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TGEV和PEDV重组猪痘病毒活载体疫苗的效力及载体生物安全评价

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
英文缩写词表第13-14页
第一章 猪痘病毒及其作为载体的应用第14-26页
    1 猪痘流行病学第14-15页
    2 猪痘病毒分子特性第15-16页
    3 SPV毒力相关蛋白及其功能第16-17页
        3.1 胸腺嘧啶核苷激酶第17页
        3.2 核苷酸还原酶第17页
    4 SPV活疫苗载体的特性第17-18页
    5 SPV载体疫苗的应用发展第18-20页
    6 展望第20-21页
    参考文献第21-26页
第二章 猪流行性腹泻病的研究进展第26-38页
    1 流行性腹泻流行病学第26-27页
    2 PEDV的分子特性第27-29页
        2.1 PEDV基因组第27-28页
        2.2 PEDV蛋白第28-29页
    3 PEDV的疫苗研究第29-31页
        3.1 灭活疫苗和弱毒疫苗第29-30页
        3.2 基因工程疫苗第30-31页
    4 展望第31-32页
    参考文献第32-38页
第三章 猪传染性胃肠炎疫苗的研究进展第38-46页
    1 TGEV的临床特性第38页
    2 TGEV分子特性第38-40页
        2.1 TGEV基因组第38-39页
        2.2 TGEV的四种结构蛋白第39-40页
    3 TGEV疫苗研究现状第40-42页
        3.1 TGEV传统疫苗第40-41页
        3.2 基因工程疫苗第41-42页
    参考文献第42-46页
第四章 表达猪传染性胃肠炎病毒S蛋白A位点的重组猪痘病毒的构建及免疫评价第46-62页
    1 材料与方法第46-49页
        1.1 质粒、细胞和病毒第46-47页
        1.2 方法第47-49页
    2 结果第49-55页
        2.1 猪传染性胃肠炎病毒S基因A位点PCR扩增结果第50页
        2.2 重组猪痘病毒在模型小鼠免疫应答反应第50-52页
        2.3 重组猪痘病毒rSPV-SA的生物安全性第52页
        2.4 重组猪痘病毒在猪模型免疫应答反应第52页
        2.5 新生仔猪被动免疫保护第52页
        2.6 仔猪剖检组织病理学观察第52-55页
    3 讨论第55-57页
    参考文献第57-62页
第五章 表达猪流行性腹泻病毒截短S1的重组猪痘病毒的构建及免疫评价第62-82页
    1 材料与方法第63-66页
        1.1 细胞和病毒第63页
        1.2 表达PEDV的截短S蛋白的重组猪痘病毒第63-64页
        1.3 重组SPV-Sa的PCR分析第64页
        1.4 间接免疫荧光第64页
        1.5 Western blot第64页
        1.6 动物实验第64-65页
        1.7 间接ELISA抗体滴度测定第65页
        1.8 细胞因子检测第65-66页
        1.9 中和抗体检测第66页
        1.10 统计学分析第66页
    2 结果第66-72页
        2.1 重组猪痘病毒rSPV-Sa的鉴定第66-68页
        2.2 重组猪痘病毒的安全性评估第68页
        2.3 重组猪痘病毒体液免疫和细胞免疫反应第68页
        2.4 新生仔猪攻毒实验评测第68-72页
    3 讨论第72-77页
    参考文献第77-82页
第六章 PEDV和TGEV二联重组猪痘病毒活载体疫苗的免疫评价第82-96页
    1 材料与方法第83-86页
        1.1 试验材料第83页
        1.2 重组猪痘病毒转移载体构建第83-84页
        1.3 重组猪痘病毒rSPV-TP的构建第84页
        1.4 重组病毒rSPV-TP的鉴定第84-86页
    2. 结果第86-90页
        2.1 重组猪痘病毒rSPV-TP分子生物特性鉴定第86-88页
        2.2 重组猪痘病毒的生物安全性第88页
        2.3 重组猪痘病毒rSPV-TP在小鼠模型的免疫应答反应第88-90页
    3 讨论第90-92页
    参考文献第92-96页
第七章 猪痘病毒活疫苗载体减毒及生物安全性评价第96-114页
    1 材料与方法第97-101页
        1.1 细胞与病毒第97页
        1.2 载体构建第97页
        1.3 缺失病毒的构建与纯化第97-99页
        1.4 基因缺失猪痘病毒体外增殖能力第99页
        1.5 遗传稳定性实验第99页
        1.6 动物安全性实验评价第99-100页
        1.7 间接ELISA抗体滴度测定第100-101页
        1.8 细胞因子检测第101页
        1.9 中和抗体检测第101页
        1.10 统计学分析第101页
    2 结果第101-105页
        2.1 缺失的猪痘病毒生物学特性第101页
        2.2 缺失猪痘病毒在不同宿主细胞系中的遗传稳定性第101-104页
        2.3 小鼠模型评价第104页
        2.4 兔动物模型评价第104页
        2.5 猪模型评价结果第104-105页
    3 讨论第105-111页
    参考文献第111-114页
全文总结第114-116页
致谢第116-118页
攻读博士学位期间发表的论文第118页

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