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MicroRNA-373在肾癌中的表达及生物学功能的研究

中文摘要第4-7页
abstract第7-10页
中英文缩写对照表第15-16页
第一部分 ccRCC临床样本中microRNA表达谱变化及生物信息学分析第16-48页
    1 材料与方法第17-21页
        1.1 实验仪器及设备第17页
        1.2 主要试剂及试剂盒第17-18页
        1.3 MicroRNA芯片实验方法第18-21页
    2 MicroRNA芯片数据的分析方法第21-26页
        2.1 差异MicroRNA的筛选第21页
        2.2 靶基因分析第21-22页
        2.3 基因功能的显著性分析(GO-Analysis)第22-23页
        2.4 Pathway的显著性分析(Pathway-Analysis)第23-24页
        2.5 MicroRNA与基因的调控网络(MicroRNA-Gene-Network)..第24页
        2.6 病理组织标本获得第24-26页
    3 实验结果第26-44页
        3.1 MicroRNA芯片实验结果第26-27页
        3.2 差异MicroRNA的热图分析第27-29页
        3.3 差异MicroRNA的靶基因分析第29-30页
        3.4 差异基因的显著性功能分析(GO Analysis)第30-35页
        3.5 差异基因的显著性pathway分析第35-40页
        3.6 差异MicroRNA和靶基因的相互作用网络分析第40-42页
        3.7 临床样本肿瘤组织中mir-373-5p的表达情况第42页
        3.8 临床样本肿瘤组织中TP53AIP1 的表达情况第42-43页
        3.9 临床样本肿瘤组织中TP53AIP1 蛋白的表达情况第43-44页
    4 讨论第44页
    5 小结第44-45页
    参考文献第45-48页
第二部分 Mir-373-5p过表达和干扰病毒包装及其靶基因TP53AIP1 的靶向关系验证第48-62页
    1 材料和仪器第49-50页
        1.1 质粒第49页
        1.2 菌株第49页
        1.3 细胞系第49页
        1.4 试剂和试剂盒第49-50页
        1.5 主要仪器第50页
    2 方法第50-56页
        2.1 pCDH-211、204 及干扰重组质粒的构建及鉴定第50-52页
        2.2 Mir-373-5p过表达及干扰慢病毒包装第52-54页
        2.3 慢病毒感染786-O细胞稳转株第54页
        2.4 靶基因psi-TP53AIP1 及突变载体构建及鉴定第54-55页
        2.5 TP53AIP1 靶基因荧光素酶活性的检测第55-56页
    3 结果第56-57页
        3.1 慢病毒感染786-O细胞结果第56页
        3.2 Mir-373-5p靶向调控TP53AIP1 的荧光素酶活性的检测第56-57页
    4 讨论第57-58页
    5 小结第58-59页
    参考文献第59-62页
第三部分 干扰和过表达Mir-373-5p对人肾癌细胞系功能的影响第62-77页
    1 材料与仪器第62-63页
        1.1 实验材料第62-63页
        1.2 实验仪器第63页
    2 实验方法第63-65页
        2.1 细胞培养第63-64页
        2.2 细胞转染第64页
        2.3 细胞增殖实验第64页
        2.4 克隆形成实验第64页
        2.5 细胞凋亡实验第64页
        2.6 体内成瘤实验第64-65页
    3 结果与分析第65-72页
        3.1 不同肾癌细胞系中核心MicroRNA和核心靶基因VHL表达水平检测第65-66页
        3.2 干扰Mir-373-5p对786-O细胞中TP53AIP1 蛋白表达的影响第66页
        3.3 检测Mir-373-5p对细胞增殖的影响第66-68页
        3.4 Transwell检测Mir-373-5p对786-O细胞迁移的影响第68页
        3.5 流式检测Mir-373-5p对786-O细胞凋亡的影响第68-70页
        3.6 肾癌细胞中敲低miR-373 的表达可抑制裸鼠体内肿瘤生长.第70-72页
    4 讨论第72-73页
    5 结论第73页
    参考文献第73-77页
综述miRNAs在肾细胞癌中的应用前景第77-86页
    1 肾细胞癌病因学第77-78页
    2 肾细胞癌生物学特性及临床意义第78页
    3 miRNA和肾细胞癌生物学影响研究第78-81页
        3.1 缺氧机制第79页
        3.2 细胞增殖第79-80页
        3.3 细胞凋亡第80-81页
    4 miRNA在 RCC临床诊断中的应用研究第81页
    5 miRNA在肾细胞癌治疗中的应用研究第81-82页
    参考文献第82-86页
致谢第86-87页
在校期间发表论文及课题第87页

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