| 摘要 | 第13-16页 |
| Abstract | 第16-19页 |
| 前言 | 第20-34页 |
| 1 肿瘤代谢 | 第20-22页 |
| 1.1 微环境与肿瘤代谢 | 第20-21页 |
| 1.2 缺氧对肿瘤代谢影响的研究 | 第21-22页 |
| 2 代谢组学 | 第22-30页 |
| 2.1 细胞代谢组学 | 第22-24页 |
| 2.2 同位素标记代谢组学 | 第24-30页 |
| 2.3 代谢组学在肿瘤代谢研究方面的应用 | 第30页 |
| 3 缺氧对肿瘤代谢影响的代谢组学研究现状 | 第30-31页 |
| 4 本文研究内容 | 第31-34页 |
| 4.1 立题依据 | 第31-33页 |
| 4.2 研究方法和目的 | 第33-34页 |
| 第一章 基于GC/MS技术的缺氧对乳腺癌细胞代谢影响的研究 | 第34-64页 |
| 1.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 1.1.1 实验试剂 | 第34-35页 |
| 1.1.2 实验仪器 | 第35页 |
| 1.2 实验方法 | 第35-39页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第35-36页 |
| 1.2.2 代谢物的提取 | 第36-37页 |
| 1.2.3 数据采集 | 第37页 |
| 1.2.4 数据分析 | 第37-39页 |
| 1.3 实验结果 | 第39-57页 |
| 1.3.1 贴壁细胞不同处理方法的比较 | 第39页 |
| 1.3.2 MDA-MB-231/MCF7/MCF10a各模型组TIC谱图 | 第39-41页 |
| 1.3.3 MDA-MB-231/MCF7/MCF10a各模型组模式识别分析 | 第41-42页 |
| 1.3.4 MDA-MB-231/MCF7/MCF10a各模型组差异代谢物的筛选 | 第42-47页 |
| 1.3.5 MDA-MB-231常氧组和缺氧组差异代谢物的多元统计和通路分析 | 第47-57页 |
| 1.4 讨论 | 第57-62页 |
| 1.4.1 缺氧对MDA-MB-231/MCF7/MCF10a糖酵解通路的影响 | 第57-58页 |
| 1.4.2 缺氧对MDA-MB-231/MCF7/MCF10aTCA循环的影响 | 第58-59页 |
| 1.4.3 缺氧对MDA-MB-231/MCF7/MCF10a磷酸五碳糖途径的影响 | 第59页 |
| 1.4.4 缺氧对MDA-MB-231/MCF7/MCF10a核苷酸代谢的影响 | 第59-60页 |
| 1.4.5 缺氧对MDA-MB-231/MCF7/MCF10a氨基酸代谢的影响 | 第60-61页 |
| 1.4.6 缺氧对MDA-MB-231/MCF7/MCF10a脂肪酸代谢的影响 | 第61-62页 |
| 1.5 本章小结 | 第62-64页 |
| 第二章 基于LC/MS技术的缺氧对乳腺癌细胞代谢影响的研究 | 第64-82页 |
| 2.1 实验材料 | 第64-65页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第64页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第64-65页 |
| 2.2 实验方法 | 第65-68页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第65页 |
| 2.2.2 代谢物的提取 | 第65-67页 |
| 2.2.3 数据采集 | 第67页 |
| 2.2.4 数据分析 | 第67-68页 |
| 2.3 实验结果 | 第68-79页 |
| 2.3.1 基峰离子流色谱图和模式分析图 | 第68-69页 |
| 2.3.2 常氧组和缺氧组差异代谢物的筛选 | 第69-70页 |
| 2.3.3 差异代谢物的相关性、层次聚类和代谢通路分析 | 第70-77页 |
| 2.3.4 差异代谢物的随机森林分类模型 | 第77-79页 |
| 2.4 讨论 | 第79-80页 |
| 2.4.1 缺氧对MDA-MB-231中心碳代谢和氨基酸代谢的影响 | 第79页 |
| 2.4.2 缺氧对MDA-MB-231核苷酸代谢的影响 | 第79-80页 |
| 2.4.3 缺氧对MDA-MB-231脂类代谢的影响 | 第80页 |
| 2.5 总结 | 第80-82页 |
| 第三章 基于GC/MS技术的缺氧对乳腺癌细胞中心碳代谢和回补路径代谢影响的研究 | 第82-100页 |
| 3.1 实验材料 | 第82-83页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第82-83页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第83页 |
| 3.2 实验方法 | 第83-84页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第83-84页 |
| 3.2.2 代谢物的提取 | 第84页 |
| 3.2.3 数据采集 | 第84页 |
| 3.2.4 数据分析 | 第84页 |
| 3.3 实验结果 | 第84-97页 |
| 3.3.1 MDA-MB-231和MCF7各模型组(常氧组vs缺氧组)TIC谱图 | 第84-87页 |
| 3.3.2 同位素标记代谢物的筛选 | 第87-88页 |
| 3.3.3 各通路代谢示意图及缺氧时各代谢物含量变化 | 第88-97页 |
| 3.3.3.1 TCA循环及缺氧时各代谢物含量变化 | 第89-91页 |
| 3.3.3.2 丙酮酸羧化作用及缺氧时各代谢物含量变化 | 第91-92页 |
| 3.3.3.3 谷氨酰胺回补路径及缺氧时各代谢物含量变化 | 第92-93页 |
| 3.3.3.4 还原性羧化作用及缺氧时各代谢物含量变化 | 第93-96页 |
| 3.3.3.5 缺氧时丙酮酸经磷酸五碳糖途径代谢生成比例 | 第96-97页 |
| 3.4 讨论 | 第97-98页 |
| 3.4.1 缺氧对MDA-MB-231和MCF7中心碳代谢途径的影响 | 第97页 |
| 3.4.2 缺氧对MDA-MB-231和MCF7回补路径的影响 | 第97-98页 |
| 3.5 总结 | 第98-100页 |
| 第四章 基于LC/MS技术的缺氧对乳腺癌细胞代谢影响的同位素标记代谢组学研究 | 第100-122页 |
| 4.1 实验材料 | 第100-101页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第100页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第100-101页 |
| 4.2 实验方法 | 第101-105页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第101-102页 |
| 4.2.2 代谢物的提取 | 第102-103页 |
| 4.2.3 数据采集 | 第103-105页 |
| 4.2.3.1 UltiMate~(TM)3000RSLC+QExactive数据采集 | 第103-104页 |
| 4.2.3.2 UPLC/Q-TOF/MS数据采集 | 第104-105页 |
| 4.2.4 数据分析 | 第105页 |
| 4.3 实验结果 | 第105-119页 |
| 4.3.1 常氧组和缺氧组离子色谱图 | 第105-108页 |
| 4.3.2 同位素标记代谢物筛选 | 第108-116页 |
| 4.3.2.1 同位素标记代谢物的靶向筛选 | 第108-113页 |
| 4.3.2.2 基于X13CMS的同位素标记代谢物的筛选 | 第113-116页 |
| 4.3.3 缺氧时各代谢物含量变化 | 第116-119页 |
| 4.4 讨论 | 第119-120页 |
| 4.5 总结 | 第120-122页 |
| 第五章 结论与展望 | 第122-126页 |
| 5.1 全文总结 | 第122-124页 |
| 5.2 本文创新点 | 第124页 |
| 5.3 不足与展望 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-134页 |
| 作者在学期间取得的学术成果 | 第134-148页 |
| 主要简历 | 第148-150页 |
| 致谢 | 第150-151页 |
