| 摘要 | 第3-6页 |
| abstract | 第6-9页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 第一章 低能量激光对ADSCS生物学行为的影响及机制研究 | 第16-33页 |
| 材料及方法 | 第18-26页 |
| 一、建立临床密闭无菌吸脂装置 | 第18页 |
| 二、实验材料及试剂 | 第18-20页 |
| 三、实验方法 | 第20-26页 |
| 1.标本获取来源 | 第20页 |
| 2.细胞分离 | 第20-21页 |
| 3.细胞表型检测 | 第21-22页 |
| 4.细胞成脂诱导分化鉴定 | 第22页 |
| 5.细胞成骨诱导分化鉴定 | 第22页 |
| 6.细胞成软骨诱导分化鉴定 | 第22-23页 |
| 7.细胞激光照射 | 第23页 |
| 8.细胞增殖实验 | 第23页 |
| 9.酶联免疫检测细胞因子表达 | 第23-24页 |
| 10.Western blotting技术检测氦氖激光(He-Ne)和镓铝砷激光(GaAlAs)照射前后ADSC细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节激酶(phospho-ERK),(AKT)、(phospho-AKT)、(P38)、(JNK)的信号变化 | 第24-25页 |
| 11.统计学分析 | 第25-26页 |
| 结果 | 第26-30页 |
| 一、体外培养人脂肪来源干细胞进行形态观察 | 第26页 |
| 二、流式细胞仪检测结果 | 第26页 |
| 三、细胞成脂诱导后结果 | 第26页 |
| 四、成骨诱导后钙结节茜红素染色结果 | 第26-27页 |
| 五、成软骨诱导后细胞阿斯利蓝染色结果 | 第27页 |
| 六、低能量激光(He-Ne激光和GaAlAs激光)对ADSCs增殖的影响 | 第27页 |
| 七、低能量激光对ADSCs中ANGⅡ分泌的影响 | 第27-28页 |
| 八、低能量激光对ADSCs中ANG1-7分泌的影响 | 第28页 |
| 九、低能量激光对ADSCs中PDGF分泌的影响 | 第28-29页 |
| 十、低能量激光对ADSCs中TGF-B分泌的影响 | 第29页 |
| 十一、低能量激光照射对ADSCs上AKT、P-AKT、ERK、P-ERK、P38、JNK蛋白表达的影响 | 第29-30页 |
| 讨论 | 第30-33页 |
| 第二章 RAS系统在LLL调控ADSCS生物学行为中的作用 | 第33-48页 |
| 材料和方法 | 第35-41页 |
| 一、实验材料及试剂 | 第35-36页 |
| 二、实验方法 | 第36-41页 |
| 1、人体脂肪组织样本 | 第36页 |
| 2、RT-PCR检测ADSCs上血管紧张素Ⅱ1型受体、2型受体基因和血管紧张素1-7受体MAS1表达 | 第36-37页 |
| 3、Q-PCR检测比较低能量激光处理前后ADSCs上血管紧张素Ⅱ1型受体、2型受体基因和血管紧张素1-7受体MAS1表达量 | 第37-39页 |
| 1)RNA提取步骤 | 第37页 |
| 2)纯度检测及电泳检测 | 第37页 |
| 3)逆转录 | 第37-38页 |
| 4)定量 | 第38-39页 |
| 4、酶联免疫CCK8法检测ANGⅡ处理ADSCs的增殖活性,筛选最适处理浓度 | 第39页 |
| 5、酶联免疫CCK8法检测ANG1-7处理ADSCs的增殖活性,筛选最适处理浓度 | 第39-40页 |
| 6、酶联免疫CCK8法检测ANGⅡ、ANGⅡ+AT1受体阻滞剂varsartan、ANGⅡ+AT2受体阻滞剂PD123,319和ANG1-7、ANG1-7+MAS1阻滞剂A779处理ADSCs的增殖活性 | 第40页 |
| 7、统计学分析 | 第40-41页 |
| 结果 | 第41-44页 |
| 一、RT-PCR检测表达ADSCs上血管紧张素Ⅱ1型受体、2型受体基因和血管紧张素1-7受体MAS1基因表达 | 第41页 |
| 二、Q-PCR检测比较低能量激光处理前后ADSCs血管紧张素Ⅱ1型受体、2型受体基因和血管紧张素1-7受体MAS1表达量 | 第41-42页 |
| 三、ANGⅡ处理对ADSCs增殖的影响 | 第42-43页 |
| 四、ANG1-7处理对ADSCs增殖的影响 | 第43页 |
| 五、ANGⅡ、ANGⅡ+AT1受体阻滞剂varsartan、ANGⅡ+AT2受体阻滞剂PD123,319和ANG1-7、ANG1-7+MAS1阻滞剂A779对ADSCs的增殖分析 | 第43-44页 |
| 讨论 | 第44-48页 |
| 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 附录 | 第57-85页 |
| 发表论文 | 第85-88页 |
| 参加会议论文 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
