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重组解鸟氨酸拉乌尔菌全细胞催化合成2,5-呋喃二甲酸的研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
缩略词注释表第10-11页
第一章 绪论第11-21页
    1.1 概述第11-13页
        1.1.1 2,5-呋喃二甲酸第11-12页
        1.1.2 解鸟氨酸拉乌尔菌第12-13页
    1.2 国内外研究进展第13-19页
        1.2.1 化学催化氧化HMF合成FDCA第13页
        1.2.2 生物催化氧化HMF合成FDCA第13-19页
    1.3 本论文主要研究内容第19-21页
        1.3.1 立体依据和研究意义第19页
        1.3.2 本论文主要研究内容第19-21页
第二章 2,5-呋喃二甲酸生产菌株的筛选及催化条件研究第21-31页
    2.1 前言第21页
    2.2 实验材料与方法第21-24页
        2.2.1 菌株第21页
        2.2.2 试剂和仪器第21-22页
        2.2.3 FDCA生产菌株的筛选和鉴定第22页
        2.2.4 发酵条件研究第22-23页
        2.2.5 全细胞催化反应第23页
        2.2.6 分析方法第23-24页
    2.3 结果与讨论第24-29页
        2.3.1 FDCA生产菌株的筛选和鉴定第24-25页
        2.3.2 产物FDCA的鉴定第25-26页
        2.3.3 FDCA发酵条件的研究第26页
        2.3.4 全细胞催化HMF生产FDCA第26-27页
        2.3.5 全细胞催化条件的优化第27-29页
    2.4 本章小结第29-31页
第三章 2,5-呋喃二甲酸合成途径的强化第31-47页
    3.1 前言第31-32页
    3.2 实验材料与方法第32-38页
        3.2.1 菌株、质粒和培养条件第32-34页
        3.2.2 试剂和仪器第34页
        3.2.3 分子生物学操作第34-36页
        3.2.4 全细胞催化反应第36页
        3.2.5 SDS-PAGE分析第36页
        3.2.6 产物检测方法第36-38页
    3.3 结果与讨论第38-46页
        3.3.1 阻断FDCA降解途径对FDCA产量的影响第38-39页
        3.3.2 表达HmfH和HMFO提高FDCA产量第39-41页
        3.3.3 FDCA合成途径中关键基因的优化第41-43页
        3.3.4 翻译水平上调节HmfH表达提高FDCA合成效率第43-45页
        3.3.5 HMF流加策略提高FDCA产量第45-46页
    3.4 本章小结第46-47页
第四章 解鸟氨酸拉乌尔菌细胞转录和蛋白水平的5-羟甲基糠醛代谢机制第47-62页
    4.1 前言第47页
    4.2 实验材料与方法第47-51页
        4.2.1 菌株和培养条件第47页
        4.2.2 试剂和仪器第47-48页
        4.2.3 转录组学分析第48-49页
        4.2.4 蛋白质组学分析第49-50页
        4.2.5 反转录实时定量PCR(qRT-PCR)第50-51页
    4.3 结果与讨论第51-60页
        4.3.1 转录组学结果分析第51-53页
        4.3.2 氧化还原过程分析第53-55页
        4.3.3 物质转运过程分析第55页
        4.3.4 中心代谢途径分析第55-56页
        4.3.5 蛋白质组学分析第56-60页
        4.3.6 HMF代谢过程分析第60页
    4.4 本章小结第60-62页
第五章 基于转录和蛋白质组学分析的2,5-呋喃二甲酸合成途径改造第62-76页
    5.1 前言第62页
    5.2 实验材料与方法第62-66页
        5.2.1 菌株和培养条件第62-63页
        5.2.2 试剂和仪器第63页
        5.2.3 分子生物学操作第63-65页
        5.2.4 蛋白纯化及酶学性质测定第65-66页
        5.2.5 全细胞催化第66页
        5.2.6 分析方法第66页
    5.3 结果与讨论第66-75页
        5.3.1 减少DHMF积累对FDCA合成的影响第66-70页
        5.3.2 进一步减少DHMF积累对FDCA合成的影响第70-72页
        5.3.3 FDCA合成途径中醛脱氢酶的鉴定第72-74页
        5.3.4 过表达AldH对FDCA合成的影响第74-75页
    5.4 本章小结第75-76页
主要结论与展望第76-78页
    主要结论第76-77页
    展望第77-78页
论文创新点第78-79页
致谢第79-80页
参考文献第80-88页
附录Ⅰ:作者在攻读博士学位期间发表的论文第88-89页
附录Ⅱ:论文中所用目的基因的核酸序列第89-95页
附录Ⅲ:HMF胁迫下相关基因表达倍数变化第95-102页

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