摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
英文缩写词表 | 第10-12页 |
第1章 引言 | 第12-24页 |
1.1 FAM76B简介 | 第12页 |
1.2 PGRN简介 | 第12-18页 |
1.2.1 PGRN在组织中的分布 | 第13-14页 |
1.2.2 PGRN生物学功能 | 第14-16页 |
1.2.3 PGRN相互作用的蛋白质分子 | 第16-18页 |
1.3 启动子序列克隆和功能分析简介 | 第18-21页 |
1.3.1 启动子序列克隆的几种方法 | 第19页 |
1.3.2 启动子区的生物信息学分析和预测 | 第19-20页 |
1.3.3 启动子分析方法简介 | 第20页 |
1.3.4 启动子克隆与分析总结 | 第20-21页 |
1.4 课题研究意义及技术路线 | 第21-24页 |
第2章 FAM76B不同长度启动子的克隆及其活性检测 | 第24-38页 |
2.1 实验材料 | 第24-26页 |
2.1.1 细胞株与质粒 | 第24页 |
2.1.2 实验试剂及主要试剂配制 | 第24-25页 |
2.1.3 引物合成 | 第25-26页 |
2.1.4 主要仪器 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-32页 |
2.2.1 FAM76B启动子及其截短体PCR扩增的引物设计 | 第26-27页 |
2.2.2 FAM76B启动子及其截短体的PCR扩增与克隆 | 第27-30页 |
2.2.3 携带FAM76B启动子或FAM76B启动子截短体的检测载体的构建 | 第30-32页 |
2.2.4 FAM76B启动子及FAM76B启动子截短体活性的检测 | 第32页 |
2.3 实验结果 | 第32-35页 |
2.3.1 FAM76B启动子及FAM76B启动子截短体的克隆 | 第32-33页 |
2.3.2 携带FAM76B启动子和FAM76B启动子截短体的检测载体的构建 | 第33-34页 |
2.3.3 FAM76B启动子及FAM76B启动子截短体活性检测 | 第34-35页 |
2.4 讨论 | 第35-38页 |
第3章 与FAM76B启动子结合的转录因子的预测、克隆及其功能活性检测 | 第38-54页 |
3.1 实验材料 | 第38-39页 |
3.1.1 实验序列 | 第38页 |
3.1.2 实验软件和数据库 | 第38-39页 |
3.1.3 引物合成 | 第39页 |
3.2 实验方法 | 第39-43页 |
3.2.1 启动子区域的生物学软件分析 | 第39页 |
3.2.2 克隆获得筛选的转录因子 | 第39-41页 |
3.2.3 HEK 293细胞的传代培养 | 第41页 |
3.2.4 检测转录因子对FAN76B启动子活性影响 | 第41-43页 |
3.3 实验结果 | 第43-53页 |
3.3.1 能与FAM76B启动子结合的转录因子的预测分析 | 第43-44页 |
3.3.2 可能与FAM76B启动子结合的转录因子的克隆 | 第44-46页 |
3.3.3 筛选出的转录因子对FAM76B启动子调控作用检测 | 第46-53页 |
3.4 讨论 | 第53-54页 |
第4章 FAM76B敲除的HEK293细胞系中具有功能活性转录因子表达量变化检测 | 第54-60页 |
4.1 实验材料 | 第54-55页 |
4.1.1 细胞株 | 第54页 |
4.1.2 实验试剂及仪器 | 第54-55页 |
4.1.3 引物合成 | 第55页 |
4.2 试验方法 | 第55-57页 |
4.3 实验结果 | 第57-58页 |
4.4 讨论 | 第58-60页 |
第5章 结论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
附录 | 第70-80页 |
致谢 | 第80-82页 |
攻读硕士学位期间科研成果 | 第82页 |