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西瓜NF-Y家族基因的鉴定、表达模式和功能研究

致谢第6-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述及研究背景第16-27页
    前言第16-17页
    1.1 NF-Y亚基的结构特征第17-18页
    1.2 NF-Y复合物的研究第18-20页
    1.3 NF-Y在植物生长发育中的功能第20-22页
        1.3.1 在胚胎发育和种子萌发中的作用第20-21页
        1.3.2 在下胚轴伸长中的作用第21页
        1.3.3 在开花时间调控中的作用第21-22页
    1.4 NF-Y在非生物逆境中的作用第22-24页
        1.4.1 在干旱逆境中的作用第23页
        1.4.2 在高盐胁迫响应中的作用第23-24页
        1.4.3 在其他胁迫响应中的作用第24页
    1.5 NF-Y在植物抗病过程中的作用第24-25页
    1.6 本研究的目的意义及主要内容第25-27页
        1.6.1 研究的目的与意义第25-26页
        1.6.2 研究的主要内容第26-27页
第二章 材料与方法第27-35页
    2.1 试验材料第27-28页
        2.1.1 植株材料第27页
        2.1.2 菌株和载体第27页
        2.1.3 生物信息学软件和网络资源第27-28页
        2.1.4 PCR引物(见附表)第28页
    2.2 试验方法第28-35页
        2.2.1 供试植物的生长和培养第28页
        2.2.2 西瓜NF-Y家族基因的鉴定和命名第28页
        2.2.3 多重氨基酸序列的比对、系统进化树的构建和保守结构域分析第28页
        2.2.4 植物总RNA的提取和反转录合成cDNA第28-29页
        2.2.5 基因的克隆及载体构建第29页
        2.2.6 荧光定量PCR第29-30页
        2.2.7 外源信号分子诱导处理第30页
        2.2.8 西瓜枯萎病菌的接种处理第30页
        2.2.9 西瓜NF-Y家族蛋白的亚细胞定位第30页
        2.2.10 酵母转化实验第30-31页
        2.2.11 双分子荧光互补实验(BiFC)第31页
        2.2.12 拟南芥转化实验第31页
        2.2.13 转基因植株的筛选鉴定第31-32页
        2.2.14 转基因拟南芥植株拷贝数分析第32页
        2.2.15 Botrytis cinerea接种处理及病菌生长量测定第32页
        2.2.16 Pseudomonas syringae pv. tomato接种处理及生长量测定第32-33页
        2.2.17 接种处理后防卫基因表达分析第33页
        2.2.18 ABA、甘露醇、NaCl对转基因拟南芥种子萌发率影响的分析第33页
        2.2.19 Western blot第33-35页
第三章 结果与分析第35-63页
    3.1 西瓜NF-Y家族的鉴定与分析第35-40页
        3.1.1 基因的克隆和鉴定第35-37页
        3.1.2 西瓜NF-Y家族成员的序列分析第37-38页
        3.1.3 西瓜NF-Y家族系统进化树构建及蛋白保守结构域分析第38-40页
    3.2 西瓜NF-Y家族基因的表达模式分析第40-45页
        3.2.1 植物激素诱导下的表达模式分析第40-42页
        3.2.2 西瓜枯萎病菌侵染后的表达分析第42-45页
    3.3 西瓜NF-Y家族蛋白的亚细胞定位第45-46页
    3.4 西瓜NF-Y家族亚基间的蛋白互作特性分析第46-51页
        3.4.1 西瓜NF-YB与NF-YC亚基蛋白间的互作特性分析第46-48页
        3.4.2 西瓜NF-Y家族亚基蛋白间的互作特性分析第48-51页
    3.5 转西瓜NF-Y家族基因拟南芥植株的构建和筛选鉴定第51-53页
    3.6 转西瓜NF-Y家族基因拟南芥的生长表型分析第53-54页
    3.7 转西瓜NF-Y家族基因拟南芥的抗病性表型分析第54-61页
        3.7.1 转基因拟南芥植株对Botrytis cinerea的抗性反应表型第54-58页
        3.7.2 转基因拟南芥植株对Pst DC3000的抗性反应表型第58-61页
    3.8 转西瓜NF-Y家族基因拟南芥在ABA、甘露醇和NaCl胁迫下的萌发率变化第61-63页
第四章 结论与讨论第63-68页
    4.1 主要结论第63-65页
    4.2 展望第65-68页
参考文献第68-76页
附表 本文引物序列第76-86页

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