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致病性大肠杆菌菌壳的研究

提要第1-9页
第1章 绪论第9-42页
   ·致病性大肠杆菌研究进展第9-26页
     ·致病机理第9-20页
     ·流行病学第20-22页
     ·临床特征第22-23页
     ·检测与诊断第23-26页
   ·菌壳疫苗研究进展第26-33页
     ·基因E 的表达调控第27-28页
     ·菌壳的结构第28页
     ·菌壳的制备第28-29页
     ·菌壳疫苗的实验研究第29-31页
     ·菌壳重组疫苗第31-32页
     ·菌壳的佐剂性质第32-33页
     ·展望第33页
   ·细菌基因组学和细菌致病机理第33-42页
     ·细菌基因组学研究进展第34-35页
     ·序列分析(Finds Hints in Sequences)第35-36页
     ·遗传学和基因组学第36页
     ·功能基因鉴定第36-40页
     ·比较基因组学(Comparative Genomics)第40页
     ·展望第40-42页
第2章 噬菌体裂解基因E 温控诱导表达质粒的构建和菌壳的制备第42-53页
   ·材料和方法第42-43页
     ·菌株与质粒第42-43页
     ·主要试剂第43页
     ·本研究使用的主要仪器第43页
   ·实验方法第43-47页
     ·本研究的技术路线第43-45页
     ·PhiX174 噬菌体裂解基因E 的PCR 扩增第45页
     ·PhiX174 噬菌体裂解基因E 的克隆与测序第45-46页
     ·热敏溶菌质粒pBV220::E 的构建第46页
     ·重组大肠杆菌DH5α(pBV220::E)溶菌动力学实验第46-47页
     ·溶菌质粒pBV220::E 对大肠杆菌DH5α的裂解率实验第47页
   ·结果第47-50页
     ·PhiX174 噬菌体裂解基因E 的PCR 扩增第47-48页
     ·PhiX174 噬菌体裂解基因E 的克隆与测序第48-49页
     ·热敏溶菌质粒pBV220::E 的鉴定第49页
     ·大肠杆菌DH5α(pBV220::E)溶解动力学实验第49-50页
     ·溶菌质粒pBV220::E 对大肠杆菌DH5α的裂解率效果第50页
   ·讨论第50-51页
   ·本章小结第51-53页
     ·PCR 扩增并克隆了PhiX174 噬菌体裂解基因E第51页
     ·构建了重组溶菌质粒pBV220::E第51-52页
     ·重组溶菌质粒pBV220::E 对大肠杆菌具有很强的溶菌裂解作用,裂解率可达99.76%第52-53页
第3章 裂解基因E和葡萄球菌核酸酶A双温控表达质粒的构建和大肠杆菌菌壳的制备第53-66页
   ·材料和方法第53-54页
     ·菌株与质粒第53页
     ·主要试剂和实验仪器第53-54页
   ·实验方法第54-59页
     ·本研究的技术路线第54-56页
     ·葡萄球菌核酸酶A 基因的PCR 扩增第56页
     ·温控调节盒CI-P 的PCR 扩增第56-57页
     ·重组片段CI-P-SNA 的PCR 扩增第57页
     ·重组片段CI-P-SNA 的克隆与测序第57-58页
     ·热敏溶菌质粒pBV220::E::CI-P-SNA 的构建第58页
     ·大肠杆菌DH5α(pBV220::E::CI-P-SNA)溶菌动力学实验第58-59页
     ·溶菌质粒pBV220::E::CI-P-SNA 对大肠杆菌DH5α的裂解率实验第59页
   ·结果第59-63页
     ·葡萄球菌核酸酶A 基因的PCR 扩增第59-60页
     ·温控调节片段CI-P 的PCR 扩增第60页
     ·重组片段CI-P-SNA 的PCR 扩增第60-61页
     ·重组片段CI-P-SNA 的克隆与测序第61页
     ·热敏溶菌质粒pBV220::E::CI-P-SNA 的鉴定第61-62页
     ·大肠杆菌DH5α(pBV220::E::CI-P-SNA)溶解动力学实验第62-63页
     ·溶菌质粒pBV220::E::CI-P-SNA 对大肠杆菌DH5α的裂解率第63页
   ·讨论第63-64页
   ·本章小结第64-66页
     ·PCR 扩增出了葡萄球菌核酸酶A 基因第64页
     ·PCR 扩增出了温控调节片段CI-P-SNA第64页
     ·构建了重组溶菌质粒pBV220::E::CI-P-SNA第64-65页
     ·重组溶菌质粒pBV220::E::CI-P-SNA 对大肠杆菌具有很强的溶菌裂解作用第65-66页
第4章 致病性大肠杆菌菌壳的制备研究第66-77页
   ·材料和方法第66-67页
     ·菌株与质粒第66-67页
     ·主要试剂和实验仪器第67页
   ·实验方法第67-70页
     ·致病性大肠杆菌EPEC E2348/69 的鉴定第67页
     ·致病性大肠杆菌EPEC E2348/69 电转化感受态细胞的制备第67-68页
     ·溶菌裂解质粒的电转化第68-69页
     ·电转化重组菌株的鉴定第69页
     ·重组菌株的溶菌裂解动力学比较实验第69页
     ·重组菌株的溶菌裂解效率比较实验第69-70页
     ·EPEC E2348/69 菌壳的电子显微镜形态学观察第70页
   ·结果第70-75页
     ·致病性大肠杆菌EPEC E2348/69 的鉴定第70-71页
     ·电转化重组菌株EPEC E2348/69(pBV220::E)的鉴定第71-72页
     ·电转化重组菌株EPEC E2348/69(pBV220::E::CI-P-SNA)的鉴定第72页
     ·重组菌株的溶菌裂解动力学比较实验第72-73页
     ·重组菌株的溶菌裂解效率比较实验第73页
     ·EPEC E2348/69 菌壳的电子显微镜形态学观察第73-75页
   ·讨论第75-76页
   ·本章小结第76-77页
第5章 致病性大肠杆菌菌壳的特性研究第77-85页
   ·材料和动物第77页
     ·菌株与质粒第77页
     ·实验动物第77页
   ·实验方法第77-80页
     ·不同渗透压溶液对EPEC 菌壳处理方法的研究第77-78页
     ·F158 和F159 菌壳对小鼠的毒性实验第78页
     ·致病性大肠杆菌EPEC E2348/69 对小鼠半数致死量(LD50)的测定第78-79页
     ·EPEC E2348/69 菌壳对小鼠的免疫保护性实验第79-80页
   ·结果第80-83页
     ·不同渗透压溶液对EPEC 菌壳处理方法的研究第80页
     ·F158 和F159 菌壳对小鼠的毒性实验第80-81页
     ·EPEC E2348/69 细菌平板计数第81页
     ·EPEC E2348/69 细菌对小鼠致死剂量的初步测定第81-82页
     ·致病性大肠杆菌EPEC E2348/69 对小鼠半数致死量(LD50)的测定第82页
     ·EPEC E2348/69 菌壳对小鼠的免疫保护性实验第82-83页
   ·讨论第83-84页
   ·本章小结第84-85页
第6章 结论第85-87页
参考文献第87-99页
攻读博士学位期间的研究成果第99-100页
致谢第100-101页
详细摘要第101-104页
Abstract第104-107页

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