| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·流感病毒的一般特征 | 第10-11页 |
| ·流感病毒的基因组结构 | 第11页 |
| ·病毒的流行特点和流感的临床特征 | 第11-12页 |
| ·流感病毒NP蛋白研究进展 | 第12-14页 |
| ·流感诊断方法研究进展 | 第14-21页 |
| ·传统的流感病毒检测方法 | 第14-18页 |
| ·分子生物学检测 | 第18-21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-45页 |
| ·材料 | 第22-25页 |
| ·受体菌株和载体 | 第22页 |
| ·工具酶及分子量参照物 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器与设备 | 第23页 |
| ·实验所用溶液及其配制 | 第23-25页 |
| ·动物免疫试剂及材料 | 第25页 |
| ·酶联免疫检测(ELISA)试剂 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-45页 |
| ·A型流感重组质粒构建 | 第25-32页 |
| ·NP蛋白的原核表达、纯化及鉴定 | 第32-37页 |
| ·羊抗流感NP多克隆抗体制备及纯化 | 第37-40页 |
| ·兔抗流感NP多克隆抗体制备及纯化 | 第40-41页 |
| ·A型流感双抗体夹心检测方法初步确立 | 第41-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-58页 |
| ·A型流感NP基因扩增结果 | 第45页 |
| ·重组质粒菌落PCR鉴定结果 | 第45-46页 |
| ·重组质粒酶切鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·NP蛋白原核表达电泳鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·NP纯化后电泳鉴定结果 | 第48页 |
| ·NP蛋白反应原性及免疫原性鉴定结果 | 第48-51页 |
| ·NP蛋白反应原性鉴定结果-ELISA法 | 第48-49页 |
| ·NP蛋白反应原性鉴定结果-Western Blot法 | 第49-50页 |
| ·NP蛋白免疫原性鉴定-免疫小鼠后抗血清效价分析 | 第50页 |
| ·NP蛋白免疫原性鉴定-琼脂免疫双向扩散结果 | 第50-51页 |
| ·间接ELISA检测中酶标二抗工作浓度确定 | 第51-52页 |
| ·间接ELISA检测中NP蛋白包被工作浓度确定 | 第52页 |
| ·羊抗NP、兔抗NP血清效价测定结果 | 第52-53页 |
| ·羊抗NP、兔抗NP血清纯化结果 | 第53-54页 |
| ·双抗体夹心法检测中酶标抗体工作浓度的确定 | 第54-55页 |
| ·双抗体夹心法检测中包被工作浓度确定及包被抗体优化结果 | 第55-56页 |
| ·双抗体夹心法检测结果 | 第56页 |
| ·特异性交叉反应结果 | 第56-57页 |
| ·灵敏度测定结果 | 第57-58页 |
| 第四章 讨论 | 第58-61页 |
| ·A型流感核蛋白研究的重要作用 | 第58页 |
| ·载体和表达系统的选择 | 第58-59页 |
| ·免疫方法的影响 | 第59-60页 |
| ·A型流感双抗体夹心检测方法的应用价值 | 第60-61页 |
| 第五章 结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附录 | 第70-72页 |
| 在学期间发表的学位论文 | 第72页 |