致谢 | 第6-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 文献综述及研究背景 | 第16-27页 |
前言 | 第16-17页 |
1.1 NF-Y亚基的结构特征 | 第17-18页 |
1.2 NF-Y复合物的研究 | 第18-20页 |
1.3 NF-Y在植物生长发育中的功能 | 第20-22页 |
1.3.1 在胚胎发育和种子萌发中的作用 | 第20-21页 |
1.3.2 在下胚轴伸长中的作用 | 第21页 |
1.3.3 在开花时间调控中的作用 | 第21-22页 |
1.4 NF-Y在非生物逆境中的作用 | 第22-24页 |
1.4.1 在干旱逆境中的作用 | 第23页 |
1.4.2 在高盐胁迫响应中的作用 | 第23-24页 |
1.4.3 在其他胁迫响应中的作用 | 第24页 |
1.5 NF-Y在植物抗病过程中的作用 | 第24-25页 |
1.6 本研究的目的意义及主要内容 | 第25-27页 |
1.6.1 研究的目的与意义 | 第25-26页 |
1.6.2 研究的主要内容 | 第26-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-35页 |
2.1 试验材料 | 第27-28页 |
2.1.1 植株材料 | 第27页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第27页 |
2.1.3 生物信息学软件和网络资源 | 第27-28页 |
2.1.4 PCR引物(见附表) | 第28页 |
2.2 试验方法 | 第28-35页 |
2.2.1 供试植物的生长和培养 | 第28页 |
2.2.2 西瓜NF-Y家族基因的鉴定和命名 | 第28页 |
2.2.3 多重氨基酸序列的比对、系统进化树的构建和保守结构域分析 | 第28页 |
2.2.4 植物总RNA的提取和反转录合成cDNA | 第28-29页 |
2.2.5 基因的克隆及载体构建 | 第29页 |
2.2.6 荧光定量PCR | 第29-30页 |
2.2.7 外源信号分子诱导处理 | 第30页 |
2.2.8 西瓜枯萎病菌的接种处理 | 第30页 |
2.2.9 西瓜NF-Y家族蛋白的亚细胞定位 | 第30页 |
2.2.10 酵母转化实验 | 第30-31页 |
2.2.11 双分子荧光互补实验(BiFC) | 第31页 |
2.2.12 拟南芥转化实验 | 第31页 |
2.2.13 转基因植株的筛选鉴定 | 第31-32页 |
2.2.14 转基因拟南芥植株拷贝数分析 | 第32页 |
2.2.15 Botrytis cinerea接种处理及病菌生长量测定 | 第32页 |
2.2.16 Pseudomonas syringae pv. tomato接种处理及生长量测定 | 第32-33页 |
2.2.17 接种处理后防卫基因表达分析 | 第33页 |
2.2.18 ABA、甘露醇、NaCl对转基因拟南芥种子萌发率影响的分析 | 第33页 |
2.2.19 Western blot | 第33-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-63页 |
3.1 西瓜NF-Y家族的鉴定与分析 | 第35-40页 |
3.1.1 基因的克隆和鉴定 | 第35-37页 |
3.1.2 西瓜NF-Y家族成员的序列分析 | 第37-38页 |
3.1.3 西瓜NF-Y家族系统进化树构建及蛋白保守结构域分析 | 第38-40页 |
3.2 西瓜NF-Y家族基因的表达模式分析 | 第40-45页 |
3.2.1 植物激素诱导下的表达模式分析 | 第40-42页 |
3.2.2 西瓜枯萎病菌侵染后的表达分析 | 第42-45页 |
3.3 西瓜NF-Y家族蛋白的亚细胞定位 | 第45-46页 |
3.4 西瓜NF-Y家族亚基间的蛋白互作特性分析 | 第46-51页 |
3.4.1 西瓜NF-YB与NF-YC亚基蛋白间的互作特性分析 | 第46-48页 |
3.4.2 西瓜NF-Y家族亚基蛋白间的互作特性分析 | 第48-51页 |
3.5 转西瓜NF-Y家族基因拟南芥植株的构建和筛选鉴定 | 第51-53页 |
3.6 转西瓜NF-Y家族基因拟南芥的生长表型分析 | 第53-54页 |
3.7 转西瓜NF-Y家族基因拟南芥的抗病性表型分析 | 第54-61页 |
3.7.1 转基因拟南芥植株对Botrytis cinerea的抗性反应表型 | 第54-58页 |
3.7.2 转基因拟南芥植株对Pst DC3000的抗性反应表型 | 第58-61页 |
3.8 转西瓜NF-Y家族基因拟南芥在ABA、甘露醇和NaCl胁迫下的萌发率变化 | 第61-63页 |
第四章 结论与讨论 | 第63-68页 |
4.1 主要结论 | 第63-65页 |
4.2 展望 | 第65-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
附表 本文引物序列 | 第76-86页 |