| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文缩略词表 | 第8-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 神经母细胞瘤的治疗现状 | 第12-14页 |
| 1.1.1 简介 | 第12页 |
| 1.1.2 神经母细胞瘤的分期 | 第12页 |
| 1.1.3 神经母细胞瘤的风险分组 | 第12-13页 |
| 1.1.4 治疗方案 | 第13-14页 |
| 1.2 组蛋白去乙酰化酶 | 第14-18页 |
| 1.2.1 简介 | 第14-15页 |
| 1.2.2 HDAC抑制剂的分类 | 第15-16页 |
| 1.2.3 HDACI的作用方式 | 第16页 |
| 1.2.4 与HDACI联用的常用药物分类 | 第16-18页 |
| 1.2.5 LBH589 | 第18页 |
| 1.3 PI3K/MTOR/AKT信号通路 | 第18-21页 |
| 1.3.1 Akt信号通路在神经母细胞瘤中的异常活化 | 第18-20页 |
| 1.3.2 mTOR的组成和功能 | 第20-21页 |
| 1.4 ERK信号通路 | 第21-23页 |
| 1.4.1 ERK信号通路在神经母细胞瘤中的异常活化 | 第21-23页 |
| 1.5 研究意义 | 第23-24页 |
| 第二章 AKT和ERK活化导致LBH589耐药的机制研究 | 第24-41页 |
| 2.1 背景 | 第24-25页 |
| 2.2 实验器材 | 第25页 |
| 2.3 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.3.1 细胞株 | 第25页 |
| 2.3.2 药物与试剂 | 第25-26页 |
| 2.4 实验方法与配方 | 第26-35页 |
| 2.4.1 细胞培养 | 第26页 |
| 2.4.2 贴壁细胞传代培养 | 第26-27页 |
| 2.4.3 细胞复苏 | 第27页 |
| 2.4.4 细胞冻存 | 第27页 |
| 2.4.5 药物浓度筛选及处理细胞 | 第27-28页 |
| 2.4.6 超声裂解提取细胞内蛋白 | 第28页 |
| 2.4.7 BCA法蛋白定量 | 第28-29页 |
| 2.4.8 免疫印迹法(Westernblot) | 第29-33页 |
| 2.4.9 MTT检测LBH589IC50值 | 第33-34页 |
| 2.4.10 流式细胞术检测对癌细胞死亡的影响 | 第34-35页 |
| 2.5 实验结果 | 第35-40页 |
| 2.5.1 高风险神经母细胞瘤细胞株对LBH589的敏感性 | 第35页 |
| 2.5.2 Akt和ERK等相关蛋白在高风险神经母细胞瘤细胞株中的表达情况 | 第35-37页 |
| 2.5.3 高风险神经母细胞瘤细胞对LBH589敏感程度与本底p-S6(S240/244)表达水平的相关性分析 | 第37-38页 |
| 2.5.4 LBH589对Akt和ERK通路相关蛋白表达的影响 | 第38-39页 |
| 2.5.5 Akt和ERK等相关蛋白随LBH589处理时间的变化 | 第39-40页 |
| 2.6 讨论与小结 | 第40-41页 |
| 第三章 联合用药克服LBH589耐药机制 | 第41-56页 |
| 3.1 背景 | 第41-43页 |
| 3.1.1 PI3K/mTOR/Akt信号通路中的反馈调节 | 第41页 |
| 3.1.2 雷帕霉素 | 第41-42页 |
| 3.1.3 VS-5584 | 第42页 |
| 3.1.4 SCH772984 | 第42-43页 |
| 3.2 实验器材 | 第43页 |
| 3.3 实验材料 | 第43页 |
| 3.3.1 细胞株 | 第43页 |
| 3.3.2 药物与试剂 | 第43页 |
| 3.4 实验方法与配方 | 第43-44页 |
| 3.4.1 细胞培养与药物筛选 | 第43页 |
| 3.4.2 MTT检测LBH589与其他药物联合在高风险神经母细胞瘤中的协同作用 | 第43-44页 |
| 3.4.3 流式细胞术检测死亡细胞 | 第44页 |
| 3.4.4 蛋白免疫印迹法检测药物对相关蛋白水平的影响 | 第44页 |
| 3.5 实验结果 | 第44-55页 |
| 3.5.1 抑制mTORC1对LBH589诱导Akt和ERK活化的影响 | 第44-45页 |
| 3.5.2 同时抑制mTOR和PI3K对LBH589抗高风险神经母细胞瘤活性的影响 | 第45-48页 |
| 3.5.3 抑制ERK对LBH589抗高风险神经母细胞瘤活性的影响 | 第48-51页 |
| 3.5.4 同时抑制PI3K、mTOR和ERK对LBH589抗高风险神经母细胞瘤活性的影响 | 第51-55页 |
| 3.6 讨论与小结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
