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日粮中添加维生素D3对鸡抗菌肽基因表达的影响研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-8页
常用词语缩写第8-12页
1 文献综述第12-26页
   ·鸡源抗菌肽AvBDs与fowlicidins简介第12-15页
     ·鸡AvBDs简介第12-14页
     ·鸡fowlicidins简介第14-15页
   ·鸡β-防御素的组织表达分布第15-16页
     ·免疫器官第15页
     ·胃肠道系统第15页
     ·泌尿生殖系统第15-16页
     ·呼吸道、皮肤第16页
   ·鸡β-防御素的表达调控第16-18页
     ·外源性物质对鸡β-防御素的诱导表达第16-17页
     ·生理机能状况与鸡β-防御素表达第17页
     ·鸡β-防御素表达水平与家禽的抗病力第17-18页
   ·鸡fowlicidins的组织表达特性第18页
   ·抗菌肽表达调控模式简介第18-19页
   ·1,25-(OH)_2-D_3介导抗菌肽表达调控第19-23页
     ·1,25-(OH)_2-D_3诱导cathelicidin抗菌肽(CAMP)表达调控的提出第19-20页
     ·1,25-(OH)_2-D_3调控CAMP表达第20-22页
     ·1,25-(OH)_2-D_3诱导CAMP表达的细胞分布第22页
     ·1,25-(OH)_2-D_3与其它物质对CAMP表达的协同作用第22-23页
     ·有待进一步研究的问题第23页
   ·结语第23-24页
   ·研究背景及目的与意义第24-26页
     ·研究背景第24-25页
     ·试验目的第25页
     ·意义第25-26页
2 材料与方法第26-39页
   ·四川山地乌骨鸡饲养第26-27页
     ·试验地点与时间第26页
     ·基础日粮第26页
     ·试验动物及分组第26-27页
     ·饲养管理第27页
   ·AvBD-1、fowlicidin-1、2、3的组织表达分布第27-32页
     ·主要试验仪器及试剂第27-28页
     ·溶液及试剂配制第28页
     ·提取RNA样品采集第28-29页
     ·总RNA的提取第29-30页
     ·逆转录(单链cDNA的合成)第30页
     ·引物设计与合成、稀释第30-31页
     ·PCR扩增第31-32页
   ·维生素D对AvBD-1、fowlicidin-1、VDRmRNA表达量影响第32-35页
     ·主要仪器及试剂第32页
     ·溶液及试剂配制第32页
     ·样品采集第32页
     ·总RNA提取第32页
     ·反转录第32页
     ·引物设计第32-33页
     ·基因表达量的荧光定量分析第33-35页
     ·目的基因表达量的计算第35页
   ·fowlicidin-1启动子序列转录因子结合位点分析第35-39页
     ·样品采集(抗凝血)第35页
     ·DNA的抽提与纯化第35-36页
     ·PCR扩增第36页
     ·fowlicidin-1启动子序列测序载体的构建第36-38页
     ·测序与分析第38-39页
3 实验结果第39-51页
   ·总RNA提取效果第39页
   ·AvBD-1、fowlicidin-1、2、3的组织表达分布第39-40页
   ·不同VD_3添加剂量对AvBD-1、fowlicidin-1、VDR相对表达量的影响第40-47页
     ·荧光检测的重复性第40-41页
     ·β-actin、AvBD-1、fowlicidin-1、VDR基因荧光定量PCR扩增的标准曲线和扩增产物特异性第41-43页
     ·AvBD-1、fowlicidin-1基因在法氏囊中的表达第43-44页
     ·AvBD-1、fowlicidin-1基因在胸腺中表达第44-45页
     ·VDR基因在法氏囊中的表达第45-46页
     ·法氏囊中AvBD-1、fowlicidin-1、VDR基因表达水平的相关分析第46-47页
   ·fowlicidin-1启动子序列转录因子结合位点分析第47-51页
     ·模板DNA抽提结果第47页
     ·fowlicidin-1基因启动子序列PCR扩增结果第47页
     ·fowlicidin-1基因启动子序列NCBI Blast比对结果第47-49页
     ·fowlicidin-1基因启动子序列转录因子结合位点预测第49-51页
4 讨论第51-59页
   ·鸡β-防御素-1和fowlicidin-1、2、3的组织表达分布第51-52页
   ·维生素D_3对鸡抗菌肽的表达调控第52-54页
   ·鸡抗菌肽表达调控通路第54-58页
     ·维生素D_3对鸡VDR的表达调控第54-55页
     ·fowlicidin-1基因启动子序列的转录因子结合位点分析第55-58页
   ·有待进一步研究的问题第58-59页
5 结论第59-60页
参考文献第60-66页
攻读硕士期间发表论文情况第66-67页
致谢第67-68页
附表第68页

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