| 摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-18页 |
| 1 黑色素生成相关研究 | 第12-14页 |
| 1.1 黑色素细胞 | 第12页 |
| 1.2 黑色素生成 | 第12-14页 |
| 2 GPR143研究进展 | 第14-18页 |
| 2.1 GPR143基因的结构及功能 | 第14-15页 |
| 2.2 GPR143对黑素体生成的作用 | 第15-18页 |
| 实验一 GPR143在绵羊皮肤组织中的表达及定位分析 | 第18-28页 |
| 1 实验材料 | 第18-19页 |
| 1.1 实验动物 | 第18页 |
| 1.2 实验用主要试剂 | 第18页 |
| 1.3 实验用主要仪器 | 第18-19页 |
| 2 实验方法和步骤 | 第19-23页 |
| 2.1 RNA提取 | 第19页 |
| 2.2 cDNA合成 | 第19-20页 |
| 2.3 引物设计及PCR反应 | 第20-21页 |
| 2.4 qRT-PCR的扩增 | 第21页 |
| 2.5 总蛋白提取 | 第21页 |
| 2.6 免疫印迹分析 | 第21-22页 |
| 2.7 免疫荧光分析 | 第22-23页 |
| 2.8 数据分析 | 第23页 |
| 3 结果 | 第23-28页 |
| 3.1 绵羊皮肤总RNA提取、PCR扩增及测序结果 | 第23页 |
| 3.2 皮肤组织的qRT-PCR扩增结果 | 第23-24页 |
| 3.3 皮肤组织的免疫印迹检测结果 | 第24-25页 |
| 3.4 皮肤组织的免疫荧光结果 | 第25-28页 |
| 实验二 Gpr143在不同毛色小鼠皮肤中的差异表达及定位 | 第28-34页 |
| 1 实验材料与主要试剂 | 第28页 |
| 1.1 实验动物 | 第28页 |
| 1.2 实验用主要试剂和仪器 | 第28页 |
| 2 实验方法和步骤 | 第28-30页 |
| 2.1 RNA提取及cDNA合成 | 第28页 |
| 2.2 引物设计及PCR扩增 | 第28-29页 |
| 2.3 qRT-PCR的扩增 | 第29页 |
| 2.4 免疫印迹分析 | 第29页 |
| 2.5 免疫荧光分析 | 第29-30页 |
| 2.6 数据分析 | 第30页 |
| 3 结果 | 第30-34页 |
| 3.1 小鼠皮肤总RNA提取、PCR扩增及测序结果 | 第30页 |
| 3.2 Gpr143 mRNA在小鼠皮肤组织中的表达 | 第30-31页 |
| 3.3 GPR143蛋白在小鼠皮肤组织中的表达 | 第31页 |
| 3.4 GPR143在小鼠皮肤组织中的定位 | 第31-34页 |
| 实验三 GPR143对小鼠黑色素细胞中黑色素生成的作用 | 第34-46页 |
| 1 实验材料与主要试剂仪器 | 第34-35页 |
| 1.1 实验材料 | 第34页 |
| 1.2 实验用主要试剂 | 第34页 |
| 1.3 实验用主要仪器 | 第34-35页 |
| 2 实验方法 | 第35-40页 |
| 2.1 小鼠Gpr143基因真核表达载体构建 | 第35-38页 |
| 2.2 小鼠黑色素细胞复苏、传代与冻存 | 第38页 |
| 2.3 Gpr143转染小鼠皮肤黑色素细胞 | 第38-39页 |
| 2.4 小鼠黑色素细胞中黑色素含量测定 | 第39页 |
| 2.5 细胞总RNA和总蛋白提取 | 第39页 |
| 2.6 qRT-PCR检测毛色相关基因 | 第39-40页 |
| 2.7 毛色相关基因免疫印迹分析 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-46页 |
| 3.1 全长PCR扩增 | 第40-41页 |
| 3.2 Gpr143克隆及验证 | 第41页 |
| 3.3 Gpr143真核表达载体构建及验证 | 第41-42页 |
| 3.4 Gpr143转染小鼠黑色素细胞及效率 | 第42-43页 |
| 3.5 转染后细胞内毛色相关基因mRNA表达水平 | 第43-44页 |
| 3.6 转染后细胞内毛色相关基因蛋白表达水平 | 第44页 |
| 3.7 转染后细胞内黑色素含量 | 第44-46页 |
| 讨论 | 第46-50页 |
| 1 GPR143在不同毛色绵羊和小鼠皮肤组织中的表达和定位 | 第46-47页 |
| 2 GPR143对小鼠黑色素细胞中色素生成的作用 | 第47-50页 |
| 全文结论及创新 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| Abstract | 第58-59页 |
| 附录 | 第60-64页 |
| 1、中英文对照及缩写 | 第60-61页 |
| 2、真核表达载体构建图 | 第61页 |
| 3、在读期间课题相关科研论著 | 第61-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
