| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一篇 高尔基磷酸化蛋白2(GOLPH2)在肺癌中的表达研究 | 第12-62页 |
| 第1章 绪论 | 第12-25页 |
| ·高尔基体结构和功能 | 第12-14页 |
| ·高尔基体主要功能 | 第12-13页 |
| ·高尔基体驻留蛋白 | 第13-14页 |
| ·高尔基磷酸化蛋白2(GOLPH2)的发现 | 第14-15页 |
| ·GOLPH2 生物学特征 | 第15-16页 |
| ·GOLPH2 家族蛋白 | 第15页 |
| ·GOLPH2 结构 | 第15-16页 |
| ·GOLPH2 在组织中的分布和表达 | 第16-19页 |
| ·GOLPH2 在正常组织中的分布和表达 | 第17页 |
| ·GOLPH2 在癌变组织中的分布和表达 | 第17-19页 |
| ·GOLPH2 的血清检测及其意义 | 第19页 |
| ·GOLPH2 的亚细胞定位及转运 | 第19-21页 |
| ·肺癌 | 第21-23页 |
| ·肺癌的现状和统计数据 | 第21-22页 |
| ·肺癌的分类，成因以及治疗方法 | 第22-23页 |
| ·肺癌发病机制 | 第23页 |
| ·肺癌治疗现状 | 第23页 |
| ·研究基础 | 第23-24页 |
| ·研究方法与技术 | 第24-25页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第25-42页 |
| ·材料 | 第25-32页 |
| ·肺癌病人组织样本 | 第25页 |
| ·肺癌病人血清样本 | 第25页 |
| ·蛋白与抗体 | 第25-26页 |
| ·GOLPH2 不同截断突变体 | 第26页 |
| ·细胞株 | 第26页 |
| ·主要耗材与试剂 | 第26-28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·主要溶液配制 | 第29-32页 |
| ·方法 | 第32-42页 |
| ·GOLPH2 重组质粒的克隆以及重组蛋白原核表达纯化 | 第33页 |
| ·抗 GOLPH2 单克隆抗体制备 | 第33页 |
| ·不同截断突变体的构建 | 第33-34页 |
| ·细胞培养 | 第34-35页 |
| ·质粒瞬时转染 | 第35页 |
| ·细胞裂解 | 第35-36页 |
| ·western blot 检测 | 第36页 |
| ·细胞免疫荧光 | 第36-37页 |
| ·组织石蜡切片及处理 | 第37-38页 |
| ·单克隆抗体 5B12 识别组织 GOLPH2 抗体封闭实验 | 第38页 |
| ·组织常规染色(HE staining) | 第38-39页 |
| ·免疫组织化学 | 第39-40页 |
| ·免疫组织化学染色打分评估 | 第40-41页 |
| ·血清ELISA 夹心检测 | 第41页 |
| ·统计分析方法 | 第41-42页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第42-60页 |
| ·实验结果 | 第42-56页 |
| ·自制单克隆抗体对真核内源表达GOLPH2 识别鉴定 | 第42-44页 |
| ·单克隆抗体 5B12 和 5F10 识别区段鉴定 | 第44-46页 |
| ·单克隆抗体 5B12 对组织 GOLPH2 识别特异性鉴定 | 第46-47页 |
| ·肺癌组织中GOLPH2 表达检测 | 第47-48页 |
| ·GOLPH2 在肺癌组织中的表达评估 | 第48-52页 |
| ·GOLPH2 在肺癌病人组织中的表达和临床病理参数相关性分析(χ2-检测) | 第52-53页 |
| ·GOLPH2 在肺腺癌衍生细胞系中高表达 | 第53-54页 |
| ·肺癌病人血清中的GOLPH2 含量检测 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-60页 |
| 第4章 结论 | 第60-62页 |
| ·自制备单克隆抗体鉴定 | 第60页 |
| ·自制备单克隆抗体对真核内源表达GOLPH2 识别鉴定 | 第60页 |
| ·单克隆抗体 5B12 和 5F10 识别区段鉴定 | 第60页 |
| ·单克隆抗体 5B12 对组织 GOLPH2 识别特异性鉴定 | 第60页 |
| ·肺癌组织中 GOLPH2 表达检测 | 第60-61页 |
| ·GOLPH2 在肺癌组织中的表达评估 | 第60-61页 |
| ·GOLPH2 在肺癌病人组织中的表达和临床病理参数相关性分析(χ2-检测) | 第61页 |
| ·GOLPH2 在肺腺癌衍生的细胞系中高表达 | 第61页 |
| ·GOLPH2 在肺癌病人血清中的含量检测 | 第61-62页 |
| 第二篇 高尔基磷酸化蛋白2(GOLPH2)在裸鼠肝病模型中的研究 | 第62-88页 |
| 第1章 绪论 | 第62-67页 |
| ·肝癌 | 第62-63页 |
| ·肝癌的分类以及现状 | 第62页 |
| ·肝癌治疗现状 | 第62-63页 |
| ·GOLPH2 与肝癌 | 第63-65页 |
| ·GOLPH2 在肝脏中的表达模式 | 第63-64页 |
| ·血清GOLPH2 与肝癌（HCC）的相关性 | 第64-65页 |
| ·人类肿瘤裸鼠模型 | 第65页 |
| ·研究基础 | 第65-66页 |
| ·研究方法与技术 | 第66-67页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第67-74页 |
| ·材料 | 第67-69页 |
| ·实验动物 | 第67页 |
| ·细胞株及蛋白与抗体 | 第67页 |
| ·主要耗材与试剂 | 第67页 |
| ·主要仪器 | 第67-68页 |
| ·主要溶液配制 | 第68-69页 |
| ·方法 | 第69-74页 |
| ·细胞培养上清western blot 检测 | 第69页 |
| ·HepG2 及Huh7 细胞皮下，腹腔以及原位注射裸鼠 | 第69-71页 |
| ·组织获取以和固定以及血清的采集 | 第71页 |
| ·裸鼠尾静脉采血 | 第71-72页 |
| ·HepG2 和Huh7 异体移植肿瘤大小测量及体积计算 | 第72页 |
| ·组织石蜡切片及处理 | 第72页 |
| ·统计方法 | 第72-74页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第74-87页 |
| ·实验结果 | 第74-84页 |
| ·细胞水平检测:GOLPH2 在肝癌细胞系中的定位、表达以及细胞培养上清中的含量检测 | 第74-75页 |
| ·HepG2 和Huh7 腹水制备 | 第75-76页 |
| ·HepG2 和Huh7 异体移植裸鼠瘤形态 | 第76-79页 |
| ·肿瘤组织内GOLPH2 的表达以及相应血清检测 | 第79-82页 |
| ·Huh7 裸鼠模型血清中GOLPH2 的含量随着时间和肿瘤的增大的变化关系 | 第82-84页 |
| ·讨论 | 第84-87页 |
| 第4章 结论 | 第87-88页 |
| ·细胞水平检测及 HepG2 和 Huh7 腹水制备 | 第87页 |
| ·HepG2 和 Huh7 裸鼠瘤形态及显微结构 | 第87页 |
| ·肿瘤组织内 GOLPH2 的表达以及相应血清检测 | 第87页 |
| ·Huh7 裸鼠模型血清中 GOLPH2 量随着时间和肿瘤的增大的变化关系 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 附录 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 攻读硕士学位期间取得的与学位论文相关的成果 | 第96页 |
