ·小结和讨论 | 第69-70页 |
| ·豌豆根瘤菌共生质粒与华癸中生根瘤菌7653R的相互作用 | 第70-81页 |
| ·华癸中生根瘤菌7653R质粒的消除 | 第70-73页 |
| ·7653R质粒稳定性的测定 | 第71页 |
| ·7653R Tn5-mob-sacB转座突变株的获得与标记质粒的消除 | 第71-72页 |
| ·7653R及其质粒消除的突变株的植物盆栽结瘤试验 | 第72-73页 |
| ·小结和讨论 | 第73页 |
| ·共生质粒pJB5JI向7653R和7653RD转移 | 第73-81页 |
| ·转移接合子的鉴定 | 第74页 |
| ·外源共生质粒pJB5JI在7653R和7653RD中的稳定性 | 第74-75页 |
| ·转移接合子共生效应的测定 | 第75-79页 |
| ·Kan抗性基因的扩增 | 第79-80页 |
| ·小结和讨论 | 第80-81页 |
| ·豌豆根瘤菌共生质粒和费氏中华根瘤菌的相互关系 | 第81-88页 |
| ·HN01及其质粒缺失菌株的质粒检测及稳定性测定 | 第81-82页 |
| ·共生质粒pJB5JI的转移和转移接合子的鉴定 | 第82-83页 |
| ·转移接合子的稳定性 | 第83-84页 |
| ·转移接合子共生效应的测定 | 第84-87页 |
| ·转移接合子共生固氮能力的测定 | 第84-87页 |
| ·转移接合子竞争结瘤能力的测定 | 第87页 |
| ·转移接合子在共生条件下的稳定性 | 第87页 |
| ·小结和讨论 | 第87-88页 |
| ·豌豆根瘤菌遗传多样性的研究 | 第88-101页 |
| ·豌豆根瘤菌16S rRNA基因PCR-RELP聚类分析 | 第88-91页 |
| ·16S rRNA基因序列分析 | 第91-92页 |
| ·16S-23S rRNA IGS PCR-RFLP分析 | 第92-95页 |
| ·RAPD聚类分析 | 第95-100页 |
| ·小结和讨论 | 第100-101页 |
| 4 总结与展望 | 第101-103页 |
| ·已取得的主要研究成果 | 第101-102页 |
| ·进一步研究的设想 | 第102-103页 |
| 5 参考文献 | 第103-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
