摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1 前言 | 第9-17页 |
1.1 转录因子在植物响应非生物逆境胁迫中的作用 | 第9-13页 |
1.1.1 低温胁迫 | 第9-11页 |
1.1.2 干旱胁迫 | 第11页 |
1.1.3 高盐胁迫 | 第11-12页 |
1.1.4 氧化肋迫 | 第12-13页 |
1.2 植物MYB转录因子的研究进展 | 第13-15页 |
1.2.1 植物MYB转录因子的特征和分类 | 第13-14页 |
1.2.2 MYB转录因子与非生物逆境胁迫 | 第14-15页 |
1.3 梅花MYB转录因子 | 第15-16页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-24页 |
2.1 实验材料 | 第17-18页 |
2.1.1 植物材料 | 第17页 |
2.1.2 菌种、载体、培养基以及各种生化试剂 | 第17-18页 |
2.2 低温胁迫下PmMYBs的表达分析 | 第18-19页 |
2.2.1 低温处理以及采样时间 | 第18页 |
2.2.3 RNA提取和反转录 | 第18页 |
2.2.4 实时荧光定量qRT-PCR | 第18-19页 |
2.3 目的基因克隆和超量表达载体构建 | 第19-20页 |
2.3.1 目的基因序列比对 | 第19页 |
2.3.2 CDS序列克隆 | 第19页 |
2.3.3 超量表达载体的构建 | 第19-20页 |
2.4 拟南芥遗传转化及纯合植株筛选 | 第20-22页 |
2.4.1 拟南芥侵染 | 第20-21页 |
2.4.2 转基因拟南芥阳性苗筛选 | 第21页 |
2.4.3 转基因拟南芥目的基因相对表达量检测 | 第21-22页 |
2.4.4 纯合株系的筛选 | 第22页 |
2.5 拟南芥转化植株非生物逆境胁迫分析 | 第22-23页 |
2.5.1 低温胁迫处理和电导率测定 | 第22-23页 |
2.5.2 NaCl胁迫处理种子萌发率测定 | 第23页 |
2.5.3 甘露醇胁迫种子萌发率测定 | 第23页 |
2.5.4 MV胁迫种子萌发率测定 | 第23页 |
2.6 数据处理 | 第23-24页 |
3 结果与分析 | 第24-36页 |
3.1 梅花MYB转录因子在低温胁迫下的表达分析 | 第24-27页 |
3.1.1 ‘雪梅’32个MYB转录因子在低温胁迫下的表达分析 | 第24-25页 |
3.1.2 不同梅花品种MYB转录因子在低温胁迫下的表达 | 第25-27页 |
3.2 目的基因的克隆和超量表达载体构建 | 第27-29页 |
3.2.1 目的基因的筛选 | 第27页 |
3.2.2 CDS序列克隆和分析比对 | 第27页 |
3.2.3 超量表达载体的构建 | 第27-29页 |
3.3 拟南芥遗传转化及纯合植株筛选 | 第29-31页 |
3.3.1 转基因拟南芥植株的筛选及检测 | 第29页 |
3.3.2 转基因拟南芥植株表达量检测 | 第29页 |
3.3.3 纯合株系的筛选 | 第29-31页 |
3.4 拟南芥转化植株非生物逆境胁迫分析 | 第31-36页 |
3.4.1 低温胁迫 | 第31-32页 |
3.4.2 NaCl胁迫 | 第32页 |
3.4.3 甘露醇胁迫 | 第32-34页 |
3.4.4 MV胁迫 | 第34-36页 |
4 讨论 | 第36-39页 |
4.1 梅花MYB转录因子在低温胁迫下的表达分析 | 第36页 |
4.2 拟南芥转化植株非生物逆境胁迫分析 | 第36-38页 |
4.2.1 低温抗性分析 | 第36-37页 |
4.2.2 其他非生物逆境胁迫抗性分析 | 第37-38页 |
4.3 问题与不足 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-46页 |
附录 | 第46-51页 |
致谢 | 第51页 |