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浙江地区副溶血弧菌分离株主要毒力基因分布特征及其相关基因表达研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
文献综述第12-30页
 第一章 副溶血弧菌研究进展第12-30页
   ·副溶血弧菌的主要生物学特性第12-13页
     ·培养特性第12页
     ·生长与栖息环境第12-13页
   ·副溶血弧菌的流行特征及耐药性研究第13-14页
     ·副溶血弧菌引起的人类食物中毒第13-14页
     ·副溶血弧菌在海产品中的污染状况第14页
     ·副溶血弧菌耐药性研究第14页
   ·副溶血弧菌检测技术研究进展第14-17页
     ·最大可能数法(MPN)第14-15页
     ·PCR 方法第15-16页
     ·核酸杂交法第16页
     ·显色培养基第16页
     ·酶联免疫吸附(ELISA)法第16-17页
   ·副溶血弧菌的毒力因子及致病机制第17-23页
     ·黏附因子与侵袭力第17-18页
     ·溶血性毒素(Helmolysin)第18-21页
     ·尿素酶(Ureases)第21-22页
     ·脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)第22页
     ·胞外酶第22页
     ·三型分泌系统(TTSS)第22-23页
     ·摄铁系统(Ferric uptake system)第23页
   ·副溶血弧菌的致病性及预防感染的措施第23-24页
     ·副溶血弧菌的致病性第23-24页
     ·预防副溶血弧菌感染的方法第24页
   ·实时荧光定量PCR 技术第24-30页
     ·实时荧光定量PCR 技术的原理及几个重要参数第24-25页
     ·实时荧光定量PCR 的分类第25-27页
     ·实时荧光定量PCR 的定量方法第27-28页
     ·实时荧光定量PCR 技术的应用第28-30页
试验研究第30-63页
 第二章 浙江地区副溶血弧菌的分离鉴定及耐药性调查第30-38页
   ·材料与方法第30-33页
     ·材料第30-31页
     ·引物的设计与合成第31-32页
     ·细菌基因组DNA 的提取第32页
     ·副溶血弧菌的双重PCR 鉴定第32页
     ·副溶血弧菌的甘油冷冻保藏法第32-33页
     ·副溶血弧菌体外药物敏感性测定第33页
   ·结果第33-36页
     ·海产品及其养殖环境中副溶血弧菌分布特征第33-34页
     ·2006-2008 年副溶血分离菌体外抗菌药物敏感性试验第34-36页
   ·讨论第36-38页
 第三章 浙江地区副溶血弧菌海产品及环境分离株的表型及毒力相关基因分析第38-43页
   ·材料和方法第38-40页
     ·材料第38-39页
     ·引物的设计与合成第39页
     ·细菌基因组DNA 的提取第39页
     ·副溶血弧菌主要毒力基因的PCR 扩增第39页
     ·神奈川溶血试验第39页
     ·尿素酶试验第39-40页
   ·结果第40-41页
     ·副溶血弧菌毒力相关基因检测结果第40页
     ·副溶血弧菌的溶血与尿素酶表型第40-41页
   ·讨论第41-43页
 第四章 副溶血弧菌在应激条件下的生长及TDH 基因表达情况分析第43-53页
   ·材料与方法第43-46页
     ·材料第43-44页
     ·方法第44-46页
   ·结果第46-51页
     ·高浓度氯化钠培养条件下副溶血弧菌的生长情况第46-48页
     ·低pH 值培养条件下副溶血弧菌的生长情况第48-49页
     ·不同浓度氯化钠和不同pH 相互作用下副溶血弧菌的生长情况第49-50页
     ·应激对细菌tdh 基因转录水平的影响第50-51页
   ·讨论第51-53页
 第五章 副溶血弧菌尿素酶表型与相关基因表达的关系研究第53-63页
   ·材料和方法第54-57页
     ·材料第54页
     ·引物的设计与合成第54-55页
     ·副溶血弧菌基因组DNA 的提取第55页
     ·副溶血弧菌trh-ure cluster 基因的PCR 扩增第55页
     ·副溶血弧菌cDNA 的获取第55-56页
     ·不同尿素酶表型菌株trh、ureC 基因表达水平的分析第56-57页
     ·尿素诱导与ureR 基因表达的关系的研究第57页
   ·结果第57-61页
     ·副溶血弧菌trh-ure cluster 基因的PCR 扩增结果第57-59页
     ·不同尿素酶表型菌株trh、ureC 基因表达水平的分析结果第59-60页
     ·尿素对ureR 基因表达量的影响第60-61页
   ·讨论第61-63页
结论第63-64页
参考文献第64-71页
附录1 常用试剂及培养基配方第71-73页
附录2 部分浙江沿海地区海产品及环境分离株基因型与表型第73-77页
致谢第77-78页
个人简介第78页

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