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马立克病毒单克隆抗体的制备及MEQ蛋白的表达纯化鉴定

致谢第5-8页
摘要第8-9页
文献综述第9-19页
    1 马立克病病毒的研究进展第9-18页
        1.1 MDV分类第9-10页
        1.2 MDV的流行病学第10-11页
        1.3 MDV基因组学及主要编码蛋白第11-12页
        1.4 MDV病毒结构学第12-13页
        1.5 MDV编码蛋白第13-15页
        1.6 MDV疫苗的研究进展第15-16页
        1.7 MDV诊断第16-17页
        1.8 MDV单抗研究进展第17-18页
    2 本研究的目的和意义第18-19页
引言1第19-20页
试验一 马立克病病毒纯化及鉴定第20-32页
    1 材料与方法第20-27页
        1.1 材料第20-22页
        1.2 方法第22-27页
    2 结果与分析第27-31页
        2.1 MDV纯化结果第27-28页
        2.2 MDV纯化鉴定第28-31页
    3 讨论第31-32页
引言2第32-33页
试验二 MDV单克隆抗体的制备第33-42页
    1 材料与方法第33-38页
        1.1 材料第33-34页
        1.2 方法第34-38页
    2 结果与分析第38-41页
        2.1 效价检测第38-39页
        2.2 单克隆抗体的IPMA筛选第39页
        2.3 单克隆抗体的IFA筛选第39-40页
        2.4 单克隆抗体的Western blot鉴定第40-41页
        2.5 单克隆抗体效价检测及亚型鉴定结果第41页
    3 讨论第41-42页
引言3第42-43页
试验三 马立克病病毒主要蛋白的表达第43-62页
    1 材料与方法第43-54页
        1.1 材料第43-44页
        1.2 实验方法第44-54页
            1.2.1 模板的获取第44-45页
                1.2.1.1 RNA的提取第44-45页
            1.2.2 反转录第45页
            1.2.3 载体构建第45-47页
            1.2.4 加A尾第47页
            1.2.5 连接pMD-19T第47-48页
            1.2.6 转化第48页
            1.2.7 菌液 PCR第48页
            1.2.8 测序第48页
            1.2.9 保菌第48页
            1.2.10 质粒的提取第48-49页
            1.2.11 PCR 产物回收第49-50页
            1.2.12 双酶切第50页
            1.2.13 连接pET-30a第50-51页
            1.2.14 蛋白表达第51-52页
            1.2.15 表达产物的初步鉴定及可溶性分析第52-53页
            1.2.16 蛋白纯化条件的摸索第53-54页
    2 结果与分析第54-61页
        2.1 PCR核酸电泳分析第54-55页
        2.2 琼脂糖凝胶回收DNA第55页
        2.3 菌液PCR第55-56页
        2.4 双酶切第56-57页
        2.5 SDS-聚丙烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定第57-58页
        2.6 Western blot鉴定第58-59页
        2.7 最适IPTG浓度的优化第59-60页
        2.8 Ni-NAT亲和层析第60-61页
    3 讨论第61-62页
参考文献第62-70页
英文摘要第70页

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