| 中文摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-10页 |
| 中英文缩写对照表 | 第15-16页 |
| 第一部分 ccRCC临床样本中microRNA表达谱变化及生物信息学分析 | 第16-48页 |
| 1 材料与方法 | 第17-21页 |
| 1.1 实验仪器及设备 | 第17页 |
| 1.2 主要试剂及试剂盒 | 第17-18页 |
| 1.3 MicroRNA芯片实验方法 | 第18-21页 |
| 2 MicroRNA芯片数据的分析方法 | 第21-26页 |
| 2.1 差异MicroRNA的筛选 | 第21页 |
| 2.2 靶基因分析 | 第21-22页 |
| 2.3 基因功能的显著性分析(GO-Analysis) | 第22-23页 |
| 2.4 Pathway的显著性分析(Pathway-Analysis) | 第23-24页 |
| 2.5 MicroRNA与基因的调控网络(MicroRNA-Gene-Network).. | 第24页 |
| 2.6 病理组织标本获得 | 第24-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-44页 |
| 3.1 MicroRNA芯片实验结果 | 第26-27页 |
| 3.2 差异MicroRNA的热图分析 | 第27-29页 |
| 3.3 差异MicroRNA的靶基因分析 | 第29-30页 |
| 3.4 差异基因的显著性功能分析(GO Analysis) | 第30-35页 |
| 3.5 差异基因的显著性pathway分析 | 第35-40页 |
| 3.6 差异MicroRNA和靶基因的相互作用网络分析 | 第40-42页 |
| 3.7 临床样本肿瘤组织中mir-373-5p的表达情况 | 第42页 |
| 3.8 临床样本肿瘤组织中TP53AIP1 的表达情况 | 第42-43页 |
| 3.9 临床样本肿瘤组织中TP53AIP1 蛋白的表达情况 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44页 |
| 5 小结 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 第二部分 Mir-373-5p过表达和干扰病毒包装及其靶基因TP53AIP1 的靶向关系验证 | 第48-62页 |
| 1 材料和仪器 | 第49-50页 |
| 1.1 质粒 | 第49页 |
| 1.2 菌株 | 第49页 |
| 1.3 细胞系 | 第49页 |
| 1.4 试剂和试剂盒 | 第49-50页 |
| 1.5 主要仪器 | 第50页 |
| 2 方法 | 第50-56页 |
| 2.1 pCDH-211、204 及干扰重组质粒的构建及鉴定 | 第50-52页 |
| 2.2 Mir-373-5p过表达及干扰慢病毒包装 | 第52-54页 |
| 2.3 慢病毒感染786-O细胞稳转株 | 第54页 |
| 2.4 靶基因psi-TP53AIP1 及突变载体构建及鉴定 | 第54-55页 |
| 2.5 TP53AIP1 靶基因荧光素酶活性的检测 | 第55-56页 |
| 3 结果 | 第56-57页 |
| 3.1 慢病毒感染786-O细胞结果 | 第56页 |
| 3.2 Mir-373-5p靶向调控TP53AIP1 的荧光素酶活性的检测 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 5 小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
| 第三部分 干扰和过表达Mir-373-5p对人肾癌细胞系功能的影响 | 第62-77页 |
| 1 材料与仪器 | 第62-63页 |
| 1.1 实验材料 | 第62-63页 |
| 1.2 实验仪器 | 第63页 |
| 2 实验方法 | 第63-65页 |
| 2.1 细胞培养 | 第63-64页 |
| 2.2 细胞转染 | 第64页 |
| 2.3 细胞增殖实验 | 第64页 |
| 2.4 克隆形成实验 | 第64页 |
| 2.5 细胞凋亡实验 | 第64页 |
| 2.6 体内成瘤实验 | 第64-65页 |
| 3 结果与分析 | 第65-72页 |
| 3.1 不同肾癌细胞系中核心MicroRNA和核心靶基因VHL表达水平检测 | 第65-66页 |
| 3.2 干扰Mir-373-5p对786-O细胞中TP53AIP1 蛋白表达的影响 | 第66页 |
| 3.3 检测Mir-373-5p对细胞增殖的影响 | 第66-68页 |
| 3.4 Transwell检测Mir-373-5p对786-O细胞迁移的影响 | 第68页 |
| 3.5 流式检测Mir-373-5p对786-O细胞凋亡的影响 | 第68-70页 |
| 3.6 肾癌细胞中敲低miR-373 的表达可抑制裸鼠体内肿瘤生长. | 第70-72页 |
| 4 讨论 | 第72-73页 |
| 5 结论 | 第73页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 综述miRNAs在肾细胞癌中的应用前景 | 第77-86页 |
| 1 肾细胞癌病因学 | 第77-78页 |
| 2 肾细胞癌生物学特性及临床意义 | 第78页 |
| 3 miRNA和肾细胞癌生物学影响研究 | 第78-81页 |
| 3.1 缺氧机制 | 第79页 |
| 3.2 细胞增殖 | 第79-80页 |
| 3.3 细胞凋亡 | 第80-81页 |
| 4 miRNA在 RCC临床诊断中的应用研究 | 第81页 |
| 5 miRNA在肾细胞癌治疗中的应用研究 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 在校期间发表论文及课题 | 第87页 |
