提要 | 第1-9页 |
第1章 绪论 | 第9-42页 |
·致病性大肠杆菌研究进展 | 第9-26页 |
·致病机理 | 第9-20页 |
·流行病学 | 第20-22页 |
·临床特征 | 第22-23页 |
·检测与诊断 | 第23-26页 |
·菌壳疫苗研究进展 | 第26-33页 |
·基因E 的表达调控 | 第27-28页 |
·菌壳的结构 | 第28页 |
·菌壳的制备 | 第28-29页 |
·菌壳疫苗的实验研究 | 第29-31页 |
·菌壳重组疫苗 | 第31-32页 |
·菌壳的佐剂性质 | 第32-33页 |
·展望 | 第33页 |
·细菌基因组学和细菌致病机理 | 第33-42页 |
·细菌基因组学研究进展 | 第34-35页 |
·序列分析(Finds Hints in Sequences) | 第35-36页 |
·遗传学和基因组学 | 第36页 |
·功能基因鉴定 | 第36-40页 |
·比较基因组学(Comparative Genomics) | 第40页 |
·展望 | 第40-42页 |
第2章 噬菌体裂解基因E 温控诱导表达质粒的构建和菌壳的制备 | 第42-53页 |
·材料和方法 | 第42-43页 |
·菌株与质粒 | 第42-43页 |
·主要试剂 | 第43页 |
·本研究使用的主要仪器 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-47页 |
·本研究的技术路线 | 第43-45页 |
·PhiX174 噬菌体裂解基因E 的PCR 扩增 | 第45页 |
·PhiX174 噬菌体裂解基因E 的克隆与测序 | 第45-46页 |
·热敏溶菌质粒pBV220::E 的构建 | 第46页 |
·重组大肠杆菌DH5α(pBV220::E)溶菌动力学实验 | 第46-47页 |
·溶菌质粒pBV220::E 对大肠杆菌DH5α的裂解率实验 | 第47页 |
·结果 | 第47-50页 |
·PhiX174 噬菌体裂解基因E 的PCR 扩增 | 第47-48页 |
·PhiX174 噬菌体裂解基因E 的克隆与测序 | 第48-49页 |
·热敏溶菌质粒pBV220::E 的鉴定 | 第49页 |
·大肠杆菌DH5α(pBV220::E)溶解动力学实验 | 第49-50页 |
·溶菌质粒pBV220::E 对大肠杆菌DH5α的裂解率效果 | 第50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
·本章小结 | 第51-53页 |
·PCR 扩增并克隆了PhiX174 噬菌体裂解基因E | 第51页 |
·构建了重组溶菌质粒pBV220::E | 第51-52页 |
·重组溶菌质粒pBV220::E 对大肠杆菌具有很强的溶菌裂解作用,裂解率可达99.76% | 第52-53页 |
第3章 裂解基因E和葡萄球菌核酸酶A双温控表达质粒的构建和大肠杆菌菌壳的制备 | 第53-66页 |
·材料和方法 | 第53-54页 |
·菌株与质粒 | 第53页 |
·主要试剂和实验仪器 | 第53-54页 |
·实验方法 | 第54-59页 |
·本研究的技术路线 | 第54-56页 |
·葡萄球菌核酸酶A 基因的PCR 扩增 | 第56页 |
·温控调节盒CI-P 的PCR 扩增 | 第56-57页 |
·重组片段CI-P-SNA 的PCR 扩增 | 第57页 |
·重组片段CI-P-SNA 的克隆与测序 | 第57-58页 |
·热敏溶菌质粒pBV220::E::CI-P-SNA 的构建 | 第58页 |
·大肠杆菌DH5α(pBV220::E::CI-P-SNA)溶菌动力学实验 | 第58-59页 |
·溶菌质粒pBV220::E::CI-P-SNA 对大肠杆菌DH5α的裂解率实验 | 第59页 |
·结果 | 第59-63页 |
·葡萄球菌核酸酶A 基因的PCR 扩增 | 第59-60页 |
·温控调节片段CI-P 的PCR 扩增 | 第60页 |
