中文摘要 | 第1-14页 |
英文摘要 | 第14-16页 |
1 引言 | 第16-30页 |
·胚胎着床研究概况 | 第16-18页 |
·胚胎着床的必要条件 | 第16-17页 |
·胚胎着床过程中的类固醇激素 | 第17-18页 |
·细胞粘附分子 | 第18-21页 |
·细胞粘附分子的分类 | 第18-19页 |
·细胞粘附分子与胚胎着床 | 第19-21页 |
·JAM 家族的成员、结构特征、表达及定位 | 第21-23页 |
·JAM 家族成员 | 第21-22页 |
·JAMs 的结构特征 | 第22页 |
·JAMs 的表达及定位 | 第22-23页 |
·JAM 蛋白的作用方式 | 第23-24页 |
·同亲性相互作用 | 第23页 |
·异亲性相互作用 | 第23-24页 |
·JAM 家族成员的功能 | 第24-27页 |
·细胞连接的装配和稳定 | 第24-25页 |
·JAM 家族成员在炎症反应中的作用 | 第25-26页 |
·JAM 家族成员与血小板激活 | 第26-27页 |
·JAM 家族成员与血管发生 | 第27页 |
·JAM 家族成员与哺乳动物生殖 | 第27-28页 |
·JAMs 与雄性生殖 | 第27页 |
·JAMs 与雌性生殖 | 第27-28页 |
·胚胎着床与炎症反应中白细胞渗出的相似性 | 第28-29页 |
·本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-48页 |
·实验动物 | 第30页 |
·实验动物模型 | 第30-32页 |
·早期妊娠模型 | 第30页 |
·假孕模型 | 第30页 |
·延迟着床与延迟着床激活模型 | 第30-31页 |
·类固醇激素处理模型 | 第31页 |
·小鼠子宫内膜腔上皮的分离 | 第31-32页 |
·原位杂交探针的制备 | 第32-36页 |
·探针引物设计及合成 | 第32页 |
·提取总RNA | 第32-33页 |
·消化残留的DNA | 第33页 |
·反转录 | 第33页 |
·PCR 反应 | 第33-34页 |
·扩增产物的回收及载体连接 | 第34页 |
·感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
·重组质粒的转化、测序及方向鉴定 | 第35页 |
·cRNA 片段的体外转录和地高辛标记 | 第35-36页 |
·原位杂交 | 第36-38页 |
·载玻片的处理 | 第36页 |
·冰冻切片方法 | 第36页 |
·试剂及溶液的配制 | 第36-37页 |
·原位杂交流程 | 第37-38页 |
·免疫组织化学 | 第38页 |
·冰冻切片的制备 | 第38页 |
·免疫组织化学流程 | 第38页 |
·Real-time PCR | 第38-40页 |
·总RNA 的提取 | 第38-39页 |
·引物序列 | 第39-40页 |
·Real-time PCR | 第40页 |
·体外培养子宫内膜腔上皮的处理 | 第40-41页 |
·LIF 处理 | 第40-41页 |
·Stat3 磷酸化抑制剂处理 | 第41页 |
·孕酮处理 | 第41页 |
·真核过表达载体的构建 | 第41-42页 |
·Msx1 真核表达载体系统的构建 | 第41-42页 |
·持续激活的c-Stat3 Flag cRC/CMV 载体 | 第42页 |
·电穿孔实验 | 第42-43页 |
·Western Blot | 第43-46页 |
·样品的提取 | 第43页 |
·SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第43-44页 |
·免疫印记及显影 | 第44页 |
·相关药品和溶液的制备 | 第44-46页 |
·胚胎黏附实验 | 第46-48页 |
·r-mJam2 重组蛋白的包被 | 第46页 |
·孵化囊胚的获取 | 第46页 |
·黏附实验及结果的判定 | 第46页 |
·可溶性重组蛋白对胚胎黏附的影响 | 第46-47页 |
·相关溶液的配制 | 第47-48页 |
·在早期妊娠小鼠子宫角内注射抗体 | 第48页 |
3 实验结果 | 第48-65页 |
·Jam2 在小鼠早期妊娠子宫中的表达 | 第48-51页 |
·Jam2 在小鼠早期妊娠子宫中的定位表达 | 第48-49页 |
·Jam2 在小鼠早期妊娠子宫中的定量表达 | 第49-50页 |
·Jam2 在假孕小鼠子宫中的表达 | 第50页 |
·Jam2 在小鼠子宫延迟着床和延迟着床激活模型中的表达 | 第50-51页 |
·Jam2 在激素处理模型中的表达 | 第51页 |
·孕酮对小鼠子宫中Jam2 表达的影响 | 第51-55页 |
·孕酮对卵巢切除小鼠子宫中Jam2 表达的影响 | 第51-52页 |
·孕酮对体外培养的子宫内膜腔上皮中Jam2 表达的影响 | 第52-53页 |
·RU486 影响外源性孕酮诱导的Jam2 上调 | 第53-54页 |
·RU486 影响内源性孕酮诱导的Jam2 上调 | 第54-55页 |
·转录因子Msx1 对小鼠子宫腔上皮中Jam2 表达的影响 | 第55-57页 |
·雌激素对小鼠子宫中Jam2 表达的影响 | 第57-58页 |
·LIF 及Stat3 对小鼠子宫腔上皮中Jam2 表达的影响 | 第58-60页 |
·LIF 对小鼠子宫腔上皮中Jam2 表达的影响 | 第58页 |
·Stat3 磷酸化抑制剂对小鼠子宫腔上皮中Jam2 表达的影响 | 第58-60页 |
·Stat3 持续激活对小鼠子宫腔上皮中Jam2 表达的影响 | 第60页 |
·Jam2 对小鼠孵化囊胚粘附的影响 | 第60-61页 |
·子宫角注射Jam2 抗体对胚胎着床的影响 | 第61-62页 |
·着床前胚胎中Jam2 mRNA 的表达 | 第62-63页 |
·其他JAM 家族及其相关分子mRNA 以及CD31 的表达 | 第63-65页 |
·Jam1 的表达 | 第63页 |
·Jam3 的表达 | 第63页 |
·Jam4 的表达 | 第63页 |
·Esam 的表达 | 第63页 |
·Cxadr 的表达 | 第63-64页 |
·内皮细胞标志分子CD31 的表达 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-73页 |
·孕酮及其下游通路诱导Jam2 的表达 | 第65-66页 |
·Jam2 表达受到孕酮的诱导 | 第65-66页 |
·转录因子Msx1 介导孕酮对于Jam2 的诱导 | 第66页 |
·雌激素及下游通路调节Jam2 的表达 | 第66-68页 |
·LIF 促进小鼠子宫腔上皮组织中Jam2 的表达 | 第66-67页 |
·Stat3 磷酸化促进小鼠子宫腔上皮组织中Jam2 的表达 | 第67-68页 |
·Jam2 与胚胎的定位与粘附 | 第68-70页 |
·Jam2 促进胚胎黏附到子宫内膜腔上皮上 | 第68-69页 |
·Jam2 促进胚胎黏附的可能机制 | 第69-70页 |
·其他 JAM 家族成员与小鼠早期妊娠 | 第70-73页 |
·JAM 家族成员与母体子宫-胚胎之间的免疫屏障 | 第70-71页 |
·JAM 家族成员在小鼠早期妊娠子宫中的血管内皮中的作用 | 第71-73页 |
5 结论 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-86页 |
图版 | 第86-96页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第96页 |