| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一章 灰葡萄孢菌及真菌病毒的研究进展 | 第15-41页 |
| 1. 灰葡萄孢菌的经济重要性 | 第15-16页 |
| 2. 灰葡萄孢菌的分类属性 | 第16页 |
| 3. 灰葡萄孢菌的生物学特性 | 第16-17页 |
| 4. 灰霉病的病害循环 | 第17-18页 |
| 5. 灰葡萄孢菌的侵染过程 | 第18-19页 |
| 6. 灰葡萄孢菌的致病因子 | 第19-29页 |
| ·侵染结构 | 第19-23页 |
| ·毒性代谢物 | 第23-25页 |
| ·细胞壁降解酶 | 第25-27页 |
| ·信号传导途径 | 第27-28页 |
| ·植物激素 | 第28-29页 |
| 7. 灰霉病的防治 | 第29-30页 |
| ·选用抗(耐)病品种 | 第29页 |
| ·化学防治 | 第29页 |
| ·农业防治 | 第29-30页 |
| ·生物防治 | 第30页 |
| 8. 灰葡萄孢菌的抗药性研究 | 第30-35页 |
| ·对苯并咪唑类杀菌剂的抗性 | 第31页 |
| ·对二甲酰亚胺类杀菌剂的抗性 | 第31-32页 |
| ·对N-苯氨基甲酸酯类杀菌剂的抗性 | 第32-33页 |
| ·对酰胺类杀菌剂的抗性 | 第33页 |
| ·苯胺基嘧啶类杀菌剂的抗性 | 第33-35页 |
| 9. 灰葡萄孢菌真菌病毒研究 | 第35-39页 |
| ·真菌病毒分类 | 第35页 |
| ·真菌病毒的传播 | 第35-36页 |
| ·植物病原真菌弱毒现象 | 第36-37页 |
| ·真菌病毒引起的弱毒现象 | 第37-38页 |
| ·研究真菌弱毒现象的意义 | 第38-39页 |
| 10. 研究目的和意义 | 第39-41页 |
| 第二章 灰葡萄菌菌株CanBc-1的生物学特性 | 第41-62页 |
| 1. 材料与方法 | 第41-50页 |
| ·供试菌株 | 第41页 |
| ·供试植物 | 第41-42页 |
| ·培养基 | 第42页 |
| ·缓冲液 | 第42-43页 |
| ·仪器设备 | 第43页 |
| ·病原菌的分离纯化 | 第43页 |
| ·病原菌的鉴定 | 第43页 |
| ·灰葡萄孢菌的病原形态观察 | 第43页 |
| ·灰葡萄孢菌菌丝生长速率测定 | 第43页 |
| ·灰葡萄孢菌致病力测定 | 第43-44页 |
| ·菌株CanBc-1的单孢分离后代致病力测定 | 第44页 |
| ·菌株CanBc-1分生孢子悬浮液的配制 | 第44页 |
| ·单分生孢子后代的分离 | 第44页 |
| ·单分生孢子后代致病力的测定 | 第44页 |
| ·双链RNA(dsRNA)的提取 | 第44页 |
| ·双链RNA(dsRNA)的鉴定和检测 | 第44-46页 |
| ·灰葡萄孢菌对不同杀菌剂抗性测定 | 第46-47页 |
| ·对苯并咪唑类杀菌剂的抗性测定 | 第46页 |
| ·对二甲酰亚胺类杀菌剂的抗性测定 | 第46-47页 |
| ·对酰胺类杀菌剂的抗性测定 | 第47页 |
| ·对吡咯类杀菌剂的抗性测定 | 第47页 |
| ·灰葡萄孢菌对不同类型杀菌剂抗性的分子机制研究 | 第47-50页 |
| ·灰葡萄孢菌的DNA提取 | 第47页 |
| ·β-微管蛋白和组氨酸激酶基因片段PCR扩增 | 第47-48页 |
| ·PCR扩增目标片段的回收与纯化 | 第48页 |
| ·PCR扩增目标片段与克隆载体连接 | 第48页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞转化连接产物 | 第48-49页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第49-50页 |
| ·目标片段的测序和序列分析 | 第50页 |
| ·数据统计方法 | 第50页 |
| 2. 结果与分析 | 第50-60页 |
| ·菌株CanBc-1培养特性 | 第50-51页 |
| ·灰葡萄孢菌致病力比较 | 第51-53页 |
| ·菌株CanBc-1单分生孢子后代致病力比较 | 第53-54页 |
| ·灰葡萄孢菌dsRNA分析 | 第54页 |
| ·灰葡萄孢菌的抗药性分析 | 第54-60页 |
| ·对杀菌剂多菌灵的抗性 | 第55-56页 |
| ·对二甲酰亚胺类杀菌剂的抗性 | 第56-57页 |
| ·对其它类型杀菌剂的抗性 | 第57-60页 |
| 3. 讨论 | 第60-62页 |
| 第三章 弱毒菌株CanBc-1中dsRNA的属性鉴定 | 第62-76页 |