·重组片段CI-P-SNA 的PCR 扩增 | 第60-61页 |
·重组片段CI-P-SNA 的克隆与测序 | 第61页 |
·热敏溶菌质粒pBV220::E::CI-P-SNA 的鉴定 | 第61-62页 |
·大肠杆菌DH5α(pBV220::E::CI-P-SNA)溶解动力学实验 | 第62-63页 |
·溶菌质粒pBV220::E::CI-P-SNA 对大肠杆菌DH5α的裂解率 | 第63页 |
·讨论 | 第63-64页 |
·本章小结 | 第64-66页 |
·PCR 扩增出了葡萄球菌核酸酶A 基因 | 第64页 |
·PCR 扩增出了温控调节片段CI-P-SNA | 第64页 |
·构建了重组溶菌质粒pBV220::E::CI-P-SNA | 第64-65页 |
·重组溶菌质粒pBV220::E::CI-P-SNA 对大肠杆菌具有很强的溶菌裂解作用 | 第65-66页 |
第4章 致病性大肠杆菌菌壳的制备研究 | 第66-77页 |
·材料和方法 | 第66-67页 |
·菌株与质粒 | 第66-67页 |
·主要试剂和实验仪器 | 第67页 |
·实验方法 | 第67-70页 |
·致病性大肠杆菌EPEC E2348/69 的鉴定 | 第67页 |
·致病性大肠杆菌EPEC E2348/69 电转化感受态细胞的制备 | 第67-68页 |
·溶菌裂解质粒的电转化 | 第68-69页 |
·电转化重组菌株的鉴定 | 第69页 |
·重组菌株的溶菌裂解动力学比较实验 | 第69页 |
·重组菌株的溶菌裂解效率比较实验 | 第69-70页 |
·EPEC E2348/69 菌壳的电子显微镜形态学观察 | 第70页 |
·结果 | 第70-75页 |
·致病性大肠杆菌EPEC E2348/69 的鉴定 | 第70-71页 |
·电转化重组菌株EPEC E2348/69(pBV220::E)的鉴定 | 第71-72页 |
·电转化重组菌株EPEC E2348/69(pBV220::E::CI-P-SNA)的鉴定 | 第72页 |
·重组菌株的溶菌裂解动力学比较实验 | 第72-73页 |
·重组菌株的溶菌裂解效率比较实验 | 第73页 |
·EPEC E2348/69 菌壳的电子显微镜形态学观察 | 第73-75页 |
·讨论 | 第75-76页 |
·本章小结 | 第76-77页 |
第5章 致病性大肠杆菌菌壳的特性研究 | 第77-85页 |
·材料和动物 | 第77页 |
·菌株与质粒 | 第77页 |
·实验动物 | 第77页 |
·实验方法 | 第77-80页 |
·不同渗透压溶液对EPEC 菌壳处理方法的研究 | 第77-78页 |
·F158 和F159 菌壳对小鼠的毒性实验 | 第78页 |
·致病性大肠杆菌EPEC E2348/69 对小鼠半数致死量(LD50)的测定 | 第78-79页 |
·EPEC E2348/69 菌壳对小鼠的免疫保护性实验 | 第79-80页 |
·结果 | 第80-83页 |
·不同渗透压溶液对EPEC 菌壳处理方法的研究 | 第80页 |
·F158 和F159 菌壳对小鼠的毒性实验 | 第80-81页 |
·EPEC E2348/69 细菌平板计数 | 第81页 |
·EPEC E2348/69 细菌对小鼠致死剂量的初步测定 | 第81-82页 |
·致病性大肠杆菌EPEC E2348/69 对小鼠半数致死量(LD50)的测定 | 第82页 |
·EPEC E2348/69 菌壳对小鼠的免疫保护性实验 | 第82-83页 |
·讨论 | 第83-84页 |
·本章小结 | 第84-85页 |
第6章 结论 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-99页 |
攻读博士学位期间的研究成果 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
详细摘要 | 第101-104页 |
Abstract | 第104-107页 |