致谢 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
1.玉米生产现状 | 第10页 |
2.植物抗病信号传导途径 | 第10-12页 |
3.植物抗非生物胁迫信号途径 | 第12-15页 |
3.1 非生物胁迫下ABA信号转导途径 | 第12-14页 |
3.2 SA和JA信号交叉传导途径 | 第14-15页 |
4.ROS的产生和清除 | 第15-17页 |
4.1 逆境引起ROS的产生 | 第15-16页 |
4.1.1 生物胁迫下ROS的产生 | 第15-16页 |
4.1.2 干旱及盐胁迫下ROS的产生 | 第16页 |
4.1.3 温度胁迫下ROS的产生 | 第16页 |
4.2 ROS的清除 | 第16-17页 |
5.抗坏血酸过氧化物酶(APX)的研究进展 | 第17-21页 |
5.1 APX的来源及分类 | 第17-19页 |
5.2 APX的信号调节途径 | 第19页 |
5.3 APX基因在植物抗性中的研究 | 第19-21页 |
第二章 Zm-APX的克隆及生物信息学分析 | 第21-35页 |
1.材料与方法 | 第21-25页 |
1.1 实验材料 | 第21页 |
1.2 实验方法 | 第21-25页 |
1.2.1 植物总RNA的提取及检测 | 第21-22页 |
1.2.2 cDNA第一链的合成和检测 | 第22-23页 |
1.2.3 APX的克隆 | 第23页 |
1.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
1.2.5 APXPCR扩增产物的回收、连接与转化 | 第24-25页 |
1.2.6 生物信息学分析方法 | 第25页 |
2.结果与分析 | 第25-33页 |
2.1 RNA提取、纯化与第一链合成检测 | 第25页 |
2.2 Zm-APX基因的克隆分析 | 第25-26页 |
2.3 Zm-APX蛋白的亲/疏水性分析 | 第26-27页 |
2.4 Zm-APX基因相关序列分析 | 第27-31页 |
2.4.1 Zm-APX的cDNA序列及相应的DNA序列分析 | 第27-29页 |
2.4.2 Zm-APX的结构域预测 | 第29页 |
2.4.3 Zm-APX的二级结构预测 | 第29-30页 |
2.4.4 Zm-APX的信号肽预测 | 第30-31页 |
2.4.5 Zm-APX的扩膜结构分析 | 第31页 |
2.4.6 Zm-APX组织表达分析 | 第31页 |
2.5 不同物种氨基酸序列比对 | 第31-32页 |
2.6 Zm-APX的遗传进化分析 | 第32-33页 |
3.结论与讨论 | 第33-35页 |
第三章 Zm-APX的表达分析 | 第35-42页 |
1.材料与方法 | 第35-37页 |
1.1 实验材料 | 第35页 |
1.2 实验方法 | 第35-37页 |
1.2.1 材料的处理和取样 | 第35-36页 |
1.2.2 植物总RNA的提取及检测 | 第36页 |
1.2.3 cDNA第一链的合成和检测 | 第36页 |
1.2.4 荧光定量引物设计 | 第36-37页 |
1.2.5 数据处理 | 第37页 |
2.结果与分析 | 第37-39页 |
2.1 高温处理条件下Zm-APX基因的表达分析 | 第37-38页 |
2.2 干旱处理条件下Zm-APX基因的表达分析 | 第38页 |
2.3 NaCl处理条件下Zm-APX基因的表达分析 | 第38-39页 |
2.4 激素处理条件下Zm-APX基因的表达分析 | 第39页 |
3.结论与讨论 | 第39-42页 |
3.1 高温处理下Zm-APX的表达分析 | 第39-40页 |
3.2 干旱条件下Zm-APX的表达分析 | 第40页 |
3.3 NaCl胁迫条件下Zm-APX的表达分析 | 第40页 |
3.4 激素胁迫条件下Zm-APX的表达分析 | 第40-42页 |
第四章 Zm-APX的亚细胞定位 | 第42-52页 |
1材料与方法 | 第42-46页 |
1.1 实验材料 | 第42-43页 |
1.2 实验方法 | 第43-46页 |
1.2.1 定位结果预测 | 第43页 |
1.2.2 融合表达载体的构建 | 第43-44页 |
1.2.3 重组质粒和空载体的转化 | 第44页 |
1.2.4 农杆菌感受态细胞的制备 | 第44-45页 |
1.2.5 质粒提取方法 | 第45-46页 |
1.2.6 烟草种植及根瘤农杆菌介导瞬时转化 | 第46页 |
1.2.7 烟草下表皮细胞的激光扫描共聚焦显微镜观察 | 第46页 |
1.2.8 试剂配制 | 第46页 |
2.结果与分析 | 第46-50页 |
2.1 荧光表达载体的构建 | 第46-49页 |
2.2 亚细胞定位预测结果及亚细胞定位结果 | 第49-50页 |
2.2.1 Zm-APX亚细胞定位结果预测 | 第49页 |
2.2.2 Zm-APX亚细胞定位结果 | 第49-50页 |
3.结论与讨论 | 第50-52页 |
第五章 Zm-APX转拟南芥功能分析 | 第52-62页 |
1.材料与方法 | 第52-55页 |
1.1 实验材料 | 第52-53页 |
1.2 实验方法 | 第53-55页 |
1.2.1 过表达载体构建 | 第53页 |
1.2.2 相关基因real-timePCR的引物设计 | 第53页 |
1.2.3 转基因拟南芥阳性植株的筛选 | 第53-54页 |
1.2.4 转基因T_3代拟南芥非生物胁迫处理 | 第54-55页 |
2.结果与分析 | 第55-61页 |
2.1 过表达载体构建及重组质粒和空载体的农杆菌转化 | 第55页 |
2.2 转基因拟南芥T_0代种子的PPT筛选及RT-PCR检测 | 第55-57页 |
2.3 转基因拟南芥抗非生物胁迫鉴定和病程相关基因的表达分析 | 第57-61页 |
2.3.1 转基因拟南芥抗干旱胁迫鉴定和干旱相关基因的表达分析 | 第57-58页 |
2.3.2 转基因拟南芥抗高温胁迫鉴定和高温相关基因的表达分析 | 第58-59页 |
2.3.3 转基因拟南芥抗高盐胁迫鉴定和高盐相关基因的表达分析 | 第59-61页 |
3.结论与讨论 | 第61-62页 |
3.1 Zm-APX在抵抗非生物胁迫中的作用 | 第61-62页 |
3.2 Zm-APX下一步的研究展望 | 第62页 |
参考文献 | 第62-72页 |
Abatract | 第72-74页 |