| 1 材料与方法 | 第62-68页 |
| ·供试菌株 | 第62-63页 |
| ·培养基 | 第63页 |
| ·缓冲液 | 第63页 |
| ·仪器设备 | 第63页 |
| ·双链RNA(dsRNA)的提取 | 第63页 |
| ·dsRNA样品的纯化 | 第63页 |
| ·BcDRV基因组全长cDNA的克隆策略 | 第63-64页 |
| ·RT-PCR克隆 | 第64-65页 |
| ·dsRNA末端序列克隆 | 第65-67页 |
| ·目的片段的回收及纯化 | 第67页 |
| ·PCR扩增目标片段与克隆载体连接 | 第67页 |
| ·连接产物的转化与重组质粒的鉴定 | 第67页 |
| ·dsRNA基因组序列的拼接和分析 | 第67页 |
| ·菌丝超微结构观察 | 第67-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-75页 |
| ·RT-PCR克隆 | 第68页 |
| ·dsRNA末端序列的克隆 | 第68-69页 |
| ·基因组全长序列的拼接与分析 | 第69-70页 |
| ·菌丝超微结构观察 | 第70-75页 |
| 3 讨论 | 第75-76页 |
| 第四章 灰葡萄孢菌菌株CanBc-1致病力衰退机理研究 | 第76-108页 |
| 1 材料与方法 | 第76-89页 |
| ·供试菌株 | 第76页 |
| ·供试植物 | 第76页 |
| ·培养基 | 第76-77页 |
| ·其他试剂 | 第77页 |
| ·仪器设备 | 第77-78页 |
| ·灰葡萄孢菌侵染结构的显微观察 | 第78-79页 |
| ·灰葡萄孢菌病斑分离物的生长速度、致病力及dsRNA检测 | 第79页 |
| ·灰葡萄孢菌产生果胶酶的测定 | 第79-82页 |
| ·灰葡萄孢菌植物毒性代谢产物的生物活性测定 | 第82-83页 |
| ·灰葡萄孢菌产生酸类物质的测定 | 第83-85页 |
| ·灰葡萄孢菌产生漆酶的测定 | 第85-86页 |
| ·灰葡萄孢菌RNA的提取 | 第86-87页 |
| ·RNA提取物中DNA污染物的处理 | 第87页 |
| ·RT-PCR检测致病相关基因的表达 | 第87-88页 |
| ·数据统计方法 | 第88-89页 |
| 2 结果与分析 | 第89-104页 |
| ·灰葡萄孢菌侵染结构的显微观察 | 第89-94页 |
| ·灰葡萄孢菌病斑分离物的生长速度、致病力和dsRNA检测 | 第94-95页 |
| ·灰葡萄孢菌产生果胶酶的测定 | 第95-98页 |
| ·灰葡萄孢菌植物毒性代谢产物的生物活性测定 | 第98-99页 |
| ·灰葡萄孢菌产生酸类物质的测定 | 第99-102页 |
| ·灰葡萄孢菌产生漆酶的测定 | 第102-104页 |
| 3 讨论 | 第104-108页 |
| 第五章 BcDRV感染灰葡萄孢菌引起的基因表达差异分析 | 第108-126页 |
| 1 材料与方法 | 第108-112页 |
| ·供试菌株 | 第108-109页 |
| ·供试植物 | 第109页 |
| ·培养基 | 第109页 |
| ·仪器设备 | 第109页 |
| ·菌株CanBc-1c-66培养特性和致病力测定 | 第109页 |
| ·灰葡萄孢菌RNA的提取 | 第109页 |
| ·从RNA提取物中除去DNA | 第109页 |
| ·差异表达的基因克隆和筛选 | 第109-110页 |
| ·差异表达基因的功能分类 | 第110-112页 |
| ·RT-PCR验证部分基因的差异表达 | 第112页 |
| 2 结果与分析 | 第112-123页 |
| ·菌株CanBc-1c-66培养特性及致病力 | 第112-113页 |
| ·灰葡萄孢菌RNA的提取及质量检测 | 第113-114页 |
| ·测序评估 | 第114-118页 |
| ·测序质量评估 | 第114-115页 |
| ·测序饱和度分析 | 第115-116页 |
| ·去杂质标签(clean Tag)拷贝数分布 | 第116-117页 |
| ·参考标签的统计分析 | 第117-118页 |
| ·差异表达基因的筛选 | 第118-119页 |
| ·差异菌株CanBc-1中差异表达基因的功能分类 | 第119-120页 |
| ·与灰葡萄孢菌和其它病原菌致病过程相关的差异表达的基因 | 第120页 |
| ·RT-PCR验证差异表达基因的表达 | 第120-123页 |
| 3 讨论 | 第123-126页 |
| 第六章 结论与展望 | 第126-129页 |
| 参考文献 | 第129-150页 |
| 致谢 | 第150-151页 |
