凝集素芯片检测糖蛋白方法的建立及应用
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 缩略语 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 1. 本课题的研究目的和意义 | 第13-14页 |
| 2. 本课题的主要研究内容 | 第14页 |
| ·凝集素检测糖蛋白方法的建立 | 第14页 |
| ·疾病相关糖蛋白的研究分析 | 第14页 |
| 3. 本课题的主要技术路线 | 第14-16页 |
| 第一部分 文献回顾 | 第16-26页 |
| 1. 糖蛋白的研究现状 | 第16-18页 |
| ·糖组学的兴起 | 第16页 |
| ·糖蛋白的概念及分类 | 第16-17页 |
| ·糖蛋白与疾病的关系 | 第17-18页 |
| 2. 糖蛋白的研究技术 | 第18-19页 |
| ·凝胶上的糖蛋白研究技术 | 第18页 |
| ·生物质谱技术 | 第18-19页 |
| ·凝集素亲和技术 | 第19页 |
| 3. 凝集素及凝集素芯片技术 | 第19-25页 |
| ·凝集素概述 | 第20-23页 |
| ·凝集素的概念 | 第20页 |
| ·凝集素的分类 | 第20-21页 |
| ·凝集素的特性 | 第21页 |
| ·凝集素的应用 | 第21-23页 |
| ·凝集素芯片 | 第23-25页 |
| ·凝集素芯片的概念及原理 | 第23页 |
| ·凝集素芯片的应用 | 第23-25页 |
| 4. 凝集素芯片的前景 | 第25-26页 |
| 第二部分 研究内容 | 第26-60页 |
| 第一章 凝集素芯片检测糖蛋白方法的建立 | 第26-35页 |
| 1. 引言 | 第26页 |
| 2. 标准糖蛋白的选择 | 第26-27页 |
| 3. 实验材料与方法 | 第27-29页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-29页 |
| ·玻片的环氧化修饰 | 第27页 |
| ·凝集素芯片的制备 | 第27-28页 |
| ·凝集素芯片的封闭 | 第28页 |
| ·标准糖蛋白的Cy3标记 | 第28页 |
| ·凝集素芯片的孵育 | 第28-29页 |
| ·数据的扫描与分析 | 第29页 |
| 4. 结果分析 | 第29-34页 |
| ·凝集素芯片检测糖蛋白方法的建立及条件优化 | 第29-32页 |
| ·封闭条件的确定 | 第29页 |
| ·最佳孵育时间及温度的确定 | 第29-31页 |
| ·最佳孵育缓冲液的确定 | 第31-32页 |
| ·反应的特异性实验 | 第32页 |
| ·凝集素芯片糖蛋白的识别 | 第32-34页 |
| 5. 本章小结 | 第34-35页 |
| 第二章 凝集素芯片在肝癌血清学研究中的应用 | 第35-45页 |
| 1. 引言 | 第35-36页 |
| 2. 实验材料和方法 | 第36-39页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第36页 |
| ·试剂的配置 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-39页 |
| ·矩阵设计及点样 | 第36-38页 |
| ·血清蛋白定量 | 第38-39页 |
| ·血清蛋白的Cy3荧光标记 | 第39页 |
| ·Cy3标记血清蛋白的定量 | 第39页 |
| ·凝集素芯片的封闭 | 第39页 |
| ·凝集素芯片的孵育 | 第39页 |
| ·数据的扫描与分析 | 第39页 |
| 3. 结果与分析 | 第39-45页 |
| ·血清蛋白的定量 | 第39-40页 |
| ·Cy3标记血清蛋白浓度的定量 | 第40页 |
| ·荧光扫描图像 | 第40页 |
| ·数据分析 | 第40-45页 |
| 第三章 凝集素芯片在肝细胞研究中的应用 | 第45-52页 |
| 1. 引言 | 第45页 |
| 2. 实验材料和方法 | 第45-47页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·主要材料和试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·试剂的配置 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-47页 |
| ·矩阵设计及点样 | 第46页 |
| ·肝细胞膜蛋白的抽提 | 第46页 |
| ·BCA法测定膜蛋白浓度 | 第46页 |
| ·膜蛋白的Cy3荧光标记 | 第46-47页 |
| ·Cy3标记膜蛋白的定量 | 第47页 |
| ·凝集素芯片的封闭 | 第47页 |
| ·凝集素芯片的孵育 | 第47页 |
| ·数据的扫描与分析 | 第47页 |
| 3. 结果与分析 | 第47-52页 |
| ·肝细胞和肝癌细胞膜蛋白的测定 | 第47-48页 |
| ·Cy3标记膜蛋白浓度的测定 | 第48页 |
| ·荧光扫描图像 | 第48页 |
| ·数据分析 | 第48-52页 |
| 第四章 凝集素芯片在大骨节病血清学研究中的应用 | 第52-60页 |
| 1. 引言 | 第52页 |
| 2. 实验材料和方法 | 第52-54页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第52页 |
| ·试剂的配置 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-54页 |
| ·矩阵设计及点样 | 第52-53页 |
| ·血清蛋白定量 | 第53页 |
| ·血清蛋白的Cy3荧光标记 | 第53页 |
| ·Cy3标记血清蛋白的定量 | 第53页 |
| ·凝集素芯片的封闭 | 第53页 |
| ·凝集素芯片的孵育 | 第53-54页 |
| ·数据的扫描与分析 | 第54页 |
| 3. 结果与讨论 | 第54-60页 |
| ·血清蛋白的定量 | 第54页 |
| ·Cy3标记血清蛋白浓度的定量 | 第54页 |
| ·荧光扫描图像 | 第54-55页 |
| ·数据分析 | 第55-60页 |
| 全文小结 | 第60-62页 |
| 1.论文工作的主要内容和研究成果 | 第60-61页 |
| 2.进一步工作需要解决的问题 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 攻读硕士期间的研究成果及发表的论文 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
