| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| ·禽白血病的研究概况 | 第10-16页 |
| ·病原学 | 第10-11页 |
| ·ALV- J 的病毒核酸、结构和编码蛋白 | 第11-13页 |
| ·ALV- J 病毒的基因组 | 第13页 |
| ·ALV- J 的病毒病原性及致病机理 | 第13-14页 |
| ·ALV- J 的流行病学、临诊症状及病理变化 | 第14-15页 |
| ·诊断及检测方法 | 第15-16页 |
| ·防制 | 第16页 |
| ·单克隆抗体的研究进展 | 第16-18页 |
| ·抗原表位的研究方法及研究进展 | 第18-24页 |
| ·抗原表位的预测 | 第18-19页 |
| ·抗原表位的测定 | 第19-20页 |
| ·抗原表位的应用研究和进展 | 第20-21页 |
| ·表位疫苗在疾病控制中的应用 | 第21-24页 |
| 第二章 ALV-J 分离株Hrb-1 gp85 基因蛋白的原核表达及多克隆血清的制备 | 第24-34页 |
| ·材料与方法 | 第24-28页 |
| ·病毒、血清、细胞、质粒及菌株 | 第24页 |
| ·引物 | 第24-25页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第25页 |
| ·ALV-J Hrb-1 毒株的病毒培养 | 第25页 |
| ·病毒RNA 提取及gp85 基因的扩增 | 第25页 |
| ·gp85 蛋白特性的分析 | 第25页 |
| ·Hrb-1 株gp85 基因原核表达载体pProEX HTb/ gp85 的构建及鉴定 | 第25-26页 |
| ·重组蛋白的诱导表达、鉴定、纯化及复性 | 第26-28页 |
| ·鼠抗gp85 重组蛋白多克隆血清的制备 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-32页 |
| ·目的基因片段的扩增 | 第28-29页 |
| ·重组蛋白性质分析 | 第29页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的表达、纯化与鉴定 | 第30-31页 |
| ·多克隆血清的效价测定和免疫原性分析 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第三章 ALV-J 分离株Hrb-1 gp85 基因杆状病毒表达载体的构建及重组蛋白的表达 | 第34-43页 |
| ·材料和方法 | 第34-39页 |
| ·病毒与细胞 | 第34-35页 |
| ·质粒、菌株、细胞与培养基 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·细菌培养基 | 第35页 |
| ·引物 | 第35页 |
| ·表达gp85 基因蛋白的重组杆状病毒的构建 | 第35-38页 |
| ·间接ELISA 检测rBac- gp85 在昆虫细胞中的表达 | 第38页 |
| ·间接IFA 检测rBac- gp85 在昆虫细胞中的表达 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-41页 |
| ·重组质粒p Fast BacHTA/ gp85 的构建及鉴定 | 第39页 |
| ·重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid- gp85 的提取和鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组杆状病毒rBac- gp85 的PCR 鉴定 | 第40页 |
| ·间接ELISA 检测gp85 表达 | 第40-41页 |
| ·间接IFA 检测gp85 表达 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第四章 ALV-J 分离株Hrb-1 gp85 基因蛋白单克隆抗体的制备 | 第43-54页 |
| ·材料和方法 | 第43-49页 |
| ·免疫抗原、细胞系及其培养基 | 第43页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第43-44页 |
| ·动物免疫 | 第44页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第44-48页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第48页 |
| ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-52页 |
| ·单克隆抗体的筛选与单克隆杂交瘤细胞株的建立 | 第49-50页 |
| ·单克隆抗体腹水效价的测定 | 第50页 |
| ·杂交瘤细胞的染色体分析 | 第50-51页 |
| ·杂交瘤细胞稳定性分析 | 第51页 |
| ·Western Blot 检测抗单克隆抗体特异性 | 第51页 |
| ·间接IFA 试验鉴定结果 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第五章 ALV-J 分离株Hrb-1 gp85 蛋白抗原表位的初步分析 | 第54-61页 |
| ·材料和方法 | 第54-56页 |
| ·质粒及菌株 | 第54-55页 |
| ·单克隆抗体 | 第55页 |
| ·试剂 | 第55页 |
| ·gp85 抗原表位的预测及分段引物的设计 | 第55-56页 |
| ·gp85 分段扩增、克隆与表达 | 第56页 |
| ·Western Blot 筛选抗原表位 | 第56页 |
| ·结果 | 第56-59页 |
| ·gp85 抗原表位的预测及分段引物的设计 | 第56-57页 |
| ·gp85 基因的分段表达 | 第57-58页 |
| ·Western Blot 筛选抗原表位 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
