致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
缩写词 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-16页 |
1.1 红瓤核桃的介绍 | 第9页 |
1.2 花青苷的结构和基本性质 | 第9-10页 |
1.3 花青苷的提取、纯化和定性定量分析 | 第10-11页 |
1.3.1 花青苷的提取、纯化 | 第10页 |
1.3.2 花青苷的定性定量分析 | 第10-11页 |
1.3.2.1 薄层层析技术(TLC) | 第10-11页 |
1.3.2.2 紫外-可见光谱技术(UV-VIS) | 第11页 |
1.3.2.3 高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS) | 第11页 |
1.4 红瓤核桃花青苷的合成 | 第11-13页 |
1.4.1 花青苷合成过程 | 第11-13页 |
1.4.2 花青苷合成途径中的关键酶和转录因子 | 第13页 |
1.5 转录组技术的应用 | 第13-14页 |
1.6 研究的目的意义 | 第14-15页 |
1.7 技术路线 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-22页 |
2.1 试验材料 | 第16-17页 |
2.1.1 植物材料及样品采集 | 第16-17页 |
2.1.2 主要药品、试剂盒和仪器 | 第17页 |
2.1.3 PCR引物 | 第17页 |
2.2 实验方法 | 第17-22页 |
2.2.1 叶片和果皮中花青苷的提取、纯化、含量和组分测定 | 第17-18页 |
2.2.1.1 叶片和果皮花青苷的提取、纯化 | 第17-18页 |
2.2.1.2 超高液相色谱-串联质谱鉴定花青苷组分及含量 | 第18页 |
2.2.2 总RNA提取与检测 | 第18-19页 |
2.2.3 红瓤核桃和普通绿核桃叶片及果皮转录组文库分别构建及高通量测序 | 第19页 |
2.2.4 转录组生物信息学分析 | 第19-20页 |
2.2.4.1 转录组序列组装 | 第19页 |
2.2.4.2 基因功能注释 | 第19-20页 |
2.2.5 数字基因表达谱分析 | 第20页 |
2.2.5.1 表达谱测序及序列比对 | 第20页 |
2.2.5.2 基因表达水平统计 | 第20页 |
2.2.5.3 差异表达基因筛选 | 第20页 |
2.2.5.4 差异基因的GO和KEGG功能富集 | 第20页 |
2.2.6 qRT-PCR分析 | 第20-22页 |
3 结果与分析 | 第22-44页 |
3.1 不同色泽核桃叶片果皮发育期间花青苷组分和含量变化 | 第22-29页 |
3.1.1 UPLC-PDA条件的优化 | 第22页 |
3.1.2 MS/MS条件的优化 | 第22-25页 |
3.1.3 标准曲线的建立 | 第25页 |
3.1.4 加标回收率 | 第25-26页 |
3.1.5 不同时期核桃样品的花青苷类的种类 | 第26-29页 |
3.1.6 核桃样品中的含量变化 | 第29页 |
3.2 红瓤核桃和普通绿核桃叶片、果皮转录组测序及生物信息学分析 | 第29-44页 |
3.2.1 RNA提取及质量检测 | 第29-30页 |
3.2.2 mRNA测序数据 | 第30-32页 |
3.2.3 序列比对结果 | 第32-34页 |
3.2.4 差异表达基因 | 第34-35页 |
3.2.5 筛选候选基因 | 第35-44页 |
3.2.5.1 功能富集分析 | 第35-39页 |
3.2.5.2 与花青苷生物合成相关的差异表达基因的筛选 | 第39-41页 |
3.2.5.3 荧光定量验证候选基因 | 第41-44页 |
4 讨论 | 第44-47页 |
4.1 红瓤核桃叶片、果皮发育期间花青苷组分关系 | 第44页 |
4.2 红瓤核桃叶片、果皮与花青苷合成相关结构基因与转录因子的筛选 | 第44-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-56页 |
Abstract | 第56-57页 |
附表 | 第58-60页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第60页 |