| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 芝麻生产及主要研究现状 | 第11页 |
| 1.2 芝麻主要病害 | 第11-12页 |
| 1.3 芝麻茎点枯病 | 第12-15页 |
| 1.3.1 芝麻茎点枯病的致病菌 | 第12-13页 |
| 1.3.2 发病时期与症状 | 第13页 |
| 1.3.3 茎点枯病的主要防治措施 | 第13-14页 |
| 1.3.4 研究茎点枯病的目的和意义 | 第14-15页 |
| 1.4 芝麻抗茎点枯病种质资源筛选 | 第15页 |
| 1.5 脱落酸受体蛋白的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.5.1 脱落酸 | 第15-16页 |
| 1.5.2 PYL蛋白 | 第16-17页 |
| 1.6 类甜蛋白(TLPs)的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.6.1 病程相关蛋白 | 第17页 |
| 1.6.2 类甜蛋白的结构及特征 | 第17页 |
| 1.6.3 类甜蛋白的研究进展 | 第17-19页 |
| 2 田间芝麻品种对茎点枯病抗性鉴定 | 第19-25页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 芝麻材料 | 第19页 |
| 2.1.2 培养基的配制 | 第19-20页 |
| 2.1.3 病原菌菌株 | 第20页 |
| 2.1.4 接菌基质培养 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-21页 |
| 2.2.1 播种方式 | 第20页 |
| 2.2.2 芝麻品种接菌 | 第20-21页 |
| 2.2.3 病级调查分级标准 | 第21页 |
| 2.2.4 调查标准及统计方法 | 第21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-23页 |
| 2.4 讨论 | 第23-25页 |
| 3 芝麻SiPYL4、SiTLP基因的分子克隆与鉴定 | 第25-41页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第25-27页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 3.1.2 种子处理 | 第25页 |
| 3.1.3 材料种植 | 第25页 |
| 3.1.4 主要试剂和培养基的配制 | 第25-26页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第26页 |
| 3.1.6 主要试剂及试剂盒 | 第26-27页 |
| 3.1.7 实验载体 | 第27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-32页 |
| 3.2.1 芝麻RNA的提取及反转录 | 第27-29页 |
| 3.2.2 克隆SiPYL4、SiTLP基因 | 第29-32页 |
| 3.3 SiPYL4、SiTLP基因的生物信息学分析 | 第32页 |
| 3.4 结果分析 | 第32-39页 |
| 3.4.1 芝麻组织RNA检测 | 第32-33页 |
| 3.4.2 SiPYL4、SiTLP基因的克隆 | 第33-34页 |
| 3.4.3 SiPYL4 基因的序列分析 | 第34-35页 |
| 3.4.4 SiTLP基因的序列分析 | 第35-37页 |
| 3.4.5 SiPYL4、SiTLP基因在不同品种中扩增序列比对 | 第37-39页 |
| 3.5 讨论 | 第39-41页 |
| 4 茎点枯菌株胁迫下Si PYL4、SiTLP基因在芝麻根部组织的表达分析 | 第41-52页 |
| 4.1 实验材料 | 第41页 |
| 4.1.1 芝麻品种 | 第41页 |
| 4.1.2 茎点枯病菌 | 第41页 |
| 4.1.3 菌土的制备 | 第41页 |
| 4.2 实验方法 | 第41-43页 |
| 4.2.1 材料接菌 | 第41-42页 |
| 4.2.2 芝麻RNA提取及反转录 | 第42-43页 |
| 4.3 茎点枯病菌胁迫处理后不同时间点芝麻根中抗氧化酶含量测定 | 第43-48页 |
| 4.3.1 过氧化氢(H2O2)含量的测定 | 第43-44页 |
| 4.3.2 CAT活性测定 | 第44-45页 |
| 4.3.3 丙二醛(MDA)的测定 | 第45-46页 |
| 4.3.4 超氧化物化酶(SOD)的测定 | 第46-48页 |
| 4.4 结果与分析 | 第48-50页 |
| 4.4.1 SiPYL4、Si TLP基因在茎点枯病菌胁迫后在芝麻根部组织的实时荧光定量表达分析结果 | 第48-50页 |
| 4.4.2 茎点枯病菌胁迫处理后不同时间点芝麻根根中抗氧化酶含量测定结果分析 | 第50页 |
| 4.5 讨论 | 第50-52页 |
| 5 超表达Si PYL4、SiTLP拟南芥植株的获得及功能分析 | 第52-64页 |
| 5.1 实验材料 | 第52页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第52页 |
| 5.1.2 小米培养基的制备 | 第52页 |
| 5.1.3 实验质粒 | 第52页 |
| 5.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 5.2.1 SiPYL4、SiTLP基因植物过表达载体构建 | 第52-54页 |
| 5.2.2 农杆菌转化步骤 | 第54-55页 |
| 5.3 农杆菌介导的Floraldip法浸染拟南芥 | 第55-57页 |
| 5.3.1 植物材料及种植方法 | 第55页 |
| 5.3.2 SiPYL4、SiTLP的遗传转化 | 第55-56页 |
| 5.3.3 转SiPYL4、SiTLP基因拟南芥的获得和茎点枯病抗病性鉴定 | 第56-57页 |
| 5.3.4 超表达拟南芥植株的活性氧测定 | 第57页 |
| 5.3.5 超表达拟南芥株高和叶片数统计 | 第57页 |
| 5.4 结果与分析 | 第57-62页 |
| 5.4.1 SiPYL4、SiTLP基因过表达载体构建 | 第57页 |
| 5.4.2 超表达SiPYL4、SiTLP转基因拟南芥的验证 | 第57-58页 |
| 5.4.3 转基因拟南芥促进种子萌发 | 第58-59页 |
| 5.4.4 转基因拟南芥的表型分析 | 第59-60页 |
| 5.4.5 转基因拟南芥的抗病性鉴定 | 第60-61页 |
| 5.4.6 转基因拟南芥的活性氧测定 | 第61-62页 |
| 5.5 讨论 | 第62-64页 |
| 6 结论与展望 | 第64-66页 |
| 6.1 结论 | 第64-65页 |
| 6.2 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 附录 | 第72-73页 |
| 个人简历 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
