| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语 | 第9-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-23页 |
| 1 引言 | 第16-20页 |
| 1.1 卵巢癌 | 第16-17页 |
| 1.2 FSTL1 | 第17-18页 |
| 1.2.1 FSTL1的生物学特征 | 第17页 |
| 1.2.2 FSTL1在相关肿瘤中的研究 | 第17-18页 |
| 1.2.3 FSTL1参与的肿瘤信号通路 | 第18页 |
| 1.3 Notch3信号通路及其在肿瘤细胞中的研究 | 第18-19页 |
| 1.4 上皮间质转化(EMT)及其相关研究 | 第19-20页 |
| 1.5 瘤干细胞(CSCs)及其相关研究 | 第20页 |
| 2 前期研究结果 | 第20-21页 |
| 3 研究目的和意义 | 第21页 |
| 4 实验内容及设计方案 | 第21-23页 |
| 4.1 实验内容 | 第21-22页 |
| 4.2 实验方案 | 第22-23页 |
| 第二章 甲状旁腺激素上调卵巢癌细胞中FSTL1的表达 | 第23-32页 |
| 1 实验材料与方法 | 第23-28页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第23-24页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第23-24页 |
| 1.2 实验仪器 | 第24-25页 |
| 1.3 主要溶液配制 | 第25-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-30页 |
| 2.1 细胞复苏与传代 | 第28页 |
| 2.1.1 细胞复苏 | 第28页 |
| 2.1.2 细胞传代 | 第28页 |
| 2.2 细胞分盘 | 第28页 |
| 2.3 药物给予实验 | 第28-29页 |
| 2.4 细胞裂解液的制备 | 第29页 |
| 2.5 蛋白浓度测定及样品制备 | 第29页 |
| 2.6 Westernblot | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-31页 |
| 3.1 PTH上调卵巢癌细胞中FSTL1的表达 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 FSTL1调控卵巢癌细胞EMT过程 | 第32-49页 |
| 1 实验材料 | 第32-34页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第32-33页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第32页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第32-33页 |
| 1.2 主要溶液配制 | 第33-34页 |
| 1.3 主要仪器 | 第34页 |
| 2 实验方法 | 第34-37页 |
| 2.1 .质粒转化 | 第34页 |
| 2.2 提取质粒 | 第34-35页 |
| 2.3 慢病毒包装 | 第35页 |
| 2.3.1 质粒扩增 | 第35页 |
| 2.3.2 培养、分盘293T细胞 | 第35页 |
| 2.3.3 脂质体转染 | 第35页 |
| 2.3.4 病毒收集 | 第35页 |
| 2.3.5 感染目的细胞 | 第35页 |
| 2.4 细胞伤口愈合实验(Cellwoundhealing) | 第35-36页 |
| 2.5 细胞侵袭实验(Cellinvasionassays) | 第36页 |
| 2.6 克隆形成实验(ColonyFormationAssays) | 第36-37页 |
| 2.7 细胞活力实验(Cellviability) | 第37页 |
| 2.8 细胞瞬时转染 | 第37页 |
| 3 统计学分析 | 第37-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-47页 |
| 4.1 过表达FSTL1增强卵巢癌细胞转录因子的表达 | 第38-39页 |
| 4.2 过表达FSTL1增强卵巢癌细胞EMT过程 | 第39页 |
| 4.3 过表达FSTL1促进卵巢癌细胞伤口愈合 | 第39-41页 |
| 4.4 过表达FSTL1促进卵巢癌细胞侵袭 | 第41-42页 |
| 4.5 过表达FSTL1促进卵巢癌细胞平板克隆的形成 | 第42页 |
| 4.6 过表达FSTL1增强卵巢癌细胞增殖能力 | 第42-43页 |
| 4.7 加入重组蛋白rhFSTL1增强卵巢癌细胞EMT | 第43-45页 |
| 4.8 加入重组蛋白rhFSTL1促进卵巢癌细胞增殖 | 第45-46页 |
| 4.9 敲低FSTL1的表达会抑制卵巢癌细胞EMT过程 | 第46-47页 |
| 4.10 敲低FSTL1的表达会抑制卵巢癌细胞增殖 | 第47页 |
| 5 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 FSTL1调控卵巢癌细胞干细胞干性 | 第49-55页 |
| 1 实验材料 | 第49页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第49页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第49页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第49页 |
| 1.2 实验仪器 | 第49页 |
| 2 实验方法 | 第49-50页 |
| 2.1 细胞培养与传代 | 第49页 |
| 2.2 细胞瞬时转染 | 第49页 |
| 2.3 细胞裂解液制备 | 第49-50页 |
| 2.4 蛋白浓度测定 | 第50页 |
| 2.5 Westernblot | 第50页 |
| 2.6 微球形成实验 | 第50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-54页 |
| 3.1 过表达FSTL1增强卵巢癌细胞干细胞干性 | 第50-51页 |
| 3.2 重组蛋白rhFSTL1增强卵巢癌细胞干细胞干性 | 第51-52页 |
| 3.3 敲低FSTL1的表达抑制卵巢癌细胞干细胞干性 | 第52页 |
| 3.4 微球形成实验 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 第五章 Notch3信号通路介导FSTL1调控卵巢癌细胞EMT和干细胞干性 | 第55-65页 |
| 1 实验材料 | 第55页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第55页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第55页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第55页 |
| 1.2 实验仪器 | 第55页 |
| 2 实验方法 | 第55-56页 |
| 2.1 细胞培养与传代 | 第55页 |
| 2.2 蛋白质提取 | 第55页 |
| 2.3 蛋白质浓度测定与定量 | 第55-56页 |
| 2.4 Westernblot | 第56页 |
| 2.5 克隆形成实验 | 第56页 |
| 2.6 细胞活力实验 | 第56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-63页 |
| 3.1 Notch3信号介导FSTL1的表达 | 第56-57页 |
| 3.2 敲低Notch3会抑制卵巢癌细胞中FSTL1的表达 | 第57-58页 |
| 3.3 敲低Notch3表达抑制卵巢癌EMT和干细胞干性 | 第58-61页 |
| 3.4 敲低Notch3表达抑制卵巢癌细胞的克隆形成 | 第61页 |
| 3.5 敲低Notch3表达抑制卵巢癌细胞的增殖能力 | 第61-62页 |
| 3.6 重组蛋白rhFSTL1对低表达Notch3卵巢癌细胞的影响 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 第六章 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 硕士期间获奖情况 | 第74-75页 |
| 硕士期间发表论文 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
