| 本研究由以下课题资助 | 第1-3页 |
| 英文缩略语 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-29页 |
| 1 生物技术在苜蓿育种工作中的研究进展 | 第12-18页 |
| ·生物技术在育种中的作用 | 第12-14页 |
| ·改良品质 | 第12页 |
| ·抗逆性 | 第12-13页 |
| ·转抗除草剂基因苜蓿的研究 | 第13页 |
| ·转抗病毒基因苜蓿的研究 | 第13-14页 |
| ·抗虫性转基因苜蓿的研究 | 第14页 |
| ·紫花苜蓿基因转化受体系统研究进展 | 第14-15页 |
| ·原生质体受体系统 | 第14页 |
| ·愈伤组织受体系统 | 第14-15页 |
| ·直接分化受体系统 | 第15页 |
| ·胚状体再生受体系统 | 第15页 |
| ·苜蓿基因转化方法 | 第15-17页 |
| ·电击法介导的DNA 直接转移导入原生质体 | 第15-16页 |
| ·显微注射法 | 第16页 |
| ·基因枪转化法 | 第16页 |
| ·农杆菌介导法 | 第16-17页 |
| ·发展转基因苜蓿的限制因素 | 第17页 |
| ·基因发现和描述比例 | 第17页 |
| ·基因沉默现象 | 第17页 |
| ·生物安全问题 | 第17页 |
| ·知识产权问题 | 第17页 |
| ·转基因苜蓿的发展趋势和应用前景 | 第17-18页 |
| 2 绿色荧光蛋白（GFP）研究进展及应用 | 第18-24页 |
| ·GFP 的研究进展及特性 | 第18-20页 |
| ·GFP 的研究进展 | 第18-19页 |
| ·GFP 的理化性质 | 第19页 |
| ·GFP 的发光机理 | 第19-20页 |
| ·GFP 的荧光性质及应用优点 | 第20-21页 |
| ·GFP 在植物研究中的应用 | 第21-23页 |
| ·GFP 作为报告基因用于转基因工作 | 第21页 |
| ·GFP 作为报告蛋白用于基因表达的调控效果研究 | 第21-22页 |
| ·GFP 在基因产物及基因定位研究中的应用 | 第22页 |
| ·GFP 用于研究植物与微生物的关系 | 第22-23页 |
| ·GFP 用于完整植株的信号传导研究 | 第23页 |
| ·GFP 的荧光检测 | 第23页 |
| ·GFP 应用中的注意事项 | 第23-24页 |
| 3 溶菌酶研究进展 | 第24-27页 |
| ·溶菌酶性质及抗菌机制 | 第24-25页 |
| ·溶菌酶性质 | 第24-25页 |
| ·溶菌酶的抗菌作用机制 | 第25页 |
| ·溶菌酶种类 | 第25-26页 |
| ·动物溶菌酶 | 第25页 |
| ·植物溶菌酶 | 第25页 |
| ·微生物溶菌酶 | 第25-26页 |
| ·溶菌酶在应用过程中的优点 | 第26页 |
| ·溶菌酶的应用 | 第26-27页 |
| ·溶菌酶在食品工业上的应用 | 第26-27页 |
| ·溶菌酶在医学上的应用 | 第27页 |
| ·溶菌酶在生物工程中的应用 | 第27页 |
| 4 研究目的与意义 | 第27-29页 |
| 第二章 不同品种苜蓿再生体系的建立 | 第29-40页 |
| 1 材料和方法 | 第29-32页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-32页 |
| ·无菌苗的获得 | 第29页 |
| ·苜蓿愈伤组织的诱导 | 第29-31页 |
| ·苜蓿愈伤组织的分化 | 第31页 |
| ·生根培养 | 第31页 |
| ·再生苗移栽 | 第31-32页 |
| ·统计方法 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-38页 |
| ·苜蓿愈伤组织的诱导 | 第32-35页 |
| ·不同部位的外植体诱导 | 第32-33页 |
| ·不同浓度的2，4-D 对诱导愈伤的影响 | 第33页 |
| ·不同浓度6-BA 对诱导愈伤的影响 | 第33-34页 |
| ·不同浓度KT、NAA 组合对诱导愈伤的影响 | 第34-35页 |
| ·苜蓿愈伤组织的分化 | 第35-37页 |
| ·愈伤组织诱导时间对分化的影响 | 第35-36页 |
| ·不同浓度KT 和NAA 组合对分化的影响 | 第36-37页 |
| ·诱导生根 | 第37-38页 |
| ·再生苗移栽 | 第38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| ·苜蓿再生外植体的选择 | 第38页 |
| ·褐化现象 | 第38-39页 |
| ·激素浓度对苜蓿再生的影响 | 第39页 |
| 4 小结 | 第39-40页 |
| 第三章 PBI121-Lyz-GFP 双元基因对苜蓿的遗传转化 | 第40-55页 |
| 1 材料和方法 | 第40-46页 |
| ·试验材料 | 第40页 |
| ·试剂与培养基 | 第40-41页 |
| ·培养基 | 第40-41页 |
| ·抗生素 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-46页 |
| ·农杆菌的活化与保存 | 第41页 |
| ·菌液的制备 | 第41页 |
| ·无菌苗的获得 | 第41-42页 |
| ·外植体的获得 | 第42页 |
| ·侵染 | 第42页 |
| ·农杆菌介导转化体系的建立 | 第42-43页 |
| ·转基因苜蓿的鉴定 | 第43-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-52页 |
| ·农杆菌介导转化体系的建立 | 第46-49页 |
| ·卡那霉素对“甘农1 号”杂花苜蓿和“甘农3 号”紫花苜蓿愈伤组织诱导和生长的影响 | 第46-47页 |
| ·抗生素的抑菌效果及其对苜蓿愈伤组织诱导和生长的影响 | 第47页 |
| ·预培养时间对苜蓿愈伤组织诱导的影响 | 第47-48页 |
| ·侵染时间和方式对苜蓿愈伤组织诱导的影响 | 第48页 |
| ·菌液浓度对转化效率的影响 | 第48-49页 |
| ·转基因苜蓿的鉴定 | 第49-51页 |
| ·愈伤组织的荧光检测 | 第49-50页 |
| ·胚性愈伤组织PCR 检测 | 第50页 |
| ·转基因苜蓿植株的荧光检测 | 第50-51页 |
| ·不同发育时期苜蓿转化组织中的GFP 基因荧光表达量分析 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| ·预培养对农杆菌介导转化率的影响 | 第52页 |
| ·农杆菌介导的基因转化中适宜条件的确立 | 第52-53页 |
| ·筛选方式对转化率的影响 | 第53页 |
| ·荧光蛋白基因在基因表达检测中具有突出的优点 | 第53页 |
| ·处于不同生长时期的苜蓿转化组织荧光表达量的差异 | 第53-54页 |
| 4 小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61-62页 |
| 导师简介 | 第62-63页 |
